高媛-基因检测在生殖医学中的应用-20180502

1、2018-5-14常见遗传疾病疾病名称22q11.2 缺失综合征天使综合症突变类型*D所在染色体22q15DCP海绵状脑白质营养不良腓骨肌萎缩症色盲17p全球新生儿单基因疾病发生率约为10/1000。在加拿大，单基因疾病约占儿科门诊量的40%。PDPCDPPCX基因检测技术在生殖医学中的应用猫叫综合征5数据来自WHO囊性纤维化7q唐氏综合症21(/genomics/public/geneticdiseases/en/index2.html)杜氏肌营养不良(DMD)血色病Xp6高媛血友病XX克氏综合症神经纤维瘤17q/22q/?12q*突变类型:苯丙酮尿症(PKU)多囊肾PPP 点突变，或基因上

2、的插入和缺失16 (PKD1) or4 (PKD2)普拉德-威利综合征镰刀型贫血DCP1511p5qD 一个基因或基因的缺失国家辅助生殖与优生工程技术中心中国济南山东大学生殖医学研究中心 中国济南C 染色体异常，包括增加、缺少或者两者兼具T 三核苷酸重复疾病：基因长度增加脊肌萎缩症(SMA)DP神经鞘脂代谢相关的隐性常染色体遗传病PC15X数据来自维基百科中国烟台2018.05.03特纳综合症OMIM对遗传病及致病基因的统计数据生殖遗传包含各类遗传检测贯穿人的一生Number of Entries in OMIM (UpdatedApril 21st, 2018)MIM Number Pref

3、ixGene descriptionAutosomal15,055X Linked728Y Linked49MitochondrialTotals遗传检测与诊断：临床体格检查3515,867个人用药史家庭用药史实验室检测Gene and phenotype,combined720045274遗传检测新生儿筛查Phenotype description, molecular basisknown4,8631,455324123310植入前遗传学诊断：染色体检测分子诊断Phenotype description or locus, molecularbasis unknown1,583产前诊断产前

4、诊断：胎儿影像学检测，例如超声。组织活检后检测，绒毛膜，羊水及脐血穿刺。Other, mainly phenotypes with suspectedmendelian basis1,661106201,769胚胎植入前诊断或筛查新生儿筛查：常见遗传疾病，例如苯丙酮尿症。Totals23,1061,281606824,515Image from McGraw-Hill Companies, Inc.预防出生缺陷发生基因检测的临床应用时期筛查与诊断备注不明原因流产遗传性肿瘤遗传性疾病诊断植入前基因诊断产前诊断染色体非整倍体筛查，例如21三体（唐筛）、18三体、13三体等。目的基因测序，例如耳聋等

5、单基因病。孕中二级预防产前诊断-选择性流产新生儿筛查-治疗临床应用个性化医疗产后三级预防血液、代谢、激素、听力、心脏和其他先天性疾病的筛查新生儿疾病筛查病原体检测12018-5-14大纲大纲遗传病检测遗传病检测产前诊断产前诊断植入前遗传学诊断遗传病基因检测实验室质控植入前遗传学诊断遗传病基因检测实验室质控常用分子遗传检测方法遗传检测例1：一个先天性耳聋家系I1234II桑格测序ddPCR实时PCR123456核型分析III12345678III3 和III4均为先天性耳聋患者，俩人想生一个不耳聋的健康孩子，因此他们前来进行遗传咨询。二代测序多重连接探针依赖扩增多重PCR遗传检测在我们的生活中是

6、有必要的Sanger测序结果显示该夫妇分别为两个不同基因的纯合突变I123携带者4正常人正常人携带者GJB2 基因III4II正常对照c.235 del C，纯合34携带者56携带者携带者携带者SLC26A4基因III3III345678患者患者携带者患者正常人患者正常对照IVS 7-2 AG，纯合携带者，18 个月大2013年，听力正常的男婴出生。该家庭中所有其他家族成员均进行了基因检测，其中很多人是GJB2 c.235delC突变的携带者。致病突变在人群中广泛存在。理论上，该对夫妇可以生育一个听力正常但一定是个携带者的孩子。22018-5-14携带者筛查的必要性携带者筛查的必要性夫妇携带同

7、种致病突变121三体综合征2检出率1/5001/1000-1/500携带者筛查方案应用的临床影响至少携带一种遗传病致病突变：25.1%人群携带率（共6643位ECS受检者）；夫妇携带同种致病突变：3738对夫妻，8对夫妇携带同种致病突变，可能有0.21%的就诊夫妇面临遗传疾病生育高风险。通过NGS测序技术，对104个无关个体进行448 针对2570例受试者进行551个致病基因的筛查，种严重的儿童期隐性遗传病携带者筛查，结 结果显示84%为携带者，人均携带2.3个致病突果显示平均每人携带2.8个致病突变。变。参考资料：1 Jason M. Franasiak, et al. GenetMed.

