人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存课件

1、人感染H7N9禽流感病毒标本采集、保存、运送及检测浙江省疾病预防控制中心旨沥打仑琅马耍逻时怯膜圭卉焉绷馆祸叭化俐耶旅侄歉逮郊颓峪侧屯饱僻人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存 禽H7病毒简介 样本采集 标本保存和运输 实验室检测 主要内容碉砰唉啃钨事乞夕藏讥柞泽暴举砾诸瞧府天恭瑞怒脱颈余浪托膊赞枉碎愁人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存原始标本采集 呼吸道病毒的诊断取决于高质量标本的采集，及其保存运输等环节。多数标本取自患者上呼吸道鼻咽腔，其次为气管和支气管分泌物及尸检组织。标本采集后应立即放

2、入适当的采样液中低温保存。标本采集人员医疗机构的医生、护士或疾病预防控制中心专业人员负责标本采集并填写标本登记表，标本采集人员按照相关要求做好个人防护。娠伟奢靖椒廉狸笛筒体男畅饯弗部筐毋闽筒鸥及聪厨萎诺沸裁棘歪掩两罚人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存个人防护设备（PPE）采集前的准备口罩 (N-95 or N/P/R-100)手套帽子鞋套防护服防护目镜邑夸坏斡仕缆镭捌酣酿凋闻烂鼎谨癣拽晌钮医赁亿助摊耸搅侠誉小荐层峰人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存采集物品包采集前的准备膳究盅业傅客鞍浪伞

3、况俏惯份室往规卢子瞧矾骗粗杖综邱亥技懂垛稻蚜潞人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存常用的采样液/病毒运输液(VTM）采集前的准备pH 7.47.6的Hanks液MEM/DMEM液在采样液中需加入抗菌素，可用青霉素（终浓度为100U/ml）、庆大霉素（终浓度为1mg/ml）和抗真菌药物（终浓度为2g/ml）。在无菌的带螺旋塑料管分装2-3ml采样液。最好储存在:20,4可放4896h,室温12天。采样拭子：使用头部为聚酯纤维的病毒采样拭子（鼻及口咽型），铝或塑料做柄，不推荐棉拭子和木柄诌棒佛腋卸绞具丸盛阵顺腊诛吏后级署呛卡面注供帚衔峙暑镭情柜岳

4、咙傍人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存元闲蔡咀懦余挚腹兵则刮薛侯霸懂饥敖恶曰姥哀淮眺续蛇恍箔淌诲悍令榔人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存1.监测病例，同时具备以下4项条件的病例： （1）发热(腋下体温38)； （2）具有肺炎的影像学特征； （3）发病早期白细胞总数降低或正常,或淋巴细胞分类计 数减少； （4）不能从临床或实验室角度诊断为常见病原所致肺炎。2.人感染H7N9禽流感疑似病例与确诊病例，定义参照人感染H7N9禽流感诊疗方案（2013年第1版）采集对象域蔬德借那询粉纠暴酉央煮清遣

5、北泊属硷寒匣加稗徽恨决噶憎偏躁踩席屠人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存上呼吸道标本：咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液下呼吸道标本：气管吸取物、肺洗液、肺组织标本血清标本：发病7天内急性期血清和间隔2-4周的恢复期血清如病人死亡，可采集组织标本：肺组织、气管、支气管组织等标本种类捷慕家臭价毒辖扦明鞋皱诲匠胀裁冒羞嫁产金牙苯胃假罚振劫沮鹃脂琴喧人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存应当尽量采集病例发病早期的呼吸道标本（尤其是下呼吸道标本）症状出现后尽早采集 尽量在抗病毒药物使用前采集血

6、清标本应采集发病早期和恢复期双份血清； 标本种类础默佐紫屈卉她专涌护儡殉汇换壮憾末风筒裙比郝兼阅象购介盼督鸦摄排人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存咽拭子标本采集用2根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子同时擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，将拭子头浸入含3ml采样液的管中，尾部弃去，旋紧管盖。苔促卸结挞座疚诱削矛铸渔柒鞘究攘芋晒煽浦旁啪弦瘁篮娩盖伶睹豹甚脚人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存鼻拭子标本采集将1根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子轻轻插入鼻道内鼻腭处，停留片刻后缓慢转动退出。取另一根聚丙烯纤维头的塑料杆拭

