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文档简介
1、TPPA和TRUST试验TP PA试验原理: 将梅毒Treponema Pallidum的精制菌体成分包被在人工载体明胶粒子上。这种致敏粒子和样品中的Treponema Pallidum抗体进行反应发生凝聚,产生粒子凝聚反应,从而可以检测出血清和血浆中Treponema Pallidum抗体,并且可用来测定抗体效价。实验步骤1、试剂准备。2、用微量滴管将稀释液滴入微量反应板的第1 孔中,共计4滴(100ul),从第2孔到第8孔各滴1(25ul)3、用加样枪吸取样品25ul,加入第1孔,混 匀,然后从第1孔中吸取25ul,加入第2孔,混匀。如此类推,进行倍比稀释,最后从第8孔弃25ul。4、用试
2、剂盒提供的滴管在第3孔中滴入1滴(25ul)未致敏粒子,从第4至8孔滴入一滴致敏粒子。5、轻轻混匀30秒,加盖后于室温下水平静置2小时,判断结果。结果判断:现象判定粒子聚集于一点,呈现出外周边缘均匀且平滑的圆形-粒子形成小环状,呈现出外周边缘均匀且平滑的圆形粒子环明显变大,其外周边缘不均匀且杂乱地聚集在周围+产生均一的凝聚,凝集粒子在底部整体上呈现膜状延展+判断基准:阳性: 未致敏粒子的反应图像判断为(-),致敏因子显示出反应图像为(+)时的最终稀释倍数为抗体效价。阴性: 无论未致敏粒子呈现何种反应图像,致敏粒子(最终稀释倍数1:80)的反应图像显示为(-)时,最终判断为阴性。注意事项:1、致
3、敏粒子和未致敏粒子在使用前均应混合均匀后再使用。2、微量反应板中的内容物充分混合后再静置。TRUST试验 甲苯胺红不加热血清试验(tolulized red unheated serum test,TRUST)原理: 用正常牛心肌的心类脂(Cardiolipin 二磷酸酰甘油衍生物)作为抗原,测定病人血清中的反应素(非特异性抗体-抗心磷脂抗体)。是一种非梅毒螺旋体抗原血清试验,主要用于梅毒的筛选和疗效观察。由于所用抗原不具有特异性,除梅毒病人外,一些非梅毒疾患也可暂时或长期地存在反应素。例如麻风、传染性单核细胞增多症、红斑狼疮、类风湿性关节炎等。此外,在孕妇、老年人和吸毒者有生物学假阳性反应 。 操作步骤:1、分别吸取50ul阳性和阴性对照血清均匀铺加在纸卡的两个圆圈中。2、用专用滴管及针头垂直分别滴加1滴TRUST试剂在上述血清中。3、按100转/分钟摇动混匀8分钟,肉眼观察结果。结果判断:1、阳性反应(+):可见中等或较大的红色凝聚物。2、弱阳性(+):可见较小的红色凝聚物。3、阴性反应:可见均匀抗原颗粒而无凝聚物。注意事项:1、TRUS
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