8、2016 Nov; 18(11):1097-1101.2 医学遗传学第3版山大生殖孕前单基因遗传病筛查我们的筛查数据序号疾病名称遗传性耳聋苯丙酮尿症脊髓肌萎缩-地中海贫血-地中海贫血肝豆状核变性检测基因补充检测123456SLC26A4、GJB2、mtDNAPAH、PTS、GCH1、QDPR已完成的正常人群的检测SMN1HBA1、HBA2HBBSMN1基因7号外显子缺失(MLPA)3.7、4.2和SEA缺失突变(Gap-PCR)检出阳性致病突变主要集中在：检测人数携带致病突变人数携带致病突变率%耳聋：SLC26A4、GJB2；眼皮肤白化病：SLC45A2、OCA2；肝豆状核变性：ATP7B；脊

9、髓肌萎缩：SMN1；杜氏肌营养不良：BMD/DMD；甲型血友病：F8山东672131.335.8ATP7BOCA2、TYR、MATP、SLC45A2、AIM1、TYRP1其他区域5319407眼皮肤白化病合计12033.38视网膜色素变性甲基丙二酸血症婴儿型多囊肾杜氏/贝氏肌营养不良蚕豆病RHO、RPGR、CRB19MMAA、MMAB、MUT、MMACHC101112131415161718PKDH1DMDDMD基因大片段缺失/重复(MLPA)22号内含子倒位(Long-PCR)G6PD甲型血友病F8软骨发育不全结节化硬化症视网膜母细胞瘤神经纤维瘤FGFR3TSC1、TSC2RB1NF1、NF

10、2PKD1、PKD2成人型多囊肾大纲辅助生殖与产前诊断产前筛查无创产前DNA检测12-26W孕早期血清筛查9-孕中期血清筛查14-20W遗传病检测产前诊断13W颈项透明层（NT）11-13+6W胎儿系统B超20-24WB超检测胎儿发育、胎盘情况30-34W植入前遗传学诊断孕周0481216202428323640遗传病基因检测实验室质控PGD (3-6天）胚胎活检绒毛采集11-14W羊水采集18-23W脐血采集23W产前诊断遗传学检查32018-5-14多重PCR结果显示先证者和胎儿具有相同的突变，DMD基因外显子48-52缺失突变遗传检测例2: 一个杜氏肌营养不良家系DNA ladder15

11、00PMSFPMSFPMSF杜氏肌营养不良是X连锁隐性遗传的肌营养不良疾病。DMD在男孩中的发病率约1/3600,患者肌肉萎缩，成年前死亡报道存在。10009008007006004548191751Pm5004003434916P: 父源M: 母源S: 儿子F:该疾病由抗肌萎缩蛋白基因上的突变引起，抗肌萎缩蛋白基因位于X染色体上。30012448501364132胎儿20010044742346052病史介绍I1 和I2 有一个儿子，患DMD疾病。女方再次怀孕，来我中心进行遗传咨询。I12C组A组B组多重PCR结果显示先证者和胎儿具有相同的突变，DMD基因外显子48-52缺失突变，但是父母均

12、未见缺失。II12问题:MLPA检测方法在检测到先证者和胎儿DMD基因外显子48-52缺失突变的同时，也检测到了母源DMD基因外显子48-52杂合缺失突变。P034连续几次孕育具有遗传疾病的胎儿对于一对夫妇来说是一个灾难，如果不幸真的发生了，他们该怎么办呢？P035父源母源先证者（儿子）胎儿MLPA结果与多重PCR结果一致。MLPA结果显示母源杂合缺失突变，符合孟德尔遗传规律。该夫妇选择了选择性流产。我们如何帮助该夫妇生一个健康的孩子，可以利用胚胎植入前诊断来选择。试管婴儿与胚胎植入前遗传学诊断大纲收集生殖细胞体外受精受精卵分裂植入遗传病检测卵细胞第一代产前诊断精子第二代（ICSI)植入前遗传

