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文档简介

1、一 一 一达到或超过青春期或成人水平。青春期迟缓和性幼稚病者性激素水平明显降低。.性激素合成酶缺陷性性功能紊乱C-17,20裂链酶缺陷、17- P羟类固醇脱氢酶、5ot-还原酶缺陷等可引起性功能紊乱。.青春期后性功能减退症男性性成熟后,由于各种原因导致雄性激素分泌不足产生的综合征;继发性闭经是 指生育期女性,已有月经,出现闭经者。高频考点16 性激素测定的意义及临床诊断.睾酮 男性体内主要和唯一有临床意义的雄性激素。青春期睾酮分泌增加,其高水 平一直持续到40岁,随年龄缓慢下降。睾酮测定可用做男性性功能减退或睾酮分泌不足的诊 断;评价男性不育症的方法之一。.黄体生成素 可用于预测排卵和排卵异常

2、的诊断。.卵泡刺激素(FSH) 滴度升高预示卵泡即将破裂,可以预测排卵和做排卵异常的诊 断以及预测对超排卵药物的反应等。.雌二醇(E2) 可作为女性早熟诊断指标之一,有助于男性乳房发育分析,评定女 性雌激素减少症和过量产生的情况等。.孕酮(P)用做确证排卵以及对妊娠头三个月的妊娠意外如先兆流产、异位妊娠的处理参考。.催乳素 水平升高可引起泌乳、原因不明的不育症、无排卵伴闭经,最严重者可有 重度雌激素降低。高催乳素血症是导致女性不育的常见原因,测定催乳素对于诊断累及女性 生殖系统的疾病有重要的意义。第14单元临床化学常用分析技术高频考点1光谱分析的基本原理及应用利用各种化学物质所具有的 发射、吸

3、收或散射光谱谱系 的特征,来确定其性质、结构或 含量的技术,称为光谱分析技术。光谱分析技术有发射光谱分析(包括荧光分析法和火焰光度法)、吸收光谱分析(包括 可见及紫外分光光度法、原子吸收分光光度法)和散射光谱分析(比浊法)。荧光分析法可用于糖类、胺类、管族化合物、 DNA与RNA、酶与辅酶、维生素及无机 离子等物质的测定。免疫比浊法可用于免疫球蛋白、载脂蛋白和补体等物质的快速测定。典型试题1 (A1型题)比色分析中符号 T表示(D)A.吸光度 B.电流 C.消光系数D.透光度 E.溶液浓度典型试题2 (X型题)原子吸收分光光度法常用的定量方法有( ABD)A .标准曲线法 B.标准加入法C.标

4、准去除法D.内标法E.外标法高 频 考点 2 电泳技术的基本原理在直流电场中,带电粒子向带符号相反的电极移动的现象称为电泳 。电泳分析方法有:醋酸纤维素薄膜电泳:由醋酸纤维素制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜,该薄膜对蛋白质吸 附小,能消除电泳中出现的拖尾”现象。凝胶电泳:以淀粉胶、琼脂或琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等作为支持介质的区带电泳法称为凝胶电泳。等电聚焦电泳:等电聚焦(IEF)是利用有pH梯度的介质分离等电点不同的蛋白质的电泳技术。毛细管电泳:利用电泳和 电渗流的电动力学原理,在空芯的微小内径的毛细管中进行混合物的高效分离技术。典型试题3( X 型题)根据支持物的不同,区带电泳可分为(ABC

5、DE )A 滤纸电泳B 醋酸纤维素膜电泳C 琼脂糖凝胶电泳D 聚丙烯酰胺凝胶电泳E SDS电泳典型试题4( X 型题)聚丙烯酰胺凝胶电泳的分离原理包括(BCE)A.渗透效应B.浓缩效应C.分子筛效应D.重力效应E.电荷效应高 频 考点 3 电泳技术的应用醋酸纤维素薄膜电泳适用于病理情况下微量异常蛋白的检测。聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)适用于分离 蛋白质及较小分子核酸。琼脂糖凝胶电泳适用于分离同工酶及其亚型、 大分子核酸等。等电聚焦电泳适合于分离分子量相近而等电点不同的蛋白质组分。典型试题5( X 型题) PAGE 普遍用于(BCD)A 分离同工酶B 分离蛋白质C 分离较小分子核酸D 分离脂蛋

6、白E 分离同工酶的亚型典型试题6( X 型题)关于等电聚焦电泳,下列哪个叙述是正确的(ACDE )A 是目前电泳技术中分辨率较好的方法之一B 特别适用于分子量不同而电荷相同的蛋白质的分离C.利用具有线性pH梯度的电泳介质来分离物质D 适用于分子量相同而电荷不同的蛋白质或多肽的分离E.等电聚焦电泳还可以用于酶学研究高 频 考点 4 离心技术的基本原理及应用离心技术是根据一组物质的密度和在溶液中的沉降系数、浮力等不同,用不同离心力使其从溶液中分离、浓缩和纯化的方法。制备离心技术主要用于物质的分离、纯化,而分析离心技术 主要用来分析样品的组成。普通离心法用来分离细胞、细胞膜或细胞碎片。差速离心法 用

