罗氏试剂盒说明书 Progesterone II 12142236001V12

1、12142236001V12孕酮试剂盒说明书 2009-05， V 12 中文 5/5 Elecsys和cobas e 分析仪12145383 122 100测试本试剂盒适用于以下分析仪Elecsys1010Elecsys2010MODULARANALYTICSE170cobas e 411cobas e 601主要用途用于体外定量检测人血清和血浆中孕酮。Elecsys和cobas e免疫分析仪的检测原理是电化学发光免疫法（ECLIA）。临床应用孕酮是一种分子量为314.5道尔顿的甾体类激素。主要形成于黄体细胞以及怀孕期胎盘中。孕酮水平与黄体的发育和萎缩有关。但是在女性周期的卵泡期几乎检测不到

2、孕酮，在排卵前一天可观察到孕酮水平升高。黄体期孕酮合成增加。在后半周期孕二醇作为孕酮主要的降解产物随尿排出体外。1 孕酮造成子宫内膜腺体组织（分泌阶段）增加，为受精卵着床做准备。怀孕期间孕酮抑制子宫肌层收缩。乳腺中，在雌激素作用的基础上，孕酮促进乳腺腺泡增殖和分泌物的分泌。1,2 检测孕酮可用于检测排卵以及黄体期的评估,有助于生育诊断。2,3检测原理竞争法，总检测时间：18分钟第一次孵育：样本（30l）中添加生物素单克隆孕酮-特异性抗体和钌复合物a标记的孕酮衍生物，和达那唑一同孵育，并释放孕酮。样本中的孕酮和标记的孕酮衍生物竞争性结合抗体结合位点。第二次孵育：加入包被链霉素的磁珠微粒，所有的复

3、合物通过生物素和链霉素的相互作用结合到固相载体上。结合到固相载体的标记的孕酮衍生物和样本中孕酮的含量成反比。将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面。未与磁珠结合的物质通过ProCell被去除。给电极加以一定的电压，使复合物化学发光，并通过光电倍增器测量发光强度。仪器通过2点定标校正试剂条形码包含的厂商定标曲线,自动计算得到检测结果.三联吡啶钌试剂工作溶液M 包被链霉亲和素的磁珠微粒（透明瓶盖），1瓶,6.5mL：包被链霉亲和素的磁珠微粒0.72mg/mL；防腐剂。R1 生物素标记的抗孕酮抗体（灰盖），1瓶10mL：生物素化单克隆抗孕酮抗体（鼠），0.15mg/L；磷酸缓冲液 2

4、5mmol/L，PH 7.0；防腐剂。R2 钌标记的Progesterone-peptide（黑盖）；1瓶8ml：孕酮（植物来源）和钌复合物标记的合成肽，浓度为10 ng/mL；磷酸缓冲液 25mmol/L，PH 7.0；防腐剂。警告和注意事项仅用于体外诊断。使用本试剂盒时必须遵循所有试验室试剂操作注意事项。所有废弃物必须按照当地法规进行处置。专业人员可要求获得安全数据报告。避免试剂和样本（样本、定标品和质控品）产生气泡。试剂处理该试剂盒为即用型，请勿分开使用。试剂相关信息可以通过试剂条形码获取。储存及稳定性于28下储存。请垂直摆放Elecsys Progesterone II试剂盒，确保使用

5、前仪器的自动搅拌器能够完全混匀磁珠微粒.稳定性：未开封试剂，28有效期内均可使用开封试剂，2812周MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 6018周Elecsys 2010和cobas e 4118周Elecsys 10104周（交替放置冰箱内或分析仪-环境温度为20-25；总开盖时间最多20小时）样本的采集和准备仅以下所列样本可用于检验。血清样本须用标准试管或含有分离胶的真空管收集。肝素锂、肝素钠、K3-EDTA、柠檬酸钠和氟化钠/草酸钾血浆都适用。使用枸橼酸钠时，检测结果必须校正+10%。标准：血清值回收率为90%-110%，斜率0.9-1.1，截距小于2分析灵敏度

6、（LDL），相关系数0.95。稳定性： 2-8可保存5天；-20可保存6个月。仅能冻融一次。分离管中血清2-8可保存48小时（注意试管厂商提供的数据）。选择合适的试管进行不同类型样本的采集，并非所有厂商的试管均可用于检测。不同厂商的样本采集系统可能含有不同的物质，某些情况下会影响检测结果。如果使用原始管进行检测（样本前处理系统）时，应遵循生产商所提供的指导。有沉淀的样本在检测前必须先作离心处理。请勿使用热灭活的样本和添加叠氮化合物的样本和质控品。检测前，确保病人样本、定标品及质控品在室温下(20-25)平衡。考虑到蒸发效应，样本、定标品和质控品应在2小时内完成检测。提供的物品参阅“试剂工作溶液