13、学诊断遗传病基因检测实验室质控健康胚胎ICSI检测受体妈妈的卵细胞供体妈妈的卵细胞体外受精受体的受精卵线粒体基因检测供体的受精卵（精子为同一来源）第四代42018-5-14胚胎植入前遗传学诊断过程适用于单基因疾病PGD/PGS临床流程10健康婴儿降生获得家系的所有遗传信息29产前诊断胚胎移植3基因分型（先证者和父母）Array CGH84ICSI *治疗Sanger SequencingFISH5受精和胚胎培养Next Generation Sequencing*ICSI: Intracytoplasmic sperm injectionTur-Kaspa, I. et al.(2014) P

14、reimplantation genetic diagnosis for inherited neurological disordersNat. Rev. Neurol. doi:10.1038/nrneurol.2014.84荧光原位杂交-（fluorescent in situhybridization，FISH )PGD/FISH病例：罗氏易位携带者行PGD罗氏易位即罗伯逊易位，或丝端融合。发生于近端着丝粒染色体之间-13，14，15和21，22号染色体。最重要的罗氏易位发生在14和21号染色体之间。当两个近端着丝粒染色体在着丝粒部位或在着丝粒附近部位发生断裂后，二者的长臂在着丝粒处接

15、合在一起，形成一条由长臂构成的衍生染色体，两个断臂则构成一个小染色体，小染色体往往在第二次分裂时丢失。FISH问世于20世纪70年代，是在同位素原位杂交基础上发展起来的。原理是如果被检测的染色体或DNA纤维切片上的靶DNA与所用的核酸探针是同源互补的，二者经变性-退火-复性，即可形成靶DNA与核酸探针的杂交体。再用与荧光素分子偶联的单克隆抗体与探针分子特异性结合来检测DNA序列，最终完成定性、定位、相对定量分析。Speicher, M. R. et al. Nature Reviews Genetics6, 784 (2005).病例1 PGD/FISH-罗氏易位PGD/FISH-罗氏易位病史

16、：女，30岁。人工流产1次；自然流产2次均为妊娠80+天胚胎停止发育。染色体核型：女方: 45,XX,14, 21, +t (14q21q)；男方: 46,XY。AEBFCD再发风险：女方为罗伯逊易位携带者，是2次胚胎停育的原因。再次生育有1/6生育染色体完全正常的可能，1/6生育携带者可能，2/3发生流产、死胎、畸形可能。FISH for Robertson translocation carriera. 14,14/21,21 b. 14,14/21,21c. 14,14/21,21,21 d. 21,21建议：应用FISH技术（14/21染色体探针）进行PGDe. 14/21,21 f.

17、 14,14/21ICSI-PGD后，患者获得临床妊娠，并产前诊断进一步确诊，最终生育了一个健康的孩子。293052018-5-14微阵列比较基因组学杂交技术-PGD/aCGH（array- based comparative genomic hybridization,aCGH)病例1:相互易位携带者行PGD病史：女，27岁。继发性不孕2年。妊娠5个月胎死宫内行引产术后。核型： 46, XX, t (10; 12) (q11.2; q15)；男方核型： 46, XY。风险评估：告知女方染色体为相互易位。女方为携带者，表型可以完全正常。再次妊娠有1/18生育染色体完全正常胎儿的可能，1/18生

18、育相互易位携带者可能，其余有流产、死胎、畸形的可能。(例图)建议：1、首选进行胚胎植入前遗传学诊断，孕4个月行产前诊断。2、自然妊娠后行产前诊断。32/array-cgh-technology/染色体分离PGD/aCGH病例1:相互易位携带者行PGD与正常配子可能形成的18种合子核型XY后配子类型AB CD46, XX46, XX46, XX46, XX46, XX46, XX46, XX46, XX46, XX46, XX47, XX45, XX47, XX45, XX47, XX45, XX47, XX45, XX或或或或或或或或或或或或或或或或或或AD CBAB CBXY, +der(1

19、0),+der(12),t(10;12)(q11.2;q15),-10,-12XY, +der(12) t(10;12)(q11.2;q15),-12XY, +der(10) t(10;12)(q11.2;q15),-10XY, +der(10) t(10;12)(q11.2;q15),-12XY, +der(12) t(10;12)(q11.2;q15),-10XY, +10, -12AD CD# 4: Balanced; euploidAB ADCB CDAB AB*CD CD*CB CB*AD AD*AB CB CDADXY, -10, +12XY, +2 der(12) t(10;12