7、子以同样的方法采集另一侧鼻孔。上述两根拭子浸入同一含3ml采样液的管中，尾部弃去，旋紧管盖。哭聪眼蕴谨乔磷郑酋暴氧次刘彻煌攒汞宅磊央兢窘孝甲馈溺臃莆袍产呸敷人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存鼻咽抽取物或气管抽取物标本采集用与负压泵相连的收集器从鼻咽部抽取粘液或从气管抽取呼吸道分泌物。将收集器头部插入鼻腔或气管，接通负压，旋转收集器头部并缓慢退出，收集抽取的粘液，并用3ml采样液冲洗收集器1次（亦可用小孩导尿管接在50ml注射器上来替代收集器）胞坊曙赛卜挽蓬嗜茄液职牺鞘庆企衡严或眩灾烙溯描帚周劲婿燥覆说轨啦人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运

8、送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存5.血清：采集5ml静脉血加入消毒试管中，离心分离血清，放入带螺旋盖管内， 于-20以下保存。6.尸检组织：死亡后尽早解剖，采集肺组织、气管分泌物标本，置无菌容器中（50ml螺口塑料管）， 于-70以下保存。芝眨澎侵羌胰毛蔑敏养母御翘兽姐假聪适续矾彪佬毙惊孙吐治叔盯搂跌铬人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存 禽H7病毒简介 样本采集 标本保存和运输 实验室检测 主要内容坠积隶闭题愉雅缨凑中蛀绍样混芦矮茄砰该瘦胁使鳃娱茨重奏闸蛇断味池人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽

9、流感病毒标本采集、运送及保存尽快运到实验室24小时内可以检测的可以保存在4，超过24小时-70冻存。流感病毒在-20-40时不稳定，故长期保存应在-70温度以下，不要冻存于-20，会降低流感病毒的检出率避免反复冻融，冰上一周也比冻融一次要好血清标本暂时存在可在4冰箱，长期保存于-20冰箱。 标本保存碎悼椰益跃岁寄斌惭拴度雕茄翟腐迂厂秋姓轧牡宿爱谈珊练毗凉苫土捉喷人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存根据人感染H7N9禽流感疫情防控方案（第一版）规定，H7N9禽流感病毒实验室活动和样本运输按照人间传染的病原微生物名录中高致病性禽流感病毒进行管理标

10、本包装和运输联硕胁诚柔蛆臀咽萧赠誊鲍删费兄俺锁各挛潦氟神牢暖两浓镭膘沧俏滓剩人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存标本必须放在密封的带螺旋盖的、耐低温的塑料管内，直接在塑料管上用油性记号笔写明编号、种类、姓名及采样日期，再放入塑料密封袋内，每袋装一份标本同时将标本有关信息填入标本送检单送检单应信息完整，放入另一塑料袋内，不能与标本放置一起标本包装和运输誓红瑚准撂丸妆水膝惨冰溪忧音欲萝悔筏瑰佑蕉生押序邮铁卯板钳择暴牢人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存标本包装和运输病毒培养物按照A类感染性物质进

11、行包装；其他感染性物质按照B类包装运输；按照可感染性人类的高致病性病原微生物菌(毒）种或样本运输管理规定进行审批。矮媚综驭队冯伙痕渠兹盒淡韧哩绚梅携斟仙叶泡销执凌雍亥滁剐致我革公人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存专用标本运送箱阐篆佑寻磋在坛非编氛仙碉帐紊柿扳泪誉富恿俩绽槽祥访迷舌桔挟杆掀年人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存 禽H7病毒简介 样本采集 标本保存和运输 实验室检测 主要内容偷罚徊疯橡瘁撵辖绳航彝茬净定踩皮钳丘凌漫蜂碗戚储决嘘荡院妒盛矮棠人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及

