《工业微生物学》试题（含答案）

1、 微 生 物 学 学期考试题 1(参考答案附后)一、 填空题 (每题 2.5 分，共 25 分)微生物是指的一群最低等生物。微生物主要包括等五大类,其主要特性是(l)(2)(3)(4)。细菌细胞壁的主要成分是，它是由聚合而成的大分子化合物,其构造是由构成骨架,接在上，相邻的短肽穿插相联而形成。原核生物的细胞核比较原始简洁， 没有包住，不具，故称拟核,它实际上是一条很长的环状构造,其功能是。噬菌体是病毒，它是一种大分子微生物,其生长生殖过程可分为五个步骤。微生物的四大养分类型是。微生物的养分五要素是。从自然界中分别筛选菌种一般可分为四个步骤。养分缺陷型的选育过程一般可分为等等六个步骤。称为根本培

2、育基。称为完全培育基。化学诱变剂按其作用方式可分为等四大类。紫外线(uv)是诱变剂, 它引起 DNA 构造转变的形式主要有常用的六种菌种保藏方法是。二、 名词解释 (每题分，共 18 分).革兰氏染色法2.巴斯德消毒法3.养分缺陷型4. 溶源性细菌5.活性污泥6.生物传感器三、问题解答 (共 57 分)l.何谓大肠菌群? 简述食品中大肠菌群数的测定方法。(6 分)现有一培育基配方如下: 可溶性淀粉 5%、 蛋白胨 1.5%、磷酸二氢钾 0.5%、硫酸镁 0.1%、琼脂 2%, pH5.0,试答复以下问题: (l)按养分物质来源分类, 属何种类型培育基? 为什么?(2)此培育基适于培育哪类微生物

3、?为什么?(3)简述配制 200ml 该斜面培育基的操作过程。 (7 分)现拟从自然界中分别筛选出-淀粉酶产量较高的枯草芽抱杆菌,试答复以下问题: (l)你认为应当到什么地方采集含此菌的样品较为适宜?(2)进展纯种分别时,为提高效率,依据该菌的何种特性可承受哪些相应的措施?(3)可承受哪些纯种分别方法?(4)在进展性能测定时, 可承受何种简化的初筛方法? (7 分)对于分支合成途径, 怎样才能积存大量的末端产物?试以简图表示并说明之。(4 分)什么是活菌计数法?现有一细菌菌液,其中的活菌数约为104105 个/ml,如何计算出其准确活菌数?试用简图表示并说明之。(7 分)在进展诱变育种时,对菌

4、悬液的制备有什么要求?经诱变处理后的菌液为什么要进展中间增殖培育?(6 分)简述高压蒸汽灭菌和干热灭菌的方法及其操作要点或留意事项。(5 分)画出曲霉和根霉的形态简图并标明各局部的名称。(5 分)什么是细菌生长曲线？可分为哪几个阶段？各有什么特点？(5 分)什么是基因工程？简述基因工程的主要操作步骤。(5 分) 微 生 物 学 学期考试题 1参 考 答 案一、填空题 (每题 2.5 分，共 25 分)微生物是指 全部形体微小，单细胞 或 构造简洁的多细胞，或没有细胞构造的一群最低等生物。工业微生物主要包括 细菌、放线菌、酵母菌、霉菌、噬菌体 等五大类, 其主要特性是(l) 种类多 (2) 分布

5、广(3) 生殖快(4) 代谢强(5) 易变异 。细菌细胞壁的主要成分是 肽聚糖，它是由很多肽聚糖单体聚合而成的大分子化合物,其构造是由N乙酰葡萄糖胺 与N乙酰胞壁酸 重复交替连接 构成骨架,短肽 接在N乙酰胞壁酸 上，相邻的短肽穿插相联而形成致密的多层网状构造 。原核生物的细胞核比较原始简洁， 没有 核膜包住，不具 核仁和典型染色体 ，故称拟核,它实际上是一条很长的环状 双链DNA 与少量类组蛋白及RNA 结合, 经有组织地高度压缩缠绕而成的一团丝状 构造, 其功能是起贮存遗传信息 和 传递遗传性状的作用。噬菌体是侵染原核生物(细菌、放线菌和蓝细菌)的 病毒，它是一种 超显微的，没有细胞构造的