20、)(q11.2;q15),-10,-12XY, +2 der(10) t(10;12)(q11.2;q15),-10,-12XY, +der(12) t(10;12)(q11.2;q15)XY, +der(10) t(10;12)(q11.2;q15),-10,-12)XY, + der(10), + der(12), t(10;12)(q11.2;q15),-10XY, -12#11: +(10q11.2-pter),-(12q15-pter)CB CD ADABCD AD ABCBXY, +der(10) t(10;12)(q11.2;q15)XY, +der(12) t(10;12)(q

21、11.2;q15),-10,-12XY, + der(10), + der(12) t(10;12)(q11.2;q15),-12XY, -10AD AB CBCD33+(10q11.2-pter)-(12q15-pter)PGD/aCGH病例1:相互易位携带者行PGD传统的基于PCR的植入前遗传学诊断流程#胚胎序号结果注释可移植异常46Balanced;Euploid-10(q11.2-pter), +12(q15-pter)Balanced;Euploid9可移植异常11+10(q11.2-pter), -12(q15-pter)共获卵11枚，受精后培养至卵裂期获胚胎8枚，培养至囊胚期获胚

22、胎4枚进行PGD。35Atlas of preimplantation genetic Diagnosis. Third Edition. Anver Kuliev, 2014; P239.62018-5-14胚胎植入前遗传学诊断:例：一个肝豆状核变性家系一代测序结果显示先证者具有ATP7B基因的复合杂合突变肝豆状核变性或肝退化是一种铜在组织内累积的常染色体隐性遗传疾病，显现神经异常并肝脏疾病。ATP7B c.2333 GTATP7B c.3029 AC在肝豆状核变性疾病中，肝脏无法正确过滤铜离子，导致铜离子在肝，脑，眼及其他器官中的累积，久而久之，高浓度的铜导致威胁生命的器官损伤。ATP7B

23、 c.2333 GT& c.3029 AC家系病史介绍I1 和I2 夫妇具有一个女儿，女儿16岁时被发现是肝豆状核变性疾病患者。该夫妇想生育一个健康的孩子，遂来我中心进行遗传咨询。I12一代测序结果显示先证者同时具有ATP7B c.2333 GT和c.3029 AC两个突变，分别来自母亲和父亲。II1两个胚胎被活检，均不携带致病等位基因，一个健康男孩出生STR连锁分析结果显示8个STR位点可以用于胚胎筛选E3胚胎编号D13S315D13S314D13S301ATP7BD13S133D13S296D13S297D13S298D13S321D13S302D13S317227201263M17616

24、2201230216199261N182162201232229 229209 203257 267216199261N182162201232193229203267N186162201230193216199261N182162201232193229203267N186162201230193MNSTR连锁分析228 186164 162195 201230 230227 229201 209263 257MM195193176 228162 164201 195230 230195 193PGD目的基因测序预测的表型正常 ATP7BN正常等位基因突变等位基因195 195M正常绿色可用

25、STR位点蓝色目的基因红色与突变等位基因连锁的STR 位点黑色与正常等位基因连锁的STR位点PGD:成人多囊肾家系-常显遗传PGD:成人多囊肾家系-常显遗传成人多囊肾（Autosomal dominant polycystic kidney, ADPKD）系常染色体显性遗传病，是最为常见遗传性疾病之一。发病率为1/400-1/1000。与ADPKD相关的基因为位于16号染色体上PKD1(TRPP1)和PKD2(TRPP2)，大约85%的ADPKD是由于PKD1基因突变所致，大约15%是由于PKD2基因突变所致。PKD1基因突变主要表现为错义突变、无义突变、剪切、插入、缺失、重复等类型，目前已发

26、现74种导致常染色体显性遗传的成人多囊肾的PKD1基因突变类型。常染色体隐性遗传多囊肾疾病(autosomal reces-sive polycystickidney disease,ARPKD),也称多囊肾肝病(polycystic kidney andhepatic disease,PKHD),是一种多发于儿童肾脏及肝脏的严重单基因遗传病,发病率为1:200001:40000。PKD1基因c.7867 GT，p.Glu2623Ter杂合突变女方正常家系遗传病史：该夫妇未生育孩子，男方为患者，并且有家族成员患病。生育之前行PGD检测。女方原发性不孕，男方患常染色体显性成人多囊肾。72018-