7、于定性分离手段之前的粗制品提取。密度梯度离心法可同时使样品中的各个组分得到分离。典型试题7( A1 型题)用于分离亚细胞成分或蛋白质,进一步纯化的第一步过筛方法是( D)A.自溶法B.盐析沉淀法C.凝胶过滤法D.差速或梯度密度离心法E.高速离心法高 频 考点 5 层析技术的基本原理及应用 原理 利用不同物质理化性质的差异而建立的分离技术。所有的层析系统都固定相和 流动相 组成。当待分离的混合物在两相中的分配(含量比)不同,且随流动相向前移动,各组分不断地在两相中进行再分配。分别收集流出液,可得到样品中所含的各单一组分,从而达到将各组分分离的目的。.应用 凝胶层析可用于脱盐、分离提纯、测定高分子

8、物质的分子量、高分子溶液 的浓缩等。离子交换层析可用于分离氨基酸、多肽及蛋白质,也可用于分离核酸、核甘酸 及其他带电荷的生物分子。高效液相层析用于分离蛋白质、核酸、氨基酸、生物碱、类固 醇和类脂等物质。亲和层析可用于纯化生物大分子、稀释液的浓缩、不稳定蛋白质的贮藏、分离核酸等。典型试题8( A1 型题)下列何种方法可用于获得某种纯蛋白质(E)A.琼脂糖凝胶电泳B.透析C.离子交换层析D 免疫固定电泳E 亲和层析典型试题9( A1 型题)离子交换层析是(D)A.气-液相层析B.气-固相层析C.液-液相层析E 为支持介质的层析D 液 -E 为支持介质的层析高 频 考点 6 电化学分析技术的基本原理

9、及应用利用物质的电化学性质,测定化学电池的电位、电流或电量的变化进行分析的方法称为电化学分析法。电化学分析法有电位法、电导法和电容量分析法等。电位分析法是利用电极电位和浓度之间的关系来确定物质含量。典型试题10( X 型题)下列关于电化学分析技术叙述正确的是(AC)A 利用电极电位和浓度之间的关系来确定物质含量B 利用吸光度和浓度之间的关系来确定物质含量C.其根据的是Nernst (能斯特)方程式D 其根据的是朗伯比耳定律E.离子选择电极法属于电化学分析技术典型试题11( X 型题)下列关于离子选择电极的叙述,正确的是(AC)A 利用电极电位和浓度之间的关系来确定物质含量B 利用吸光度和浓度之

10、间的关系来确定物质含量C.能斯特方程式是其根据D 朗伯比耳定律是其根据E.离子选择电极法属于电化学分析技术高 频 考点 7 酶质量分析技术的原理及应用利用电泳、色谱和免疫学等分析技术,直接测定酶(蛋白)质量。高效液相色谱、高效毛细管电泳、双相 (二维) 电泳、 电喷雾 -激光解析质谱等分析技术均可用于酶蛋白量的分析。采用免疫电泳、Westem Blot 等方法可对酶蛋白水平进行半定量分析。采用酶免疫方法可对酶蛋白水平进行定量分析。酶免疫学测定具有方便、准确、灵敏等特点,免疫学检测法的成本较高。高 频 考点 8 酶活性测定的方法、原理、优缺点及应用酶活性测定的方法有:直接法:待测酶的酶促反应底物

11、或产物有特征性的理化性质, 通过特殊的仪器直接检测。间接法:酶促反应底物和产物没有特征性的理化性质,通过另 一个反应将底物或产物转化为有明显特征理化性质的另一个化合物进行检测。化学法:在 酶促反应终止后加入另一试剂与底物或产物反应,转化为有色化合物,用分光光度法检测。酶偶联法:采用另一个或几个酶(辅助酶和指示酶)将测定酶的某一产物转化为新的产物,当其他酶的反应速度与待测酶反应速度达到平衡时,可以用指示酶的反应速度来代表待测酶的活性。高 频 考点 9 工具酶及指示反应的概念将反应某一产物耦联到另一个酶促反应中,把第一步反应称为辅助反应,所用工具酶叫辅助酶 ,耦联的反应称为指示反应,指示反应所用的

12、工具酶叫指示酶 。高 频 考点 10 代谢物酶法测定的方法及特点代谢物酶法测定分为终点法:又称 平衡法, 测定反应完全后待测物或产物变化的总量。动力学法:测定两个固定时间的吸光度差值,只要此期间待测物消耗v 5%,就可以采用标准浓度对照法计算样本浓度,所以动力学法有时又称为固定时间法。终点法所需工具酶多,而动力学法要求工具酶的Km 足够大。终点法对仪器的电噪声和温控要求不严;动力学法要求仪器的电噪声小,吸光度应读准到0.0001,温度变化v 0.1%。产物的堆积和样品色原对动态法影响较小,而对终点测定法影响较大。用终点法测定乳糜或溶血标本有时需设样本空白。典型试题12( X 型题)酶法分析在哪

