临床免疫检验实验课件：放射免疫技术T4 总甲状腺素(TT4)_第1页
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文档简介

1、放射免疫技术总甲状腺素(TT4)放射免疫技术放射性核素标记抗原或抗体常用的放射性核素： 125I、131I射线，晶体闪烁计数仪 3H射线，液体闪烁计数仪方法学类型：放射免疫分析（RIA） 免疫放射分析（IRMA）实验原理*AgAb与样本中待测Ag的含量在一定范围内呈负相关，根据标准曲线可推算标本中待测抗原的含量注：*放射性物质竞争主要的试剂和器材125I-T4抗T4抗体T4标准品（0、1、2.5、5、10、20g/dl）质控血清（高值14.0918.05g/dl ，低值3.815.89g/dl ）晶体闪烁计数仪（-计数仪）实验步骤1.试管编号（8只试管） 6个标准管编号分别为 B0，1，2，3

2、，4，5 质控管编号为 高，低2.加样 按照表格加试剂(l)和操作标准B0标准1-5高低标准品2525质控品2525125I-T450505050抗T4抗体50505050充分混匀，37温浴45min分离剂（混匀）500500500500充分混匀，静置15min，3500rpm离心20min弃上清，测定各管沉淀部分的放射性计数率实验结果NO.POSTIMEDOSECOUNTSCPMTOTL02300120024001330151125225024304010002000353080800160046301604008005730240100200实验数据标准曲线（lo

3、g-logit数据转化）Logit B/B0lgTT4 ng/ml0logitB/B0=(B/ B0)/(1B/ B0)计算高值和低值的浓度NO.POSTIMECOUNTSCPMConc.1830?2930?注意事项加样的顺序要严格按照操作顺序表。 加125I-T4和抗T4微球后，都要将试管中的液体摇匀。加了125I-T4的枪头直接打到垃圾桶里。加完试剂务必及时盖上盖子。加分离剂之前，要将试剂充分混匀。离心后弃上清的方法为将上清倒掉后，马上将试管倒扣在吸水纸上，静置5min，不能拍打试管。方法学评价1、高灵敏度（pg/ml）2、放射性污染3、标记物半衰期短导致试剂有效期短。4、标记物稳定性差，导致试剂盒批间、批内的变异较大；标准曲线有效期短，必须每次定标，造成浪费。5、操作繁琐，出报

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