葡激酶的实验与临床研究进展

1、葡激酶的实行与临床研究希望摘要葡激酶是比年来开拓的一种细菌源性的溶栓药。它具有高纤维卵白特异性，可有用溶解血栓，并对血小板血栓有必然的结果。这些特点在动物实行及临床应用中得到证明。葡激酶与链激酶一样，自己不是酶，不克不及直接活化纤溶酶原，这与直接活化纤溶酶原的溶栓药的作用机制有所差异。葡激酶的纤溶历程是先与纤溶酶本相成11的分子复合体，该分子复合体再活化其他纤溶酶原分子，使之变化为双链的活性纤溶酶1。纤溶酶原被复合体活化的历程可以被活化剂如葡激酶-纤溶酶、纤溶酶加快，也可被纤溶酶的按捺剂如2-抗纤溶酶延缓2。在含人血凝块的人工循环体系中，3小时内50%溶栓的重组葡激酶浓度为2g/l，而链激酶那

2、么需12g/l。按等克分子量盘算，重组葡激酶的纤溶效力是链激酶2倍多3。在动物血栓模子的溶栓实行中，也表白重组葡激酶比链激酶有更强或雷同的溶栓效力4。葡激酶与抗凝剂配合应用时其溶栓效力显着加强5。1与血小板干系溶栓药的溶栓失败、再栓大概与溶栓药对血小板成效的影响相干。血栓中血小板含量过多是引起溶栓抵抗的缘故原由之一6。体外研究创造重组葡激酶对富血小板的凝块比其他溶栓药具有更显着的溶解作用4，5。在富含血小板血栓的狒狒股动脉血栓模子中，重组葡激酶的动脉再通作用比链激酶的更有用同样剂量的重组葡激酶与链激酶能使血流规复的时间别离为24分钟分钟和120分钟，而且更长期4。研究中创造：由于血小板不规矩外

3、貌的存在，加强了重组葡激酶对纤溶酶原的活化，从而引起更强的溶栓效应7。但纵然高剂量重组葡激酶也不克不及完全溶解血小板血栓。重组葡激酶在P冲洗处置惩罚过的血小板悬液中对胶原和ADP诱发的血小板聚拢有同样的按捺结果。但在PRP富含血小板血浆中那么不按捺或部门按捺ADP诱发的血小板聚拢。实行证明，重组葡激酶按捺P中血小板聚拢是通过纤溶酶或纤维卵白原落解产物的产生。至于在PRP中仅表示为部门按捺效应，是由于血浆身分中有2-抗纤溶酶的存在6，8。这些结果表白，在人体中重组葡激酶对血小板成效的临床效应，大概不很显着。2高纤维卵白特异性重组葡激酶的高纤维卵白特异性引起人们的存眷。在不含纤维卵白的血浆环境中，

4、2-抗纤溶酶敏捷与纤溶酶原-葡激酶复合体结合，按捺纤溶酶原活化并中和纤溶酶的活性，其按捺作用呈剂量依靠干系。链激酶形成的复合体那么不受2-抗纤溶酶的影响911。重组葡激酶自身不与纤维卵白结合，但纤维卵白及纤维卵白样的刺激物可以加强重组葡激酶对纤溶酶原活化的起始速率1，9，10，并使2-抗纤溶酶对纤溶酶原-葡激酶复合物的按捺程度被削弱100多倍。在研究中，证明纤溶酶原分子上的赖氨酸结合位点对纤溶酶原与2-抗纤溶酶、纤维卵白的结合是至关紧张的1，9，11。在纤维卵白存在的环境下，纤维卵白与2-抗纤溶酶竞争结合纤溶酶原，低落了2-抗纤溶酶的按捺作用。而被2-抗纤溶酶中和的纤溶酶-葡激酶开释出葡激酶，

5、葡激酶举行再循环，并与纤维卵白外貌的纤溶酶原相结合2，从而更有用地激活纤维卵白外貌的纤溶酶原。以上说明了重组葡激酶高纤维卵白特异性的根本机制。按照重组葡激酶的高纤维卵白特异性，理论上可以以为：在溶栓治疗中，重组葡激酶可以有用溶栓而不引起出血的副作用。在体外人类血浆凝块溶解实行中，重组葡激酶有用溶栓的同时，并未创造周身的纤溶活化及纤维卵白原落解3。这种结果在仓鼠、兔及狒狒4等动物的体内血栓模子中也得到了证明。3临床不雅察在动物血栓模子中得到的有关重组葡激酶有用溶解血栓、高纤维卵白特异性及可以溶解富含血小板的血栓等令人煽动的结果，为重组葡激酶的临床不雅察评价奠基了基矗接纳10g重组葡激酶一连30分

6、钟静脉注射的要领。对5例心梗患者举行不雅察。经血管造影证明，在给药后40分钟内4例患者得到冠脉再通，而没有产生血浆纤维卵白原、2-抗纤溶酶程度的变革及过敏反响12、13。在30破例周动脉壅闭14及12例心梗患者12的重组葡激酶溶栓不雅察中，也表白重组葡激酶能有用使壅闭血管再通，而不引起周身纤维卵白原落解。别的，对100例急性心肌梗死患者的重组葡激酶治疗试验结果，也进一步必定了其疗效。与其他如今应用的溶栓药比拟，重组葡激酶作为溶栓药的有用性和宁静性值得进一步验证15。4免疫性临床不雅察结果说明，只管重组葡激酶没有引起低血压和过敏反响，但仍有必然的致免疫性。如今，正通过卵白质工程对重组葡激酶举行特

7、异点突变以期得到致免疫性低的重组葡激酶。通过特异点突变，创立了组合变异体sakSTAR.38、sakSTAR.39。这些变异体不被经野生型sakSTAR治疗过的患者体内产生的抗体识别16。与sakSTAR比拟，注射重组葡激酶变异体后在动物及人体内产生的中和抗体及特异的IgG非常少16，然而这种变异体的溶栓活性却显着低落约50%，热不变性也低落16。于是通过逆转野生型重组葡激酶的某几个氨基酸进一步产生一些突变体。此中几个在不改变低致免疫性特性的环境下，保存了与野生型重组葡激酶相似的溶栓效应17，并在体外人血浆溶栓实行、动物模子及部门患者的临床不雅察中得到开端验证18。但仍需通过大范围临床随机不雅

8、察，以得到更为有力的证据。5结论通过上述对葡激酶的纤溶、溶栓及致免疫性等特性的讨论，可以以为：重组葡激酶具有高纤维卵白特异性，与链激酶有相似或更强的溶栓效应，在溶解富含血小板的血栓时，重组葡激酶比其他溶栓剂结果更显着，在临床不雅察中开端得到必定疗效。参考文献1LijnenHRetal.JBilhe,1991;266(18):11826118322llenDetal.JBilhe,1993;268(11):828482893atsuetal.Bld,1990;76(5):9259294llenDetal.irulatin,1993;87:99610065Kaanetal.ThrbRes,1997

9、;86(2):1151266SuehirAetal.ThrbHaest,1993;7(5):8348377SuehirAetal.ThrbRes,1995;80(2):1351429kadaKetal.AJHeatl,1996;53:15115710LijnenHRetal.BihiBiphysAta,1992;1118:14414811SileneKetal.JBilhe,1993;268(13);9811981612VandershuerenSetal.ThrbHaest,1996;76(4):54154413llenDetal.irulatin,1993;87:1859185314VandershuerenSetal