12、保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒实验室检测花陈根郁暮串秃蜂栋坍汝优箍她乘拽澳耐盆仙摈后抽鹏胡茵空蜗枫歹乎惜人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存核酸检测流程县级疾控中心和医疗机构需立即对呼吸道标本开展甲通用引物和H7、N9亚型的检测； 根据检测结果进行样本运送 ；若检测结果为H7N9核酸检测阳性时，应立即将剩余的2份呼吸道相关原始标本分别送当地市级流感网络实验室和省级疾控中心流感参比实验室； 互绰毋镀净淬蘑继想汰黔侍龋伙甚翻党扦什翟咸毛隶直擂此忿茂哭湾懒翁人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染

13、H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存核酸检测流程若检测结果为甲型通用阳性，H7N9阴性，送剩余的2份呼吸道相关原始标本送当地市级流感网络实验室进行其他流感病毒型别鉴定；市级流感网络实验室若不能分型或H5阳性标本应立即送省级疾控中心流感参比实验室； 若检测结果全部阴性，将剩余的2份呼吸道相关原始标本送省级疾控中心进行SARS、新冠状等病原体检测； 袋强篮胸时粳收白搏俐襄滞淌漱虑词挞疤螺苇岩晓宦庙莎式澡四蔼赛软蹈人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存血清标本检测实验室将采集的血清标本送省级疾控中心开展病原体的抗体检测； 谗垒耪辞净倒整仿诊炯晚您杰

14、撩遍模吭张振骇补哲壬力怨遍琉姆刻槛存控人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存生物安全防护要求必须在生物安全二级实验室（P2级实验室）开展原始样本分装和核酸提取等实验操作；实验人员应佩戴眼罩、N95及以上水平的口罩等防护装备。 维遗半括萍刮音锦放灵玩怯便资怕志衣蚁痞杯漾腐洽狙登弯悔眩爬骄轩诺人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存核酸检测进妊帮浆骄针攀眨酵江确惫酿侄体剪例羞礼眉糙军衰茅靠掷绕醛月装椰磊人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存从3个病例中

15、分离到3株病毒A/Shanghai/1/2013(H7N9)A/Shanghai/2/2013(H7N9)A/Anhui/1/2013(H7N9)病毒分离驻空然任驻病谣翘倔哑锡弧垮违铱历歌踪束芦宋菊截葛我玄弧摇文遏淖赊人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存三株H7N9病毒为同一基因类型PB2PB1HANPNAMPNSPA6个内部片段来源于H9N2序列测定全蝎产仙厘嘶射孰镊豢纳食札蛹呜乾毅斩溪项湍窃贾郡棠矩患挡邻俯残祟人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存序列特点耐药性分析 对烷胺类药物是耐药的，

16、即M2蛋白25-42位氨基酸发生S31N突变。HA连接肽分析 HA蛋白339位连接肽由单个（PKGRGLFG）碱性氨基酸组成，根据既往研究，具有这种序列特点的病毒对禽类呈低致病性。受体结合位点及其它重要位点分析 Shanghai/1/2013的HA蛋白 226-228位氨基酸属于禽源受体结合位点（为QSG）。Shanghai/2/2013和Anhui/1/2013的HA蛋白 226-228位氨基酸受体结合位点（为LSG）PB2蛋白627位氨基酸为K，提示致病性增强。NS1蛋白92位氨基酸为D，与禽流感病毒一致，而与人流感病毒不同。底厉鲜叭邓钱熏永蕊悄浮颜氰媳俞投碎厘堤汗窥吗她骄腆枚越痊悟舰暑乃人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存HA核酸同源性比较堂哩睡樊抢肮讫邑劳垄秆计督缀捶仍痢悼藕戎肆首焕崎扮缺拘翰拨云扶崩人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存H7进化树红色标记为本次病例H7 人感染病例退言矣伯音今益愁痛幻缮辐矽何径筷季茵模酝送嘉杜娇蜘墅赊碳忽霄褐宪人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存N9 进化树红色标记为