不同产地鱼腥草多糖含量测定

1、不同产地鱼腥草多糖含量测定【摘要】目的测定不同产地鱼腥草多糖的含量。方法用苯酚硫酸法测定鱼腥草中多糖的含量。结果不同产地的鱼腥草中多糖含量为：15.73%20.29%。结论不同产地鱼腥草多糖的含量有一定的差异。【关键词】鱼腥草多糖含量测定不同产地Abstrat：bjetiveTdeterinethententfplysaharidesinHuttuyniardatafrvariusultivatinlatins.ethdsThententsfplysaharideereeasuredbyphenl-H2S4lrietry.ResultsThententsfplysaharidesinHuttu

2、yniardatafrvariusultivatinlatinsvariedfr15.73%20.29%.nlusinThereisgreatdiffereneinplysaharidententinHuttuyniardatafrvariusultivatinlatins.Keyrds：Huttuyniardata;Plysaharide;Deterinatin;VariusultivatinLatins鲜鱼腥草为三白草科Saururaeae蕺菜属植物蕺菜HuttuyniardataThunb.的新颖全草1，具有清热解毒、消肿排脓、利尿通淋的成效。主要用于肺脓疡、痰热咳嗽、热痢热淋、痈疮肿毒

3、2等证。本课题组曾对鲜鱼腥草G-S、HPL-S指纹图谱、黄酮类、酚类化合物的化学研究方面进展报道36。药理研究发现鱼腥草水溶性多糖对羟自由基和超氧自由基有较明显的去除作用7。本课题对不同产地鱼腥草进展多糖含量测定，为鱼腥草资源的开发提供理论根据。1器材1.1仪器UV-7501型紫外可见光光度计(无锡科达仪器厂)，电热恒温水浴锅(上海仪表集团供销公司)，医用离心机LD5-10型，北京医用离心机厂，电子天平BS210S，adebystartrius1.2试药葡萄糖标准品Siga公司产品；苯酚、硫酸、丙酮、乙醚、三氯乙酸、氢氧化钠试剂均为分析纯，医用乙醇广州市新升华玻，苯酚试液参照文献8配制。鱼腥草

4、购于广州清平市场，经广东药学院中药学院生药教研室陈幼竹博士鉴定为三白草科蕺菜属植物HuttuyniardataThunb.。2方法与结果2.1鱼腥草多糖的提取与精制取鱼腥草干品200g，以95%乙醇回流脱脂3次，药渣置通风处晾干，加水10倍量、8倍量、8倍量，于90100依次提取3，2，1h，过滤，合并滤液，浓缩至约200l，用95乙醇调至含醇量为80%，静置过夜，离心，沉淀依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，得粗多糖。取粗多糖加水溶解至100l，参加等体积30%三氯乙酸溶液脱蛋白，4静置，离心，上清液用0.01l/L的氢氧化钠调pH7，溶液减压浓缩，将浓缩液装入透析袋置水中透析，透析液减压浓缩至

5、100l，参加95%乙醇调含醇量为80%，静置，离心，沉淀用无水乙醇、丙酮、无水乙醚依次洗涤，真空枯燥，得除蛋白精制鱼腥草多糖。2.2标准品溶液与供试品溶液的制备2.2.1标准品溶液的制备精细称取105枯燥至恒重的葡萄糖0.0964g，加水溶解并定容至100l，再取1l，定容至10l的容量瓶中，即制得浓度为0.0964g/l的葡萄糖对照品贮备液。2.2.2供试品溶液的制备取60枯燥1h的鱼腥草约10g，精细称定，用95%乙醇100，80，80l依次回流脱脂3，2，2h，药渣用95%乙醇洗涤数次，药渣置通风处自然晾干后置烧瓶中，加水100l，精细称定，水浴90100温提4h。再精细称定，补足水至

6、原重，振摇，趁热纱布过滤，离心除去沉淀，得上清液。精细量取上清液5l，放入透析袋中流水透析24h，透析内液定容至25l，再精细量取5l，定容至50l，得供试液，冰箱中放置备用。2.3标准曲线的制备精细量葡萄糖标准品溶液0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6，0.7l，分别置10l具塞试管中，加蒸馏水补充至1.0l，摇匀，加5%苯酚溶液1l，浓硫酸5l，室温放置40in。另取1l蒸馏水，加同量苯酚和浓硫酸，同法操作，作为空白对照。置7501型分光光度计中，于490n测定吸收度，以吸收度Y对葡萄糖含量X进展回归，得回归方程：Y=9.1073X+0.0102，相关系数r2=0.9998。结果

7、说明葡萄糖在0.01930.0964g/l范围内呈良好的线性关系。2.4换算因素的测定精细称取60枯燥至恒重的鱼腥草多糖101.2g，置100l容量瓶中，参加少量蒸馏水溶解，并稀释至刻度，摇匀，精细量取此液1l，照标准曲线制备项下的方法测定吸收度，从回归方程中求出多糖供试液中葡萄糖的浓度。按下式计算换算因素：F=/(D)。F为换算因素；为多糖重量g；为多糖稀释液中葡萄糖的浓度g/l；D为稀释因素。2.5精细度实验取供试液，按上述方法操作，连续测定5次，RSD=2.61%。结果说明精细度良好。2.6稳定性实验取供试液，按上述方法操作，每隔30in测定一次吸收度，连续5h考察其稳定性，结果说明供试

8、液在5h显色稳定，RSD=2.61%。2.7加样回收率实验精细称取鱼腥草样品20g，参加适量葡萄糖对照品，置同一烧杯中，按供试液制备与含量测定法操作。测定结果葡萄糖的平均回收率为100.7%，RSD=3.78%(n=6)。2.8样品测定方法取各供试品溶液，按“2.3项下方法操作，测定吸收值，从回归方程中求出供试液中葡萄糖的含量，按下式计算样品中多糖含量：多糖含量%DF100/。结果见表1。表1不同产地多糖含量测定略3讨论从湖北、广东、广西和湖南产多糖含量测定结果来看，不同产地鱼腥草多糖含量有一定的差异，其中湖北的鱼腥草多糖含量最高，广东和湖南产的鱼腥草多糖含量相近。在鱼腥草多糖的含量测定中，因

9、较难得到相应多糖对照品，采用葡萄糖代替对照品，测定样品中多糖的相对含量。文中以比色法测定样品中的单糖，通过单糖和多糖的换算因子计算药材中多糖。鱼腥草目前主要是开发挥发油类成分的制剂如鱼腥草注射液等相关产品，而对于水溶性多糖以废弃物处理，本课题对鱼腥草不同产地多糖的含量测定，对于鱼腥草资源的合理充分利用具有重要的意义。【参考文献】1国家药典委员会中国药典S.北京：化学工业出版社，2022：1552李爽，于庆海，金佩珂鱼腥草的有效成分、药理作用及临床应用的研究进展J.沈阳药科大学学报，1997，14(2)：1443engJ,DngXP,ZhaZZ,etal.EstablishentfG-SfingerprintffreshHuttuyniardataJ.hePharBull,2022,53(11):1484.4engJ,DngXP,ZhaZZ,etal.EstablishentfHPL-DAD-SfingerprintffreshHuttuyniardataJ.hePharBull,2022,53(12):1604.5孟江，董小萍，赵中振，等鲜鱼腥草的黄酮类化合物研究J.中国中药杂志