地中海贫血的现状与讨论

1、地中海贫血现实状况与讨论中心试验室吴杰第1页1925年，意大利医生Cooley首次报道, 因为全部病人均来自地中海之滨意大利和希腊，Cooley将其称之为“地中海贫血” （Thalassemia）。在 世 界 上 疟 疾 流 行 区域 最 常 见 。 因 为 杂 合 子 个 体 可 以 在 一 定 程 度 上 防 止 疟 疾 ，这 种保 护 还 可 见 于 镰 状 细 胞 特 征 个 体 。背景介绍第2页 地中海贫血是全世界广为流行遗传性溶血疾病，也是全球最大单基因遗传病之一，全世界最少有 亿多人携带此致病基因。第3页额头和颧骨突出双目眼距较宽鼻梁塌陷或没有鼻梁因为贫血，肤色苍白肝脾肿大地中海

2、贫血面容第4页在世界范围的分布在中国的分布在广东省的情况在梅州市的情况本院第5页Thalassemia中国南方不一样高发地区人群携带率 1 23%研究背景地中海沿岸国家：如意大利、希腊、塞浦路斯。非洲：主要在北非国家，阿尔及利亚及利比亚北部、埃及、苏丹和索马里北部亚洲：中东国家（沙特阿拉伯、伊朗、伊拉克）、中国、东南亚各国（印度、巴基斯坦、泰国、印度尼西亚、马来西亚等）。中国：长江以南省份，尤其以广东、广西、海南、四川、云南、台湾等省份为多发。 第6页在世界范围的分布在中国的分布在广东省的情况在梅州市的情况本院第7页中国地中海贫血蓝皮书（）据中国地中海贫血蓝皮书（）显示，我国重型和中间型地贫患

3、者在30万人左右，“地贫”基因携带者超出3000万人，包括近3000万家庭1亿人口，主要集中在长江以南，尤以两广地域最为严重，其中广东“地贫”基因携带者超出10%。第8页中国南方和地贫人群携带率 地域携带率(%) 地贫 地贫 广西 14.95 6.78 四川 1.92 2.18 贵州 4.72 台湾 4.20 1.10 香港 5.02 3.41第9页在世界范围的分布在中国的分布在广东省的情况在梅州市的情况本院第10页广东省地域地中海贫血遗传流行病学调查珠海韶关广州汕头湛江广东全省统计地贫占8.53%， 地贫占1.83%3.36%，累计10% 左右。第11页在世界范围的分布在中国的分布在广东省的

4、情况在梅州市的情况本院第12页有统计显示梅州市地贫约为10.41%，地贫为3.09%，累计约占13.50% ，发生率显著是高于省内平均水平10%。第13页在世界范围的分布在中国的分布在广东省的情况在梅州市的情况本院第14页本院15-地贫基因检测情况总量地贫地贫杂合地贫124432966129916823.84%10.44%1.35%第15页 珠蛋白肽链基因人类及各种动物Hb其血红素部分都是相同，不一样只是珠蛋白。珠蛋白肽链可分为两大类： 类肽链: 基因定位于16号染色体 、 非类肽链：基因定位于11号染色体 ， 第16页电泳分析筛查惯用方法滤纸电泳醋酸纤维素薄膜电泳凝胶电泳法（琼脂糖、聚丙烯酰

5、、淀粉胶）等电聚焦电泳法毛细管电泳法第17页因为毛细管电泳既含有凝胶电泳固有高分辨率、生物相容性优点，又俱有快速液相色谱法特点，可方便地连续洗脱样品。检测方便、快捷，重复性好，灵敏度高。已成为血红蛋白电泳首选方法。Peltier温控桥Anode +Cathode -检测器氘光灯电泳高电压9800伏第18页血红蛋白电泳图200多条变异带第19页血红蛋白变异体在Sebia毛细管电泳仪上电泳区域第20页第21页Hb AHb A2正常成人血红蛋白电泳图Hb F 第22页新生儿血红蛋白电泳图Hb AHb 第23页成人血红蛋白A2参考值：2.5% HbA2 3.5%HbA2 3.5% 血红蛋白A2升高，提

6、议做深入地中海贫血基因分析。第24页 而婴儿（新生儿）因血红蛋白还不稳定， 链还未完全表示，要2岁以后才能稳定下来，不能排除轻型地中海贫血，但此时对地中海贫血检出率较高，能检出包含静止型在内地贫。第25页基因型Hb HHb A2Hb F血常规靶细胞其它特征-a/aa（静止型）0正常正常轻微小红细胞症MCV 75-80fLMCH: 20-240出生时少许 (2%) Hb Barts-a/-a或- -/aa（轻型）0正常或降低正常小红细胞症血红蛋白降低Hb:110-12 0MCV: 65-75 MCH: 20-240出生时Hb Barts (5%)-/-a（Hb H病）10-15%降低可能增加小红

7、细胞症血红蛋白降低Hb: 8-11 g/dLMCV: 55-65 MCH: 20-24+不稳定血红蛋白溶血性贫血 (Hb H)-/- -(重型）-100 % Hb Barts严重贫血 水肿胎Hb: 8-11 g/dLMCV 100-110 MCH -胎儿水肿综合症 (hydrops fetalis)第26页Hb K带惯用内标法来确定未知区带位置Hb AHb A2未知区带确定第27页注意影响原因：使A2降低疾病：缺铁性贫血、HPFH、地贫、铅中毒、骨髓增生性疾病、铁幼粒贫血使A2升高疾病：疟疾、甲亢、HbS病第28页基因检测方法Gap-PCR 跨越断裂点PCR 检测地贫常见缺失RDB 反向斑点杂