7、”章节。需要的物品（未提供）货号12145391122, Progesterone II CalSet,规格4x1mL货号11731416122，PreciControl Universal，规格2x3ml，分别为PreciControl Universal1和2 或货号11731416190，PreciControl Universal，规格2 x3 ml，分别为PreciControl Universal1和2货号11731416160，PreciControl Universal，规格2 x3 ml，分别为PreciControl Universal1和2（美国）货号0302854212

8、2, Elecsys Diluent Estradiol/Progesterone,2x22mL 样品稀释液实验室基础设备Elecsys 1010/2010，MODULAR ANALYTICS E170或cobas e 分析仪Elecsys 1010/2010和cobas e 411分析仪所需材料：货号11662988122，ProCell ，6 x 380mL 系统缓冲液货号11662970122， CleanCell ，6x 380mL测量池洗液 货号11930346122，Elecsys SysWash，1 x 500mL洗液添加剂货号11933159001，SysClean适配器货号1

9、1706829001，Elecsys 1010分析杯，1232反应管或货号11706802001，Elecsys 2010反应杯，6060反应管货号11706799001，Elecsys 1010分析吸头，30120移液管吸头.MODULAR ANALYTICS E170或cobas e 601所需材料：货号04880340190，ProCell M，2 x 2L 系统缓冲液货号04880293190， CleanCell M，2x 2L测量池洗液 货号12135027190， CleanCell M，1x 2L测量池洗液(美国)货号03023141001，PC/CC-杯，12个，用于检测前预

10、热ProCell M和CleanCell M货号03005712190, ProbeWash M, 12 x 70 mL 清洗液，用于检测完毕后或更换试剂时清洗试剂针。货号12102137001，反应杯/吸头组合装 84反应杯/吸头，组合装48盒，废物袋 货号03023150001, WasteLiner，废物袋 货号03027651001，SysClean AdapterM所有分析仪所需材料：货号11298500316, Elecsys SysClean, 5 x 100 mL 系统清洗液 只用于美国：货号12145413122, Elecsys Progesterone II CalChe

11、ck，3个浓度范围检测为达最佳检测性能，请遵照本说明书中有关分析仪的相关指导说明。具体的分析仪检测说明参见操作手册。使用前，分析仪会自动搅拌磁珠微粒，使其处于悬浮状态。试剂相关信息可通过条形码自动读取。特殊情况下，分析仪无法自动读取条码信息时，请输入条码标签上的15位数字序列。MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys 2010和cobas e分析仪：将冷藏试剂室温平衡至20C左右，放置分析仪的试剂盘（20C）内。避免泡沫产生。分析仪系统会自动调节试剂温度和各试剂盒瓶盖开/关。Elecsys 1010分析仪：将冷藏试剂室温平衡至20-25C左右，放置分析仪的样品/试剂盘（温度

12、20-25C）内。避免泡沫产生。使用前后,试剂瓶盖需手工打开和盖上。使用完毕后需置于2-8C保存。定标溯源性：该方法可溯源至ID-GC/MS (“同位素稀释-气相色谱质谱分析”).4。每套孕酮试剂的条形码上均含有其批特异的定标信息。使用Elecsys Progesterone II CalSet可以调整预设置的定标曲线。定标频率：使用新批号试剂时必须进行定标（新试剂盒在分析仪上放置不能超过24小时）。以下情况建议重新定标：MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys 2010和cobas e分析仪:使用同一批号试剂，1月后（28天）7天后（分析仪上使用同一试剂盒）Elecsys

13、 1010分析仪:每次更换试剂7天后（环境温度20-25C）3天后（环境温度25-32C）所有分析仪：根据需要：如质控超限。质控使用Elecsys PreciControl Universal 1和2进行质控。其他合适的质控品也可使用。各浓度质控至少每24小时内检测一次，每次更换试剂盒或定标后也须进行质控。各实验室可根据需求制定各自的质控限和质控周期。质控值必须处于规定的质控限内。若失控每个实验室必需采取相应的纠正措施。请遵循政府法规和当地行业导则进行质量控制。计算仪器会自动计算各样本分析物浓度（单位是nmol/L、ng/mL或g/L）。转换因子：nmol/L X 0.314 = ng/mL（

