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文档简介
1、三、胶乳凝集试验【实验原理】类风湿因子(rheumatoid factor,RF)是一组抗变性IgG的自身抗体,它能与人或动物的变性IgG结合,而不与正常人IgG发生凝集反应。根据这一特点,将处理过的人IgG与羧化聚苯乙烯胶乳共价交联,使其吸附于胶乳颗粒载体上,成为致敏的胶乳颗粒。当待检血清中有RF时,则致敏的胶乳颗粒上的变性IgG与相对应的抗体(RF)发生反应,出现凝集现象。【主要试剂与器材】1.人IgG免疫胶乳试剂。2.生理盐水(或pH8.2甘氨酸缓冲盐水)。3.待检血清、阳性血清、阴性血清。4.微量加样器、黑色方格反应板等。【操作方法】1.在黑色方格反应板上三个格分别做好标记,用微量加样
2、器各加待检血清、阳性血清、阴性血清1滴(约50l),然后分别加免疫胶乳试剂1滴。2.用牙签充分混匀后,23min,观察结果。【结果判断】加入免疫胶乳试剂后,充分混匀,在室内的光线下23min出现清晰凝集颗粒,且液体澄清者为阳性,即RF阳性。若需做定量测定,可将血清做倍比稀释,重复上述测定,以出现凝集的血清最高稀释度为RF滴度。【注意事项】1.试剂应置4保存严禁冻结,用时摇匀。2.所有试验器皿和反应板均应洗净干燥。3.若阴性对照出现凝集,则表示免疫胶乳试剂有质量问题,不能使用。【应用与评价】类风湿性关节炎(RA)患者体内都存在有产生RF的B细胞克隆,在变性IgG(与抗原结合的IgG)作用下,可大量合成RF。类风湿性关节炎(RA)患者RF阳性检出率为75%,RF阳性支持RA的倾向性诊断,如为青年女性,应进一步做RA和风湿热的鉴别诊断;除RA外,还有多种疾病可检出高效价RF,如系统性红斑狼疮(SLE)、心内膜炎、结核、梅毒、病毒感染、肾移植等;不超过5%的
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