8、交法 检测地贫地贫突变检测6种常见-地贫基因：SEA基因、3.7、4.2、CS、QS、 WS。16种常见地贫基因突变：41-42位点、654位点、 17位点、 71-72位点、 -29位点、 -28位点、E位点、43位点、14-15位点、27-28位点突变、CapM、IVSI-5M、IVS1-1M、31M。第29页第30页讨论：纯合子(THAITHAI)和双重杂合子(THAI SEA)可表现为经典巴氏胎儿水肿综合征，泰国缺失型地贫1复合其它常见地贫基因杂合子，能够造成中间型地贫发生。有泰国缺失型地贫1引发血红蛋白H病贫血程度比东南亚缺失型引发血红蛋白H病严重，应防止由泰国缺失型引发重型和中间型

9、地中海贫血婴儿出生。同理，当一方为常见地中海贫血基因型检测结果阴性，另一方为东南亚缺失型地中海贫血，还应考虑有没有合并少见地中海贫血，预防漏检。第31页日期姓名年纪地贫检测结果-7-21黎丽芳29岁检测结果正常 (Hb电泳提醒，异常HbJ 24.3%)-8-23杨仕耀28岁检测结果正常(Hb电泳提醒，HbD22.3 )-4-11石梓歆5月检测结果正常(Hb电泳提醒，HbK39.6%)-2-6黄恺14岁检测结果正常(Hb电泳提醒，HbE位置可见一区带9.3%)-4-9李青32岁检测结果正常（Hb电泳提醒，HbJ 28.4%）-4-23王永发32岁检测结果正常(Hb电泳提醒，HbQ 27.0%)-

10、10-18刘东龙44岁检测结果正常（Hb电泳提醒，异常HbK为44.9%）-11-15王吉洛8月未检出-地贫基因(Hb电泳提醒，HbK44%)-11-12朱美娥48岁未检出-地贫基因(Hb电泳提醒，HbK40.7%)-12-13赖来华28岁未检出-地贫基因(Hb电泳提醒，HbQ22.8%,HbQ衍生物0.7%)-12-15朱林丰26岁未检出-地贫基因(Hb电泳提醒，HbD25.4%)第32页分析中提到：当患者同时遗传有地贫基因和地贫基因双重杂合时，因为和肽链同时缺点在体内可出现互补现象，而在血液学上多表现为HbA2和HbF水平升高和红细胞形态改变等地贫特征，地贫特征被掩盖，所以临床上多诊疗为地

11、贫。所以对筛查为地贫患者要注意有没有复合地贫基因，及时进行基因诊疗，方便准确进行产前诊疗。第33页本院病例：-3-18 幸丽丽 女 27岁 电泳结果：HbA 80.2 HbA2 3.90 HbE:15.9 基因检测结果： SEA杂合缺失地贫复合E位点杂合突变 地贫第34页-3-23 曾聪聪 女 28岁电泳结果： HbA 93.70 HbF 1.30 HbA2 5.00 基因检测结果： SEA杂合缺失地中海贫血 （已排除常见-地贫突变类型；Hb电泳提醒，HbA2为5.0%，怀疑合并少见-地贫突变类型，提议进行珠蛋白基因测序分析。）第35页-6-30 卢丽枚 女 38岁 电泳结果： HbA 87.

12、7 HbF 10.6 HbA2 1.7 基因检测结果： SEA杂合缺失地中海贫血 Hb电泳提 示，HbF为10.6%，怀疑合并缺失型地贫 ，提议进行珠蛋白基因测序。第36页治疗进展对于地中海贫血治疗，国内则推荐中华医学会儿科学分会重型 地中海贫血诊疗和治疗指南，同时参考 TIF 最新诊疗提议。第37页TIF 最新诊疗提议以规范性长久输血为主，在有 HLA 相合情况下首选造血干细胞移植方法，对于 12 岁以下儿童不推荐采取姑息治疗伎俩 。 结合临床实践，对于已确诊为重型 地中海贫血患者，提议在血红蛋白90 g/L 时开始输血，单次输血时间在 3 h 以上，输入浓缩红细胞间隔时间在 2 周以上，将

13、血红蛋白维持在 120 g/L左右 。 去铁治疗是地中海贫血主要辅助治疗伎俩，提议 4个月左右动态检测 1 次患者血清铁蛋白水平，输血次数在1020 次以上时， 或者血清铁蛋白超出 1 000 g/L 时考虑开展此项治疗方案 。 当患者血清铁蛋白低于 1 000 g/L 时能够暂停治疗，进行动态观察。 铁胺等药品是惯用铁螯合剂，对于患者去铁治疗含有良好临床疗效第38页异基因造血干细胞移植同种异基因骨髓移植(Allogenic Bone Marrow Transplantation, BMT)脐血干细胞移植(Cord Blood Stem Cell Transplantation, CBSCT)外周血干细胞移植(Peripheral Blood Stem Cell Transpl