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文档简介

免疫印迹法检测ENA抗体实验目的掌握免疫印迹方法的基本原理、检测ENA抗体的基本操作方法；自身抗体的其它检测方法和相关的临 床意义；实验原理酶免疫印迹 抗原SDS电泳/转膜 （点膜） 免疫反应（加一抗/二抗） 显色试剂和器材1.待测标本；2.检测用膜载体；3.浓缩液；4.酶标二抗；5.显色底物A/B；6.终止液；实验步骤1. 配制工作液：按1：10的比例稀释浓缩液.（10 ml ）；2. 向每一反应槽孔加入0.5ml工作液和1份测试条， 温 育12分钟；3. 向每一反应槽孔加入待测血清10l，充分混匀， 温育30分钟；4. 弃去槽内液体，加入1ml工作液，洗涤1分钟， 重 复洗涤4次；5. 加入0.5ml工作液，酶标二抗20l，充分 混匀， 温 育30分钟；6. 同3步洗涤；7. 加入显色液A/B 各0.5ml， 室温反应10分钟；8. 每槽加入终止液0.5 ml， 混允， 1分钟后弃去槽内 液体，用蒸馏水洗涤3次； 9. 取出测试条，自然干燥后进行结果判定。结果判断1. 测试条蓝线与标准谱带“0”线对齐；2. 测试条蓝线下方的第一条区带为质控线；3. 带型分析；注意事项1. 标本溶血，高血脂,RF；2. 试剂盒放置至室温；3. 取测试条时防止损坏膜上抗原；4. 温育反应时间要准确；

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