分析方法学验证确认管理规程

1、质量管理标准部门：质量部标题：剖析方法学考据及确认管理规程起草人：审察人：同意人：日期：日期：日期：编号：JSMS-QC-020-00前版编号：新增页数：9执行日期：下次审察日期：颁发部门：质量部2014年8月1日2016年8月1日目的:拟订剖析方法学考据及确认的管理规程。范围:适用于剖析方法学的考据及确认。责任:QC检测员，QC主管。内容：4.1方法考据方法考据就是依照检验项米的要求，开初设置必定的考据内容和考据标准要求，并通过设计合理的试验来考据所采用的剖析方法是都切合检验项目的要求。方法考据的一般原则平常情况下，剖析方法需进行方法考据。对于仅需依照实验室平常测试操作步骤即可测定的检验项目

2、不需要进行考据，如外观、崩解时限、密度、重量、pH值、灰分、装量等。方法学考据的内容应依照检验项目的要求，结合所采用剖析方法的特点确定。同一剖析方法用于不一样样的检验项目会有不一样样的考据要求。需要考据的检验项目检验项目是为控制药质量量，保证药品安全有效而设定的测试项目，依照检验项目的设定目的和考据内容的不一样样要求，需考据的检验项目分为四类：鉴别试验；杂质的限度检查；杂质的定量测定；含量测定，包括原料药或制剂中有效成分的含量，制剂中其他成分（如防腐剂等）的含量，溶出度与释放度等检查中的溶出量。以及含量平均度。除此之外还有一些物理项目的检测如粒径分布、旋光度、熔点和硬度，其要求与其他检验项目有

3、所不一样样，平常其剖析方法考据应有不一样样的要求。鉴其他目的在于判断被剖析物是目标化合物，而非其他物质。用于鉴其他剖析方法要求拥有较强的专属性和耐用性。杂质检查主要用于控制主成分不测的杂质，如无机杂质、有机杂质等。杂质检查分为限度检查和定量测定这两部分。用于限度检查的剖析方法考据重视专属性、检测限和耐用性。用于定量测定的剖析方法考据重申专属性、正确度、精确度、线性、范围、定量限和耐用性。含量测定瞄正确度要求较高，因此所采用的剖析方法要求拥有必定的专属性、正确度和线性要求。中国药典2010年版中规定了不一样样的检验项目需要考据不一样样的内容，详见表一：表一考据项目和考据内容检验项目考据内容鉴别杂

4、质测定含量测定定量限度正确度否是否是精良度重复性否是否是中间精良度否是*否是*专属性*是是是是检测限否是*是否定量限否是否否线性否是否是范围否是否是耐用性是是是是备注：*：已有重现性考据，不需考据中间精良度；*：如一种方法不够专属，可由其他剖析方法予以补充；*：视详细情况予以考据；“是”代表该项内容需要考据，“否”代表该项内容不需要考据。方法考据内容正确度正确度系指用该方法测定的结果与真实值或参照值凑近的程度。一般用回收率表示。正确度应在规定的范围内测试。（1）考据方法正确度应在规定的范围内建立，最少用9个测定结果进行讨论。比方，设计3个不一样样浓度，每个浓度各分别制备3份供试品溶液，进行测定

5、。正确度是定量测定的必要条件，因此含量测定、杂质定量测定均需考据正确度。原料药与制剂所用的详细方法见表二。表二正确度考据方法检验项目原料药制剂备注方法1：用已知纯度的对方法1：用含已知被测物的各组如该剖析方法已经测试照品或供试品进行测定分混杂物进行测定并求出精良度、线性和方法2：用本法所得结果方法：如不能够获得制剂的全部组专属性，在正确度也可与已知正确的另一方法测分，可向制剂中加入已知量的被介绍的情况下，正确度含量测定定结果进行比较测物进行测定可不用再做方法3：用本法所得的结果与已知正确度的另一方法测定的结果进行比较方法1：可向原料药或制剂中加入已知量杂质进行测定在不能够测得杂质降解产方法2：

