DB12-T651-2016转基因耐除草剂大豆GTS40-3-2及其衍生品种定量检测实时荧光PCR方法

1、ICS 67.050ICS 67.050B23DB12天 津 市 地 方 标 准DB12/T 6512016转基因耐除草剂大豆GTS40-3-2及其衍生品种定量检测实时荧光PCR方法Detection of genetically modified plants and derived productsQuanlitative PCR method for herbicide-resistant soybean GTS 40-3-2 and its derivates2016-11-01 实施2016-09-27 2016-11-01 实施天津市市场和质量监督管理委员会发布DB12/T 651

2、2016DB12/T 6512016II本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由天津市农村工作委员会提出o本标准起草单位：天津市农业质量标准与检测技术研究所、中国农业科学院生物技术研究所、天 津市质量技术监督宝堆检测中心。本标准主要起草人：兰青阔、宛煜嵩、杨炳存、赵新、李亮、陈锐、朱珠、刘娜、王成、徐石勇。 本标准2016年9月首次发布。DB12/T 6512016DB12/T 6512016 结果分析与表述Lectin内标基因和GTS40-3-2转化体均出现典型扩增曲线，且Lectin内标基因和GTS40-3-2转化体 的。值36,表明样品中检出耐除草剂大豆GTS40-3

3、-2转化体。表述为“样品中检测出GTS40-3-2转 化体，GTS40-3-2转化体含量为c”。Lectin内标基因出现典型扩增曲线，且Ct值36, GTS40-3-2转化体。值238或未出现典型扩增 曲线，表明样品中未检出耐除草剂大豆GTS40-3-2转化体。表述为“样品中未检测出GTS40-3-2转化 体Lectin内标基因和GTS40-3-2转化体出现典型扩增曲线，Lectin内标基因。值36, GTS40-3-2转 化体Ct值在3638之间，应进行重复实验。如重复实验结果符合6.1-6.2的情况，依照6.1-6.2进行 判断；如重复实验GTS40-3-2转化体出现典型扩增曲线，但。值仍

4、在3638之间，则判定样品检出 GTS40-3-2转化体，表述为“样品中检测出GTS40-3-2转化体”。6.4Lectin内标基因和GTS40-3-2转化体未出现典型扩增曲线，或。值238,表明样品中未检出大豆。 表述为“样品中未检测出大豆成分”。6.5 Lectin内标基因和GTS40-3-2转化体出现典型扩增曲线，但。值均在3638之间，应进行重复实 验。如重复实验结果符合6.1-6.4的情况，依照6.1-6.4进行判断；如重复实验Lectin内标基因和 GTS40-3-2转化体出现典型扩增曲线，但。值仍在3638之间，则判定样品检出GTS40-3-2转化体, 表述为“样品中检测出GTS

5、40-3-2转化体附录A(资料性附录)A.l Lectin基因实时荧光PCR扩增产物核昔酸序列(Accession No.K00821)1 GCCCTCTACT CCACCCCCAT CCACATTTGG GACAAAGAAA CCGGTAGCGT TGCC|AGCTTC61 |gccgcttcct tcaacttcac| cttctatgcc cctgacacaa aaaggcttgc agatgggc 注：划线部分为lec-1215F和lec-1332R引物序列，方框内为探针lec-1269P序列。A.2耐除草剂大豆GTS40-3-2转化体特异性序列1 CCTTTAGGAT TTCAGCATCA GTGGCTACAG CCTGCATGCT TCACGGTGCA AGCAGCCGGC61 C|CGCAACCGC CCGCAAATCC| TCTGGCCTTT CCGGAACCGT CCGCATTCCC GGCGACAAGT C 注1：