6、，专性活细胞寄生的 大分子微生物, 其生长生殖过程可分为 吸附、侵入、增殖、成熟、裂解五个阶段。微生物的四大养分类型是 光能自养型、光能异养型、化能自养型、化能异养型。微生物的养分五要素是水、碳源、氮源、无机盐和生长因子。从自然界中分别筛选菌种一般可分为样品采集、增殖培育、纯种分别、性能测定 等四个步骤。养分缺陷型的选育过程一般可分为诱变、中间培育、淘汰野生型、养分缺陷型检出、养分缺陷型鉴定、变异株的筛选 等六个步骤。能够满足野生型菌株生长要求的最低成分合成培育基 称为根本培育基。 能够满足各种养分缺陷型菌株生长要求的培育基 称为完全培育基。化学诱变剂按其作用方式可分为 自然碱基类似物、烷基化

7、剂、移码诱变剂、亚硝酸 等四大类。 紫外线(uv)是 物理 诱变剂,它引起 DNA 构造转变的形式主要有 氢键断裂、DNA 链断裂、水合作用、T 二聚体形成。常用的六种菌种保藏方法是 斜面冰箱保藏法、石蜡油封藏法、麸曲保藏法、砂土管保藏法、甘油低温保藏法、冻干法。二、名词解释 (每题分，共 18 分).革兰氏染色法一种重要的细菌鉴别染色法。该染色法的步骤是：1先用结晶紫液初染；2再用碘液媒染与结晶紫形成不溶于水的复合物；3接着用 95%乙醇进展脱色；4最终再用番红沙黄液复染。经过这种染色方法可以将全部细菌根本上区分为两大类：革氏阳性细菌被染上紫色，革氏阴性细菌被染上红色。巴斯德消毒法一种低温消

8、毒法，具体的处理温度和时间各有不同，一般在 6085下处理 15s 至 30min。用于牛奶、啤酒、果酒和酱油等不宜进展高温灭菌的液体的消毒方法，主要目的是杀死其中无芽孢的病原菌，而又不影响它们的风味。养分缺陷型 是指在某些养分物质(如氨基酸、核苷酸、维生素等)的合成力量上消灭缺陷，必需在培育基中外加这些养分成分才能正常生长的变异菌株。溶源性细菌受到温存噬菌体侵染而带有原噬菌体却又没有形态上可见到的噬菌体粒子的宿主菌，称为溶源性细菌，简称溶源菌。活性污泥是由污水中生殖的好气性微生物群体组成的絮状污泥，具有很强的吸咐、分散和氧化分解污水中有机物质和其它物质的力量。生物传感器生物传感器是一种利用生

9、物活性物质的分子识别力量, 选择性地识别和测定各种生物化学物质的传感器。它是分析生物学与传感器技术穿插的产物。三、问题解答 (共 57 分)l.何谓大肠菌群? 简述食品中大肠菌群数的测定方法。(6 分)大肠菌群是指一群在 37、24 小时内能发酵乳糖、产酸产气、需氧或兼性需氧, 革兰氏阴性、无芽孢的杆状细菌。主要包括大肠杆菌、产气杆菌和一些中间类型的杆菌。检测大肠菌群的方法有多管发酵法与滤膜法两种:多管发酵法又称水的标准分析方法,大多数卫生单位与水厂均普遍承受此法。多管发酵法检测食品中大肠菌群数的操作过程为：(l) 培育基的制备, (2) 食品检样稀释, (3) 乳糖初发酵试验, (4) 平板

10、分别培育, (5) 证明试验, (6) 报告MPN (大肠菌群的最可能数)。滤膜法是一种快速的测定方法 , 其结果重复性较好, 又能测定较大体积的水样, 目前巳有很多供水公司承受此法。其检测程序为： 滤膜洗涤灭菌 滤膜过滤器安装 加水样抽滤 移滤膜贴于培育基上 培育与计数。现有一培育基配方如下:可溶性淀粉 5%、蛋白胨 1.5%、磷酸二氢钾 0.5%、硫酸镁 0.1%、琼脂 2%, pH5.0,试答复以下问题: (l)按养分物质来源分类, 属何种类型培育基? 为什么?(2)此培育基适于培育哪类微生物?为什么?(3)简述配制 200ml 该斜面培育基的操作过程。 (7 分)属半合成培育基。 因培

11、育基中，一局部承受自然材料，另一局部用的化学药品组成。此培育基适于培育霉菌。因 pH5.0 适于培育霉菌和酵母菌, 但酵母菌不能直接利用可溶性淀粉为碳源。操作过程：准确称量可溶性淀粉 10g、蛋白胨 3g、 磷酸二氢钾 1g、硫酸镁 0.2g、琼脂 4g 于 500ml 烧杯中 参加 200ml 水溶解 调整 pH5.0 加热融解 补足水分 分装试管 灭菌 摆斜面。现拟从自然界中分别筛选出-淀粉酶产量较高的枯草芽抱杆菌,试答复以下问题: (l)你认为应当到什么地方采集含此菌的样品较为适宜?(2)进展纯种分别时,为提高效率,依据该菌的何种特性可承受哪些相应的措施?(3)可承受哪些纯种分别方法?(