14、g/L） ng/mL X 3.18 = nmol/L干扰因素检测结果不受黄疸（胆红素54 mg/dL 或923mol/L）, 溶血（血红蛋白0.621mmol/L或 1g/dL，血脂(甘油三脂720mg/dL)和生物素82nmol/L或20ng/mL的影响。标准：回收率在初值10之内。对于接受高剂量生物素治疗的患者（5mg/天），需在末次生物素治疗8小时后采集样本。类风湿因子2000 IU/ml时，检测结果不受影响。对18种常用药物进行体外检测未发现会影响检测结果。只有保泰松在治疗剂量水平给药会对检测产生干扰（孕酮检测值下降）。少数病例中，高滴度的分析物特异性抗抗体（如HAMA），链霉亲和素或

15、钌会影响检测结果。恰当的实验设计可将影响程度降到最低。以诊断为目的，对检测结果的评价时必须结合患者病史，临床检查和其他临床资料。检测范围0.095-191 nmol/L或0.030-60.0 ng/mL（通过厂商定标曲线的最低检测限和最高值确定）。检测值低于检出限则报告0.095nmol/L或0.030 ng/mL。检测值高于检测上限时则报告191 nmol/L /L或60.0 ng/mL（10倍稀释样本后可报告至1910 nmol/L或600ng/mL）。稀释样本中孕酮含量超出检测范围时，可使用Elecsys Estradiol/Progesterone稀释液或合适的低分析物浓度人血清进行稀

16、释。推荐稀释比是1:10。稀释后样本浓度必须6 nmol/L（2 ng/mL）。稀释检测样本浓度，结果需乘以稀释倍数。期望值Elecsys Progesterone II检测方法研究如下：受试者数量百分位数nmol/Lng/mL男性 Elecsys Progesterone II Multicenter Evaluation, 5/99。实验室应当进行自身人群期望值调查评估，如有必要，可建立自己的参考范围。特殊性能指标试剂在分析仪上的性能试验数据如下。由于具体情况不同，各实验室所得出的数据可能会稍有差异。精密度根据NCCLS（临床实验室标准化委员会）中EP5-A准则，采用Elecsys试剂、人

17、混合血清和质控品验证重复性：每天测定6次，共10天(n=60)；MODULAR AMALYTICS E170分析仪批内精密度，n=21。所得结果如下：b）HS：人血清c）PC U：PreciControl Universal分析灵敏度（最低检测限）0.095 nmol/L（0.030 ng/mL）检测限是指能够检测出的区别于零浓度最低分析物浓度。最低检出限是最低浓度标准品2SD得到的浓度（厂商定标品12SD，批内精密度，n=21）方法学比较Elecsys Progesterone II检测方法（y）和Elecsys Progesterone检测方法（x）对临床样本检测结果进行相关性分析：样本数

18、n=88Passing/Bablok5 线性回归y=0.91x+0.29 y=0.90 x+0.50T=0.933 r=0.998样本浓度范围:0.6-140 nmol/L（约0.2-44 ng/mL）分析特异性使用抗体衍生物，交叉反应如下（%）：雄烯二醇0.002雄烯二酮0.136皮质酮0.687皮质醇0.005达那唑0.002硫酸脱氢表雄酮0.009D-(-)-甲基炔诺酮,0.008雌二醇0.009脱水羟基孕酮0.002双醋炔诺醇n.d.d甲孕酮0.812炔诺酮0.010醋酸炔诺酮n.d.睾酮0.0204-孕烯-11-17-二醇-3,20-二酮0.33811-去氧皮质酮0.29611-脱氧

19、皮质醇0.3925-二氢睾酮0.0405-二氢孕酮20.75-孕烯-3-醇-20-酮0.8585-孕烯-3-醇-20-酮0.2116-甲基-17-羟基-醋酸孕酮0.2576-甲基强的松龙n.d.17-羟基孕烯醇酮0.01817-羟基孕酮1.3020-羟基4-孕烯-3-酮0.016d）n.d.：未检测到功能灵敏度0.48 nmol/L（0.15 ng/mL）功能灵敏度定义为以天间重复CV为20%时对应检测限样品具有的最低分析物浓度。参考文献1. Johnson MR, Carter G, Grint C, Lightman SL. Relationship between ovarian ste

20、roids, gonadotrophins and relaxin during the menstrualcycle. Acta Endocrinol 1993;129:121-125.2. Runnebaum B, Rabe T. Gynkologische Endokrinologie und Fortpflanzungsmedizin Springer Verlag 1994; Band 1:36-38,70,116 Band 2:137,360,398-399,408-409,422-423. ISBN 3-540-57345-3, ISBN 3-540-57347-x.3. Guillaume J, Benjamin F, Sicuranza B, Wang CF, Garcia A, Friberg J. Maternal serum levels of estradiol, progesterone and h-Choriongonadotropin in ectopic pregnancy and their correlation with endometrial histologic findings. Surg Gynecol Obstet 1987;165