纯化大肠杆菌（省一等奖）-完整精讲版课件

1、巩固练习1.培养基、培养皿、接种环、实验者的双手、空气所采用的灭菌、消毒方法依次是( ) 化学消毒 灼烧灭菌 干热灭菌 紫外线灭菌 高压蒸汽灭菌 巴氏消毒法A B C D2.获得纯净培养物的关键是 ( )将用于微生物培养的器皿、接种用具、培养基等进行灭菌 接种纯种细菌 适宜环境条件下培养 防止外来杂菌的入侵巩固练习成分含量成分含量NaNO33 gFeSO40.01 gK2HPO41 g(CH2O)30 g琼脂15 gH2O1 000 mlMgSO47H2O0.5 g青霉素0.1万单位3.下表所示为某微生物培养基的配方，请回答： （1）物理性质，该培养基属于_培养基。依用途划分，则属于_培养基。

2、根据培养基原料，所培养微生物的同化作用的类型是_。（异养型/自养型）固体选择异养型实验操作：纯化大肠杆菌纯化大肠杆菌1.本实验所用的培养基是牛肉膏蛋白胨固体培养基2.本实验可分成配制培养基和纯化大肠杆菌两个阶段。（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1.计算：根据配方比例，计算配制100mL培养基的用量2.称量：3.溶化：将各成分加水溶解并定容至100mL。4.灭菌：培养基、培养皿5.倒平板：1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方H2O 定容至1000mlNaCl 5g蛋白胨 10g牛肉膏 5g琼脂20.0g思考3：在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的称量操作中，动作要迅速，原因是什么？ （一）制备牛肉膏蛋

3、白胨固体培养基防止牛肉膏吸收空气中的水分思考4：溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是什么？ 防止琼脂糊底而导致烧杯破裂5.倒平板待培养基冷却至50左右时在酒精灯火焰附近操作在火焰旁右手拿 _，左手_. 锥形瓶拔出棉塞5.倒平板待培养基冷却至50左右时在酒精灯火焰附近操作锥形瓶的瓶口_。迅速通过火焰5.倒平板待培养基冷却至50左右时在酒精灯火焰附近操作左手将培养皿_,右手_,立刻盖上皿盖。打开一条缝隙将培养基倒入培养皿5.倒平板待培养基冷却至50左右时在酒精灯火焰附近操作待平板冷却凝固后，将平板_。倒过来放置5.倒平板思考5：锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么？ 消灭瓶口杂菌，防止杂菌感染培养基

4、。思考6：倒平板的目的是什么？ 防止培养基冷却过程中形成的水滴落到培养基表面。思考7：若皿盖和皿底之间粘有培养基，则该平板能否培养微生物？为什么？ 不能，空气中的杂菌会在这些粘附培养基上繁殖，并污染皿内的培养基。二、纯化大肠杆菌1.平板划线法用带有微生物的接种环在固体培养基表面通过连续划线而纯化分离微生物的一种方法。 1.将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至烧红 2.在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。二、纯化大肠杆菌1.平板划线法3.将菌种试管口通过火焰达到消灭试管口杂菌的目的 4.将冷却的接种环伸入到菌液中沾取一环菌液 二、纯化大肠杆菌1.平板划线法5.将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞 6.将皿盖打开一条缝隙，把接种环伸入平板内划35条平行线，盖上皿盖，不要划破培养基。 二、纯化大肠杆菌1.平板划线法7.灼烧接种环，冷却后从第一区划线末端开始向第二区域内划线。重复上述过程，完成三、四、五区域内划线。注意不要将第五区的划线与第一区划线相连。 8.将平板倒置放在培养箱中培养 思考8：取菌种前灼烧接种环的目的是什么？ 二、纯化大肠杆菌消灭接种环上的微生物。为什么除第一次划线外，其余划线前都要灼烧接种环？ 消灭接种环上的残留菌种。取菌种和划线前都要求接种环冷却后进