沉降菌监测规程

1、沉降菌监测规程建立沉降菌监测方法，规范沉降菌监测操作。二、范围适用于西厂区车间洁净室、无菌检查室、阳性室、洗衣房、取样间、微生物室的沉降 菌监测。三、职责检验中心人员负责车间洁净室、洗衣房、取样间的采样工作；负责各部分所需的材料 准备、培养、菌落计数，以及无菌检查室、阳性室、微生物室监测的采样内容的执行。质量中心负责人负责本规程执行情况的监督检查。四、内容：.仪器与用具培养皿（90mm） 1.2恒温培养箱1.3高压蒸汽灭菌锅.监测程序. 1将己准备好的合格的空白培养皿放入物料缓冲间。2.2检测人员按人员进入洁净区的要求穿好洁净服，戴好口罩进入洁净室。2. 3按 此沉降菌监测规程（西厂区）对环境

2、进行监测。3.测试规则3. 1测试条件3. 1. 1温度和相对湿度沉降菌测试前，被测试洁净室（区）的温度和相对湿度应与生产工艺等要求相适应 （温度控制在1826C,相对湿度控制在45%65%之间）。3. 1.2压差沉降菌测试前，洁净区与非洁净区之间、不同级别洁净室（区）之间的压差应当不低 于10帕斯卡，空气洁净度级别要求高的洁净室（区）对相邻的空气洁净级别低的洁净室（区）一般要求相对正压。3. L 3换气次数、空气流速洁净级别A级C级D级换气次数（风速）0. 36-0. 54m/s 225次/h 215 次/h3. 2测试状态静态测试：静态测试时，室内测试人员不得多于2人动态测试：洁净室（区）

3、已 处于正常生产状态下进行的测试。测试状态有静态和动态两种，测试状态的选择必须符合生产的要求，并在报告中注明 测试状态。（在正常的生产操作监测外，可在系统验证、清洁或消毒等操作完成后增加微 生物监测。）3. 3测试时间3. 3.1对单向流，如C级背景下的局部A级净化房间及层流工作台，测试应在净化空 调系统正常运行不少于lOmin后开始。3.3.2对非单向流，如C级、D级以上的净化房间，测试应在净化空调系统正常运行 不少于30min后开始。3. 4测试方法采用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经若干时 间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌

4、落数来判定洁 净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室（区）的洁净度。3. 4.1采样方法静态：将已制备好的培养皿按4项的要求及采样点平面图逐个放置，然后从里到外逐 个打开培养皿盖，使培养基表面暴露在空气中0.5h后，再将培养皿盖盖上。动态：将已制备好的培养皿按4项的要求及采样点平面图逐个放置，然后从里到外逐 个打开培养皿盖，使培养基表面暴露在空气中4h后，再将培养皿盖盖上。动态取样应当 避免对洁净区造成不良影响。3. 4. 2培养3. 4. 2. 1全部采样结束后,将培养皿倒置于3OC35c恒温培养箱中培养，时间不少 于72h0 3. 4. 2. 2用于检测的培养皿应经过预培养合格后使用，为

5、避免运输过程造成影响, 在每次取样时，取3个培养皿与其他采样皿同法操作但不暴露采样，然后与采样后的培养 皿同时培养，结果应无菌生长。3. 4. 3菌落计数3. 4. 3.1用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器上点计，然后用510倍放大镜检查 是否有遗漏。3. 4. 3. 2若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上菌 落计数。3.5测试人员要求测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别的工作服.静态测试时，室内测试人员不得多于2人。4.采样点数目及布置4. 1采样次数每个采样点一般取样一次。4. 2最少采样点数目参照表：面 积（m） 10 210V20 220V40 240V100

6、 2100V200 2200V 400 400 2 洁净度级别 A 级 23 4 8 16 40 80 160 C 级 2 2 2 4 10 20 40 D 级 2 2 2 2 3 6 13注：表中的面积，对于单向流洁净室，是指送风面面积。对于非单向流洁 净室是指房间的面积。4. 3洁净区灌装间、配制间的沉降菌取样点监测位置根据沉降菌 取样风险评估报告确定。不能确定的点根据GB/T 16294-2021和2021版GMP附录要求 均匀分布沉降菌的取样监控点，具体分布规则如下：注：为采样点4. 4工作区采样点的位置离地0.81.5m左右（略高于工作面）。可在关键设备或关键工作活动范围处增加采样点

7、。4.5最少培养皿数满足最少测点数的同时，还宜满足最少培养皿数。洁净度级别所需培养皿数（6 90mm）（静态以沉降0. 5h计，动态以沉降4h计。）A级C级D级14 22 5.监测频率表1： 监测频次一车间二车间灌装间A级 区：灌装间C级区：配制间：物料称量间；男女二更。三车间 洗衣六车间无菌 室微生物室阳性室取样间房 微生物室所有房间阳性室所有房间一二车间洁净洗 衣房每三个月动态测试一次。三车间洁净洗衣房在生产洁净区，故每月动态测试一次。 灌装间A级区： 灌装间C级区；周测配制间：（动态）物料称量间；男/女二更。 灌装间A级区；灌装间A级灌装间区：C级区；无菌室灌装间C级配制间所有房区； 间

8、配制一室；配制二室。洁净区所有房间取样间所有房间一一月测洁净区所（动 态）有房间洁净区所有房间洁净区所有房间5.1车间恢复生产前进行沉降菌监测时，对所有洁净区房间进行静态测试。5. 2采样点见附件，监测结果记录于 相应的沉降菌监测记录中，记录应包括：房间温度、相对湿度、压差及测试状态等项目。.结果计算用计数方法得出各个培养皿的菌落数。6. 2平均菌落数的计算，见下式：Ml+M2+-+Mn平均菌落数M = n 式中：M 平均菌落数；Ml 1号培养1111菌落数；M2 2号培养皿菌落数：Mn n号培养皿菌落数n培养皿总数。.结果评定用平均菌落数判断洁净室（区）空气中的微生物。7.1每个测点的平均菌

9、落数不得超 过所选定的评定标准。7.2若某个测点的平均菌落数超过评定标准，则必须对此区域先进行消毒，然后重新 连续采样两次，两次测试结果均须合格。.合格标准和纠偏限、警戒限. 1合格标准静态（在空气中暴露0.5h）洁净级别微生物最大允许数沉降菌（CFU/皿）A级C 级D级VI W3 10动态（在空气中暴露4h）微生物最大允许数沉降菌（CFU/皿）VI W50 一一 （1）表中各数值均为平均值。（2）单个沉降碟的暴露时间可以少于4小时, 同一位置可使用多个沉降碟连续进行监测，并累积计数。（即：同一位置多个沉降碟监测的 时间总和符合要求，静态要求：各沉降碟暴露时间总和为0.5h：动态要求：各沉降碟暴露 时间总和为4h。） 8.2纠偏限和警戒限项目A级（动态）纠偏限 沉降菌Vlcfu/4小时20cfu/4小时