12、4)在进展性能测定时, 可承受何种简化的初筛方法? (7 分)(l) 应当到富含淀粉质的地方采集含此菌的样品。依据该菌的耐热特性可承受将含菌样品加热80 处理10min 后，杀死不耐热杂菌, 再进展纯种分别的相应措施。可承受划线分别、稀释分别、刮棒连续涂布等纯种分别方法。可承受平皿淀粉透亮圈法进展初筛。对于分支合成途径, 怎样才能积存大量的末端产物?试以简图表示并说明之。(4 分)对于分支合成途径, 为了获得大量某末端产物, 可选育抗该末端产物类似物的养分缺陷型突变菌株。如以下图分支途径，假设要获得高产的 G，可选育：缺失酶C 的D 养分缺陷型(汇流)；抗G 的构造类似物G,的突变株(消退反响

13、调控)。什么是活菌计数法?现有一细菌菌液,其中的活菌数约为104105 个/ml,如何计算出其准确活菌数?试用简图表示并说明之。(7 分)将待测含菌样品经适当稀释 , 使其中的微生物充分分散成单个细胞, 然后取肯定量的稀释样品液, 接种到平板上。经过肯定时间培育后, 由每个单细胞生长生殖而形成肉眼可见的单菌落, 即一个单菌落应代表原样品中的一个活菌。最终统计菌落数, 依据其稀释倍数和取样量, 换算出单位样品中所含的活菌数。要计算出活菌数约为 104105 个/ml 细菌菌液的准确活菌数, 可参照以下图自行图示。在进展诱变育种时, 对菌悬液的制备有什么要求?经诱变处理后的菌液为什么要进展中间增殖

14、培育?(6 分)诱变育种要求所处理的细胞必需是处于对数生长期同步生长的细胞，并且是均匀分散状态的单细胞悬液。首先是细胞的生理状态对诱变处理也会产生很大的影响，如细菌在对数期诱变处理效果较好； 霉菌或放线菌的分生孢子一般都处于休眠状态，所以培育时间的长短对孢子影响不大，但稍加萌发后的孢子则可提高诱变效率。 其次是分散状态的细胞可以均匀地接触诱变剂，又可避开长出不纯菌落。由于在很多微生物的细胞内同时含有几个核，所以即使用单细胞悬浮液处理，还是简洁消灭不纯的菌落。假设诱变剂产生的突变只在DNA 双链中的某一条单链，故该突变无法反映在当代的表型上。只经过DNA 的复制和细胞分裂，表型才会发生变异，消灭

15、不纯菌落，这就叫表型延迟。不纯菌落的存在，也是诱变育种工作中初分别的菌株经传代后很快消灭生产性状“衰退”的主要缘由。因此，经诱变处理后的菌液要经数小时的中间增殖培育后，再进展分别，可避开长出不纯菌落。简述加压蒸汽灭菌和干热灭菌的方法及其操作要点或留意事项。(5 分)加压蒸汽灭菌法： 将待灭菌的物件放置在盛有适量水的加压蒸汽灭菌锅或家用压力锅内，把锅内的水加热煮沸，并把其中原有的空气彻底放尽后将锅密闭，再连续加热就会使锅内的蒸汽压渐渐上升。为到达良好的灭菌效果，一般要求温度应到达 121压力为98kPa，时间维持 1520min。干热灭菌法： 将金属制品或清洁玻璃、陶瓷器皿放入电热烘箱内，在 1

16、50170下维持 12h 后，即可到达彻底灭菌的目的。在这种条件下，可使细胞膜破坏、蛋白质变性、原生质枯燥，以及各种细胞成分发生氧化。留意灭菌过程勿翻开电热烘箱门。画出曲霉和根霉的形态简图并标明各局部的名称。(5 分)参照其次章第四节霉菌中图 246 根霉 和 图 248 曲霉 绘图。什么是细菌生长曲线？可分为哪几个阶段？各有什么特点？(5 分)将细菌接入肯定量的液体培育基中，置适温下培育，每隔肯定时间，取样测其活菌数。以培育时间为横座标，以活菌数的对数为纵座标，绘制而成的曲线称细菌生长曲线。依据细菌生长速率常数的不同，一般可把细菌的典型生长曲线粗分为延迟期、对数期、稳定期和衰亡期等四个时期。延迟期的微生物 菌体内物质量显著增长，菌体体积增大；代谢活泼, 细胞生长速度渐渐加快；对外界