车间空气中磷胺卫生标准

1、 车间空气中磷胺卫生标准本标准适用于生产和使用磷胺的各类企业。1卫生要求车间空气中磷胺最高允许浓度为0.02mg/m3(皮)。2 监测检验方法本标准的监测检验方法接受酶化学法，见附录A。附录A酶化学法(补充件)A.1原理磷胺对胆碱酯酶有抑制作用，而胆碱酯酶能促进乙酰胆碱的水解，乙酰胆碱的量可用氯化铁比色法定量测定，由此换算成磷胺的含量。本法的检出下限为0.1g/mL。A.2仪器a. 多孔玻璃板吸取管。b. 恒温水浴箱：370.5。c. 秒表。d. 分光光度计。e. 个体采样器。A.3试剂A.3.1吸取液：蒸馏水。A.3.2 缓冲液(pH=7.2)：将16.72g磷酸氢二钠(Na2HPO412H

2、2O)及2.72g磷酸二氢钾(KH2PO4)溶于1L水中。A.3.3氯化乙酰胆碱溶液：称0.1000g氯化乙酰胆碱，溶于100mL缓冲液(pH=7.2)，保存于冰箱内。A.3.4碱性羟胺溶液：临用前将下列溶液(1)及(2)等体积混合。溶液(1)：13.9%盐酸羟胺溶液，保存于冰箱内。溶液(2)：14%氢氧化钠溶液。A.3.5三氯乙酸溶液：10g三氯乙酸溶于100mL12盐酸中。A.3.610%氯化铁溶液：将10g氯化铁(FeCl36H2O)加到0.84mL盐酸及少量水中，微热使溶解，然后加水至100mL。A.3.7标准溶液：精确称取磷胺的纯品，溶于甲醇中，配成1mL含100mg磷胺的贮备液，保

3、存于冰箱中，临用时取适量贮备液用吸取液稀释配成1mL含2g磷胺。A.3.8胆碱酯酶溶液：以健康马血清为酶原，用缓冲液稀释成酶活力为7080(见酶活力测定)，保存于冰箱中。酶活力测定：取3mL健康马血清置于25mL容量瓶中，用缓冲液稀释至刻度，以此马血清溶液按表A1配制酶活力标准管。各管分别加1mL水，置于37恒温水浴箱预热10min，然后向每管各加入1.0mL氯化乙酰胆碱溶液(每隔30s加一管)，精确地在37下反应30min，30min末，加入2mL碱性羟胺溶液(每隔30s加一管)，按挨次从水浴中取出猛烈振摇4min，然后向各管加入1mL三氯乙酸溶液，摇匀后，加入1mL氯化铁溶液，振摇过滤，滤

4、液在波长为520nm下测其吸光度，以水作参比液。用公式(B-X)/B100(%)(式中B为零管的吸光度，X为各管的吸光度)，得到氯化乙酰胆碱在37被酶水解30min的水解百分数，取水解百分数为70-80%的马血清作标准，依据马血清含量(25mL中含纯马血清毫升数)配制胆碱酯酶溶液。600)makesmallpic(this,600,1800); src=http:/./upload_files/74/81_20090928160931_snbmp.jpg width=606 height=159 border=0 alt=表1.jpg title=表1.jpg /A.4采样取盛有5ml吸取液的

5、多孔玻璃板吸取管做采样管，以0.5L/min的速度抽取10L空气。A.5分析步骤用吸取管中吸取液洗涤进气管内壁3次，然后倒入10mL具塞比色管中，取1.0mL样品溶液置于25mL具塞比色管中，同时按表A2配制标准管。B管加1mL缓冲液，样品管和标准管(包括B管)放在37恒温水浴箱中预热10min，然后各管(除B管外)加入1.0mL胆碱酯酶溶液，每隔30s加一管，在恒温水浴箱中精确反应30min再向各管加入1.0mL氯化乙酰胆碱溶液(每隔30s加一管)，反应30min后(不时摇动)，每管加入2mL碱性羟胺溶液(每隔30s加一管)，按挨次从水浴中取出后猛烈振摇4min，然后向各管中加入1mL三氯乙

6、酸溶液，摇匀，加入1mL氯化铁溶液，振摇过滤，滤液在波长520nm下测其吸光度，并以水作空白参比液，将所得吸光度按下式计算出胆碱酯酶被磷胺抑制的百分数(或称百分抑制率)。600)makesmallpic(this,600,1800); src=http:/./upload_files/74/81_20090928160942_ibhnr.jpg width=547 height=57 border=0 alt=公式1.jpg title=公式1.jpg /式中：B、C对比管B和C管的吸光度；X样品管的吸光度。用磷胺含量对相应的胆碱酯酶百分抑制率绘制标准曲线，计算出样品的百分抑制率，再由标准曲线

7、查出磷胺含量。600)makesmallpic(this,600,1800); src=http:/./upload_files/74/81_20090928160955_yntng.jpg width=223 height=69 border=0 alt=公式2.jpg title=公式2.jpg /式中：X空气中磷胺的浓度，mg/m3；C所取样品溶液中磷胺的含量，g；V0换算成标准状况下的采样体积，L。A.6留意事项A.6.1每一批马血清，须测定其活力，如血清在冰箱中保存时间超过一个月，必需重新测酶活力。A.6.2磷胺标准液只能当日稀释，当日使用，放置24h后就会有部分水解，使浓度降低；现场采得样品，应避光保存，并须在24h内进行分析。 600)makesmallpic(this,600,1800); src=http:/./upload_files/74/81_20090928160913_iyd9a.jpg width=565 height=119 border=0 alt=表2.jpg title=表2.