6、若是不能够获得杂质或降解产物，可用本法测定结果物的响应因子或不能够测与另一成熟的方法进行比较，如药典方法或经过考据的方法得对应原料药的响应因杂质的定子。应明确单个杂质的量测定杂质总量详单与主成分的重量比（%）或面积比（%）比方：测定含量的正确度，按标示的80%，100%和120%配制三个浓度的溶液，每个浓度各分别制备3份供试品溶液，进行测定。依照测定结果与配制浓度计算出平均回收率以及相对标准偏差。（2）数据要求需报告已知加入量的回收率（%），或测定结果平均值与真实值之差及相对标准偏差或可信限。精良度精良度系指在规定的测试条件下，同一平均供试品，经多次取样测定所得结果之间的凑近程度。精良度一般用

7、偏差、标准偏差或相对标准偏差表示。精良度与正确度不一样样。精良度表现了多次重复测定同一被剖析物时各测定值之间的接近程度，但它不能够表达与已建立的真实值也许参照值之间的切合程度，后者由正确度来测定。经过一系列的测定值，能够获得优异的精良度，但是由于所用剖析方法存在的偏差，所得的平均值不用然与真实值或参照值切合，在这种情况下，需要更正方法以除掉偏差。1）考据方法精良度可从重复性、中间精良度、重现性三个层次观察。详见表三。表三精良度考据方法名称定义考据方法在相同条件下，由同一个在规定范围内，最少用9个测定结果进行讨论。比方，设计重复性剖析人员测定所得结果的3个不一样样浓度，每个浓度各分别制备3份供试

8、品溶液或将相当于100%浓度水平的供试品溶液，用最少测定6次的结果进精良度成为重复性行讨论在同一实验室，不一样样时间为观察随机变动因素对精良度的影响，应设计方案进行中间中间精由不一样样剖析人员用不一样样设精良度试验。变动因素为不一样样日期、不一样样剖析人员，不一样样设密度备测定结果之间的精良备度，成为中间精良度不一样样实验室之间由不一样样分法定标准采用的剖析方法或在不一样样实验室之间进行方法转析人员测定结果之间的精移时，应进行重现性试验。比方建立药典剖析方法时，经过密度，成为重现性共同检验得出重现性结果。共同检验的目的、过程和重现性重现性结果均应记录在起草说明中，应注意重现性试验用的样品本身的

9、质量平均性和积蓄运输中的环境影响因素，省得影响重现性结果2）数据要求均应报告标准偏差、相对标准偏差和可信限。专属性专属性系指在其他成分（如：杂质、降解产物、辅料等）可能存在下，采用的方法能正确测定出被测物的特点。平常，鉴别反应、杂质检查、含量测定均应观察其专属性。如一种方法不够专属，可由其他剖析方法予以补充。比方检测拥有旋光特点的活性物质，除采用非手性薄层色谱法或高效液相色谱法外，还应增加旋光度的检查。考据方法见表四。表四专属性考据方法检验项目归纳考据方法备注专属性要求证明其能与可能共存的物质或结构相似对与药品，辅鉴别试验用于确化合物区分料不得搅乱鉴别试验认被测成分切合含被测成分的供试品呈正反

10、应，而不含被测成分的供其有效成分其特点试品以及结构相似或组分中的鉴别作为纯度检查，方法1：在杂质可获得的情况下，可向试验中加入一所采用的剖析方定量的杂质，观察杂质与共存物质能获得分别和检法应保证可检出出，并拥有合适的正确度与精良度杂质测定方法2：在杂质或降解产物不恩能获得的情况下，专被分许物中杂质（包括限的含量测定，如属性可经过测定含有杂质或降解产物的试样，与另一度检查和色谱法和其相关物质、重金个已考据的方法或药典方法比较结果。或对试样用强定量测属、有机溶剂等。光照射、高温、高湿、酸（碱）水解或氧化的方法进他分别方法，定）应附代表性因此杂质检查要行加速破坏，以研究可能的降解产物和降解路子，并求

11、剖析方法有一比较破坏前后检出的杂质个数。必要时可采用二极管图谱，以说明方法的专属定的专属性阵列检测和质谱检测，进行峰纯度检查方法1：在杂质可获得的情况下，可向试样中加入杂性，并应注明诸成分在途质或辅料，观察测定结果可否受搅乱，并可与未知中的地址，色杂质和辅料的试样比较测定结果。含量测定的目的谱法的分别是获得试样中被方法2：在杂质或降解产物不能够获得的情况下，专属度应切合要性可经过测定含有杂质或降解产物的试样，与另一个含量测定剖析物的含量测求已考据的方法或药典方法比较结果。或对试样用强光定或效价正确结照射、高温、高湿、酸（碱）水解或氧化的方法进行果加速破坏，用两种方法进行含量测定，比较测定结果。