13、些方面优于传统的化学法(ABCD )A.准确性 B.精密度 C.灵敏度 D.线性范围E.抗干扰高 频 考点 11 临床化学方法建立的根据临床化学方法应具有实用性 和 可靠性 两方面的性能指标。方法的建立要根据所用技术的原理和被测物质的物理化学性质来确定其方法建立的原理。实用性包括微量快速、费用低廉、应用安全。可靠性即具有较高的精密度和准确度以及较大的检测能力,包括精密度、准确度与特异性、检测能力。高 频 考点 12 临床化学方法建立的过程1根据方法选择的要求对已发表的各种检测方法进行比较与检验,确定哪些方法有充分的科学根据及真实的使用价值。2候选方法(经初步选定的方法)确定后,要熟悉该法的原理

14、、性能指标及相应的条件等。3进行初步试验,评价候选方法所有的性能指标。高 频 考点 13 临床化学方法的评价包括:精密度评价:评价给出结果是可重复程度。准确度评价:评价所给出的结果 是否准确。线性评价:判断对某一分析方法测得的浓度与设定的浓度之间的比例关系的范 围。干扰试验:评价方法给出的结果是否受非分析物影响及影响程度。高 频 考点 14 临床化学方法建立后的临床观察1参考值与医学决定水平的确定“参考值”是指在规定人群中抽样进行测定,由此得到的均数及分布范围,作为它所代表人群的判断参考。2医学决定水平和危急值医学决定水平就是临床按照不同病情给予不同处理的指标阈值。危急值是指需要立即采取临床干

15、预的测定值。3临床病例观察用于诊断的试验必须具备灵敏度与特异度二个基本特性,两者缺一不可。在诊断指标中以真阳性率(TP 率)对假阳性率(FP 率)作图,并将相对的点连接起来得到的曲线称为受试者工作曲线( ROC curve) 。根据诊断试验的ROC 曲线,选择合适的诊断阈值,比较两种不同诊断试验对诊断同种疾病的可靠性。第 15单元 临床化学自动分析仪高 频 考点 1 自动分析仪的类型自动分析仪 的类型: 按反应装置的结构可分为连续流动式(管道式) 、离心式、分立 式和干片式; 按自动化程度可分为 全自动和半自动型;按同时可测定项目可分为 单通 道 和 多通道 。单通道每次只能检测一个项目;多通

16、道每次可同时测定多个项目。高 频 考点 2 自动分析仪的工作原理连续流动式自动生化分析仪工作原理:在微机的控制下,通过比例泵将标本和试剂注入到连续的管道系统中,在一定的温度下,在管道内完成混合,去除干扰物,保温,比色测定,信号放大,运算处理,最后将结果显示并打印。检测分析是一个标本接一个标本在连续流动状态下进行的。离心式自动生化分析仪工作原理:将样品和试剂分别置于转盘相应的凹槽内,当离心机开动后,受离心力的作用,试剂和样品相互混合发生反应,各样品最后流入转盘外圈的比色凹槽内,通过比色计检测。在整个分析过程中每一步骤几乎是同时完成的,又称为同步分析。分立式自动生化分析仪工作原理:按人工操作的方式

17、编排程序,以有序的机械动作代替人工, 按程序依次完成各项操作。仪器操作过程中的各环节用传送带连接,按程序依次操作。干化学式自动生化分析仪工作原理:将发生在液相中的反应,转移到一个固相载体上,利用分光检测系统进行检测的一类新型仪器。典型试题1 ( A1 型题)薄片分析又称为(D)A.连续流动式分析A.连续流动式分析B.分立式分析C.离心式分析D.干化学分析E.层析分析高 频 考点 3 自动分析仪的优缺点连续流动式生化分析仪在检测过程中,样品和样品之间需用空气进行隔离,或用空白试剂或缓冲液来隔离,检测分析是一个标本接一个标本在连续流动状态下进行的。离心式自动生化分析仪所用样品量和试剂量均为微量级,

18、分析速度快。分立式自动分析仪是目前国内外多采用的设计模式,具有结构简单、检测速度快的特点。干化学式分析仪其干片为一次性使 用,成本较高。高 频 考点 4 自动分析仪的性能评价自动分析仪 的性能评价指标: 自动化程度:指仪器能够独立完成化学测定操作程序 的能力。自动化程度越高,仪器的功能越强。分析效率:指在测定方法相同的情况下自动生化分析仪的分析速度。应用范围:包括仪器所能进行的分析方法以及可测定项目的种类。 精密度和准确度:取决于仪器各部件的加工精度和精确的工作状态。相关性的比较:不同仪器的测定结果之间存在一定的差别,为得到实验室之间的一致性,可用参考实 验室的仪器进行校正。携带污染:采用了新型的设计和各种操作来降低交叉污染的程度。 其他性能指标:如仪器的取液量、最小反应液体积和测试速度等。典型试题2( X 型题)自动生化分析仪所指的交叉污染主要来自(ACD )A 样本之间B 仪器之间C 试剂之间D 试剂与样本之间E 空气与仪器之间高 频 考点 5 临床化学自动分析仪的发展方向国

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