一种挥发油含量半定量评价方法

一种挥发油含量半定量评价方法I三」我公司品种黄连上清片、清热解毒片都含有连翘、薄荷、荆芥（穗）的混合挥发油成分，粗略的查阅了一下2010版《中国药典一部》中的中药成方制剂名称中包含“银翘”字样的处方中，包含以上三味药材的处方中对这三味药材进行提取挥发油入药的也不在少数。而包括黄连上清片、清热解毒片在内的这些药品标准中都没有对其中挥发油的成分以及含量做出明确的测定要求。在这种情况下，这一类含有连翘等三味（或其中任意两味）药材的混合挥发油成分的中药制剂，特别是其中的固体制剂中的这类挥发性物质实际上是处于药品监管的空白地位而游离于监控之外。含有挥发油的中药制剂，挥发油不仅有相应药理药效作用，而且对于有制剂质量的稳定性有重要的影响作用——挥发油的泛油问题在业界一直没有彻底解决。我公司对于含挥发油的中药制剂的稳定性研究也一直在艰难前行。在开展这些工作时我们发现有一个尴尬的问题一直困扰着我们：我们缺少一个能比较全面、快速、便捷适用的评价制剂中挥发油含量的方法。因此建立一个比较可行的挥发油含量的评价标准就成为首要任务。气相色谱法是常用的测定挥发油的定量方法，而《中国药典》等药品标准中多用于测定单味药材中指标性挥发油成分的含量或成方制剂中指标性挥发油成分的含量。反观黄连上清片、清热解毒片这类中药制剂，它们共同的特点是挥发油是一类有效部位，包含多种烃类、醛酮类、醇酯醚类挥发性成分，细细数来达几十种。而且撇开气相色谱法含测经济成本不论，时间成本也不容忽视。这样一来，用气相色谱法测这类制剂中的挥发油含量无异于杀鸡用了牛刀。鉴于以上，我们开发了一套用液相色谱法来测这类制剂中的挥发油含量的半定量评价方法，如下。色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（60：40）为流动相；检测波长为242nm。理论板数按对照品主峰计算应不低于2000。对照品溶液的制备:取提取的连翘、薄荷、荆芥（穗）混合成品挥发油1滴,加甲醇制成其125倍的稀释溶液,即得。供试品溶液的制备：取待测品适量，研细，精密称定5g,置蒸馏瓶中，加水适量，蒸馏，收集蒸馏液200ml,摇匀即得。测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul,注入液相色谱仪，测定对照品和供试品峰面积。评价方法：以对照品所得色谱峰面积为100单位，计算出供试品色谱峰面积所占对照品色谱峰面积的百分比，即得供试品中挥发油的单位数量。公式：供试品挥发油含量（单位）=A供试品/A对照品X100%用此法对我厂某批产品和市售同类竞争品分别进行挥发油含量测定。对照品色谱图、我厂某批产品样品色谱图及市售同类竞争品色谱图如下。0 1 2 3 4 5时间10.117(min),电压-2.084(mv)67 8 9时间(min)101112 13 14 15图1:对照品色谱图O(AE田§30 2 4 6 8时间15.841(min)电压-1.OSd.(mv)1012 14时间(jnin)1618图2：我厂某批产品样品色谱图co寸ECD修一-—1A0 7 4 6 8 10 14 16 18 <20,n- ,, 时间（min）时|0]25.943（min、电Hs-.O；