12、必要时可采用二极管阵列检测和质谱检测进行峰纯度检查，证明含量测定成分的色谱峰中不包括其他成分检测限检测限（LOD或DL）系指试验中的被测物能够被检测出的最低量。药品的杂质测定，应经过测试确定方法的检测限。（1）考据方法（表五）表五杂质测定检测限考据方法检测项目考据方法方法1：非仪器剖析目视法用已知浓度的被测物，试验出能被可靠地检测出的最低浓度或量方法2：信噪比法杂质测定用于能显示基线噪音的剖析方法，即把已知低浓度试样测出的信号与空白样品测出的信号进行比较，计算出能被可靠地检测出的最低浓度或量。一般以信噪比为3:1或2:1时相应浓度或注入仪器的量确定检测限（2）数据要求应附测试图谱，说明测试过程

13、和检测限结果。定量限定量限（LOQ或QL）系指试样中的被测物能够被定量测定的最低量，其被测结果应具有必定的正确度和精良度。杂质和降解产物用定量测定方法研究时，应确定方法的定量限。（1）考据方法（表六）表六杂质定量测定考据方法检验项目考据方法杂质定量测定信噪比法：一般以信噪比为10:1时相应浓度或注入仪器的量确定定量限线性线性是指在设计的测定范围内，检测结果与试样中被测物的浓度直接呈正比关系的程度。线性是定量测定的基础，涉及定量测定的项目，如杂质定量测定和含量测定均需考据线性。（1）考据方法应在规定的测定范围内测定线性关系。可用一贮备液经精良稀释，或分别精良称样，制备一系列供试样品的方法进行测定

14、，最少制备5个浓度的供试样品每个浓度各一份，每份供试样品测定3次，以测得的响应信号作为被测物浓度的函数作图，观察可否呈线性，用最小二乘法进行线性回归。必要时，响应信号可经数字变换，再进行线性回归计算。（2）数据要求应列出回归方程、相关系数和线形图。范围范围系指能够达到必定的精良度、正确度和线性，测试方法使用的高低限浓度或量的区间。范围应依照剖析方法的详细应用和线性、正确度、精良度结果和要求确定，要求见线性内容。耐用性耐用性系指测定条件有小的变动时，测定结果不收影响的承受程度，为使方法可用于常例检验供应依照。4.2方法确认适用范围适用于：物料和产品中不需要进行考据的检验方法以及药典方法和其他已考

15、据的法定标准。经过方法确认来证明方法在本实验室条件下的适用性。不适用于：实验室平常测试操作步骤不需要进行方法确认，比方（包括但不限于）干燥失重、炽灼残渣。各种湿法化学步骤如酸值和检定的仪器方法如pH计，除非有特别要求。确认方法对于方法确认，平常采用以下两种方式：方式一：由亮膜检验人员分别独立对同一批产品进行检验（如可能，使用不一样样仪器），比较两人的检测结果来证明方法在本实验室（人员，剖析仪器、试剂等）的适用性。方式二：依照考据目的和评估结果选择相关项目进行确认，如表七（仅供参照）。表七检验项目确认内容示例检验项目正确度精良度专属性检测限定量限线性范围耐用性原鉴别（HPLC法）否否可能否否否否

16、否料相关物质（HPLC法）否可能是否是否否否药含量测定（HPLC法）否可能可能否否否否否鉴别（HPLC法）否否是否否否否否制溶出度可能是是否可能否否否剂相关物质可能是是否是否否否含量测定可能是是否否否否否备注：“是”代表该项类容需要确认，“否”代表该项内容不需要确认。“可能”代表该项内容需依照实质情况讨论确定。4.3方法考据、方法确认的管理企业必定拟订方法考据、方法确认的操作规程，应涵盖范围，方案的起草、审批和批准，方案的推行，报告的起草、审批和同意，以及文件的管理等方面内容。方案的准备在方法考据、方法确认前，必定依照操作规程进行方案的起草、审批和同意。对于方案，有以下要求：详细描述被执行程序；明确规定被测参数的接受标准