27、5-14常染色体显性遗传单基因病无先证者家系单精子连锁分析及PGD检测问题:PKD1-1NPKD1-2NPKD1-3NPKD1-4NPKD1-5NPKD1-6NPKD1PKD1-7NPKD1-8NPKD1-9NPKD1-10NPKD1-11NPKD1-12NPKD1-13NPKD1-14NPKD1-15N232 239156 164219 223156 158NNN?M?172 178235 237177 188172 182233 237177 181传统的基于PCR的PGD可以帮助一对夫妇获得没有特定单基因遗传疾病的孩子，但是极少量的胚胎样本难以满足同时进行染色体异常筛查的需要。如果一个女

28、性超过了35岁，我们该做什么，怎么做？N正常等位基因致病等位基因M绿色标记- 有效STR位点蓝色标记目的基因及其位置红色标记致病基因连锁STR位点黑色标记正常等位基因连锁STR位点219158223156158 164156 156NNMNNM182 178177 188172 172181 177182233177172237181全基因组扩增产物可以同时满足PGS和单体型分型（PGD）胚胎4胚胎6PKD1基因测序结果未见c.7867 GT突变c.7867 GT突变未见c.7867 GT突变c.7867 GT杂合突变高通量测序在辅助生殖领域的应用技术原理：单体型分型在单基因PGD中的应用新生

29、儿遗传病筛查父亲母亲先证者CACTGGCCTTAACATCGG精子卵子新生儿基因型产前诊断父亲母亲NIPT12周后PGD/PGS胚胎/囊胚植入后妊娠胎儿父亲母亲先证者CTCATTCACC正常携带者携带者患者流产组织学分析自然/选择性流产单体型GGACGGAT患者先证者单体型分析在生殖医学中的应用：例： 一个脊肌萎缩症家系MLPA结果显示先证者和胎儿均为SMN1基因外显子7和8纯合缺失。脊肌萎缩症是一种影响肌肉运动控制的遗传性疾病，由于运动神经元的损伤，导致控制爬、走、站立和头部运动的肌肉萎缩。I12SMN1基因外显子7和8杂合缺失SMN1基因外显子7和8杂合缺失脊肌萎缩症在人群中发病率约1/6

30、000到1/10000，在汉族人群中的携带率约1/40到1/60。II12脊肌萎缩症由SMN1基因的异常或缺失引起，SMN1基因编码一种对运动神经元很重要的蛋白。大约95%的脊肌萎缩症病人均是由于SMN1基因外显子7的纯合缺失引起。SMN1基因外显子7和8纯合缺失SMN1基因外显子7和8纯合缺失家系病历介绍I1和I2夫妇曾经有一个患脊肌萎缩症的女儿，3个月时夭折。I2在2013年再次怀孕，产前诊断发现又是脊肌萎缩症患儿，该夫妇进行了选择性流产。该夫妇很渴望生一个健康的孩子，前来我中心咨询。82018-5-14单体型分析在生殖医学中的应用：基于STR 的连锁分析用于脊肌萎缩症PGD例 1 一个脊

31、肌萎缩症家系7个胚胎活检后进行基于STR的PGD诊断胚胎编号E1E3E11E13E18E21D5S679D5S125D5S680D5S681D5S435SMN1D5S610MAP1BD5S351D5S112D5S557D5S127D5S39186186186 182176142170140166 166146 146182 186166 176146 142186 186176 166142 146186 186176 166142 146186186166146N110223112176186 182170 166140 146186 186166 176146 142186 182170

32、166140 146170140M110225104180STR连锁分析N110M110186 182NMMNNNNNMMMNMM110116116 110215 221112 112176 188110 110221 223112 112188 176110 110221 223112 112188 176110 116225 215104 112180 176116 110215 221112 112176 188110 116225 215104 112180 176170 166140 146221112225104223 215112 112MM110 116目的基因酶切预测的表型未

33、见SMN1外显子7和8纯合缺失未见SMN1外显子7和8纯合缺失未见SMN1外显子7和8 未见SMN1外显子7和8纯合缺失SMN1 外显子7和8纯合缺失未见SMN1外显子7和8 SMN1 外显子7和8纯合纯合缺失188180176 176纯合缺失缺失225 215104 112N正常等位基因突变等位基因M携带者正常胚正胎常移植携带者患者携带者患者180 176绿色可用STR位点蓝色目的基因红色与突变等位基因连锁的STR 位点黑色与正常等位基因连锁的STR位点胚胎植入前筛查（PGS）结果例1： 一个脊肌萎缩症家系单体型分析在生殖医学中的应用：例 1 一个脊肌萎缩症家系SNP单体型分型母亲父亲先证者

