同济医院检验科ISO15189体系文件23过敏源检测

1、同济大学附属同济医院检验科免疫组项目操作指导书TJYYJYKMY/XMZ723第2版标题：过敏源检测第7章 第23号第 PAGE 4 页 共 NUMPAGES 4 页 目的：检测血清标本中的各种过敏源抗体。 适用范围：同济医院检验科免疫室。 项目名称：过敏源测定 检测方法：酶免疫分析法。 检测原理：患者血清标本中的免疫球蛋白或抗体在反应管中反应100分钟；漂洗后， 在反应管中加入抗IgE尿素酶结合液，反应100分钟或16小时；接着，再次彻底漂洗反应管，并加入底物/指示剂。与反应段结合的IgE又与结合液反应，再与底物反应，就出现了可见的由黄到紫的颜色变化，这样在这个实验中就可以对一个或更多特异性

2、免疫源相关的过敏反应做出阳性的鉴别诊断。 试剂：6.1 品牌：购自北京海澳公司。6.2 包装规格: 5人份（4项组合产品为10人份）. 6.3 内含物:每盒试剂含以下成分：6.3.1 包被有各种抗原的反应管。管中不同的反应段由隔离带分开，反应段表面包被有不溶性的过敏源用来检测IgE抗体以检测血清中总IgE。每个反应管中均带有阴性对照和阳性对照，阴性部分是无反应性的，阳性部分为不溶性的人IgE抗体，用来检测结合液和底物/指示剂是否还有效用。每个反应段的名称在管旁有标示。6.3.2 结合液：1瓶，4毫升。6.3.3 底物/显示剂：5瓶，每瓶2.5毫升。6.3.4 清洗液：1瓶，55毫升。6.3.5

3、 5支1毫升注射器（4项组合产品为10支注射器）。5个塑料烧杯（4项组合产品为10个塑料烧杯）。说明书：1份。7. 操作：7.1 打印工作单:7.1.1 打开电脑及打印机电源，7.1.2 双击齐效检验系统，登陆工号与密码；7.1.3 双击报告处理，单击标本申请信息，打开标本申请明细信息查询，打开左上角的所有信息，选择未生成报告信息。7.1.4 在检验项目处选择GMY，执行查询，点击打印申请单，打印出工作单。7.2 排列被检测标本:根据工作单上的库位号找出相应标本，并按工作单上的顺序排列。7.3 按以下步骤开始操作:7.3.1 去掉尾端的白色封头和顶端的红盖，让反应管内的缓冲液排出。用纱布擦拭细

4、头。7.3.2 将注射器接在反应管的顶端，将标本由细头接到注射器接头处。7.3.3 将反应管放平，在室温下（1830）反应100分钟。7.3.4 将标本从反应管排出，抽出注射器的推杆，由注射器针筒向反应管内注入1毫升（4项组合产品为0.8ml）清洗液，将注射器的推杆插入并推到底，用纱布擦拭细头。7.3.5 将绿色的结合液由细头推倒注射器的接头处。7.3.6 将反应管平放，在室温下（1830）反应100分钟或16个小时。7.3.7 将结合液由反应管排出，抽出注射器的推杆。加五滴清洗液到注射器的针筒中，让它流下。再在注射器针筒内注入1毫升（4项组合产品为0.8ml）清洗液，让它流过反应管，将注射器

5、的推杆插入并推到底，用纱布擦拭细头。7.3.8 在塑料烧杯中注入少量（约2毫升，4项组合产品为1.5ml）清洗液。通过反应管将清洗液抽到注射器中。抽出注射器的推杆，让清洗液流出。7.3.9 在注射器针筒内注入1毫升（4项组合产品为0.8毫升）清洗液，让它自然流下。重复一次，将注射器的推杆插入并推到底，用纱布擦拭细头。7.3.10 将黄色的底物/指示剂通过反应管抽到注射器中。7.3.11 平放反应管，强阳性标本在5分钟内可观察由黄到紫的颜色变化，弱阳性标本在90分钟内观察颜色变化。7.4 结果：阴性：黄色，阳性：紫色，按紫色着色的强度划分+ +。7.5 发送报告：详见免疫报告发送程序。8 参考范

6、围：正常人阴性。9. 临床意义：阳性表示该组分对病人导致过敏反应。10. 标本要求：血清，不要使用有大量溶血或高脂血症的标本。应避免标本中有颗粒性物质。11. 注意事项：11.1 由于实验在反应管中进行，所以只要使血清和结合液充满反应管，达到注射器接头处就行，不要进入注射器。将底物/指示剂抽到注射器中。11.2 当向反应管中加入试剂（标本、结合液或底物/试剂）时，应快而平稳的抽取，以便排出管内的空气。11.3 当反应管内加入标本或结合液后，有过多的气泡时，可以不清洗而在排出液体后直接重新加样。11.4 当反应管中加入底物/指示剂时，马上就会出现酶促反应，使底物转为其他产物（可以看见由黄到紫的颜色变化，一旦加入底物/指示剂后，请勿动反应管，以避免反应管中的液体晃动。11.5 如果不小心破坏了显色反应的过程，或觉得第79步清洗不彻底，请在10分钟内重