34、E1E3E11E13E18E21GATACTGAC?TTACGCTACTGAC?TTACTCCGTCTGT?CGGCGATACTGAC?TTACGTCCGTCTGT?CGGCGCTACTGAC?TTACGCTACTGAC?TTACGCTACTGAC?TTACGATACTGAC?TTACGCTACTGAC?TTACGCTACTGAC?TTACGATACTGAC?TTACTCCGTCTGT?CGGCGCTACTGAC?TTACGCTACTGAC?TTACGATACTGAC?TTACTCCGTCTGT?CGGCATACTGAC?TTAC46,XY46,XXI12IIPGD12一个健康女孩在2015年

35、1月降生。C,T AT, C,T BT, C,T BC, C,T BT, C,T BT,C,T BT, C,T BC, C,T BT, C,T BC,AGTCGACCCACTCTATTCCABGTCGACCCACTCTATTCCAAGTCGACCCATGTCGACCCAAGTCGACCCACTCTATTCCAATCTATTCCACTCTATTCCAAGTCGACCCACTCTATTCCAAGTCGACCCATGTCGACCCAAGTCGACCCACTCTATTCCAAGTCGACCCATGTCGACCCA共7对夫妇26个胚胎样本利用SNP单体型分析进行了PGD,结果与传统的STR方法一致。47

36、,XX, +2245,XY, -4携带者正常携带者患者携带者患者问题:单体型分型在生殖医学中的应用例：一个先天性耳聋家系GJB2 c.235delCGJB2 c.299delAT单体型分型可以帮助高龄夫妇怀孕无异常胎儿，但是孕妇可能不希望在孕后做有创的产前诊断来进一步确定孕育胎儿无异常。此时我们可以做什么？怎么做？GJB2 c.235delC& c.299delAT基于无创产前诊断的单体型分型一代测序结果显示先证者具有GJB2基因的c.235delC和c.299-300delAT复合杂合突变，其中c.235delC来自母亲，c.299-300delAT来自父亲。92018-5-148个胚胎被活

37、检用于胚胎植入前遗传学诊断12个STR位点中筛选出7个有效的STR位点用于连锁分析GJB2-AT1GJB2-AT2GJB2-TG2GJB2-AC1D13S141GJB2-TG1GJB2D13S1830D13S633D13S250D13S1275D13S232D13S292236 236190 192188 188376 376121 121201 205236 236190 190188 188376 376121 121201 205胚胎编号E1E2E5E8E9E11192 190155 155443 435251 247188 180105 109202 204190 190153 155

38、435 435247 247180 182107 109200 204192 190155 155443 435251 247188 180105 107202 204192 190155 155443 435251 247188 180105 107202 204192 190155 155443 435251 247180 182107 109200 204192 190155 155435 435247 247180 182107 109200 204STR位点153 155435 443247 251180 188107 105200 202155 155435 435247 2471

39、82 180109 107204 204236 236192 190188 188376 376121 121201 205一代测序结果结论GJB2 c. 235 del C/c.299delATGJB2c.299delATGJB2 c. 235 del C/c.299delATGJB2 c. 235 del C/c.299delATGJB2c.235delCGJB2 c.235delC患者携带者患者患者携带者携带者155 155443 435251 247188 180105 107202 204第二次胚胎移植在GJB2基因两侧选择了12个STR位点进行分析，最终挑选了7个STR位点用于后续

40、PGD连锁分析。胚胎移植但植入失败二代测序和分析应用于胎儿非整倍体检测-无创产前检测无创产前用于非整倍体异常检测母体外周血样本母体和胎儿游离DNA游离DNA进行大规模平行测序胎儿的13、18及21号染色体均为三体低风险。比对和计数测序平台: Ion ProtonSwanson A, et al., Curr Genet Med Rep, 2013;1:113-121基于单体型分型的基因分型（流程图）产前无创和有创靶基因检测Mutant haplotype(F1)Normal haplotype(F0)Mutant haplotype(M1)Target gene testing (Sanger

41、 sequencing):The fetus took mutant allele of c.235 delaC of GJBG2 from mother and anormal allele from father. It is according with the data of PGD and NIPT.Normal haplotype(M0)Amniotic fluid testingcffDNA testingDuan T. et al., Genetics in Medicine, 2014; 16(12): 972-976.102018-5-14出生后脐血靶基因检测和听力测试我国首例阻断重度耳聋PGD健康婴儿诞生（2015.01.29）A01I234567891 01 11 21 31 41ms1 5106.21V7B01I23456V7891 01 11 21 31 41ms1506.21 7IIIV8800RRii2V88700LLii2V21.1Hz