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文档简介

第三节动物的克隆(第二课时)乙肝病毒模式图一般来说,医院如何检测人体内是否存在乙肝病毒?检测抗原乙肝病毒用什么检测?相应的抗体思考题1.描述动物细胞全能性的表现程度,说出动物难以克隆的原因;2.简述动物细胞核移植的概念和核移植程序;3.列举动物细胞培养与动物细胞核移植的应用和发展前景。1、细胞融合与细胞杂交:诱导方式物理法:离心、振荡、电融合技术化学法:聚乙二醇生物法:灭活的仙台病毒灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面细胞膜被病毒颗粒穿通,细胞膜连接细胞融合形成杂种细胞植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合细胞融合原理细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞融合的方法去除细胞壁后诱导原生质体融合使细胞分散后诱导细胞融合诱导方法电刺激化学(聚乙二醇)电融合、PEG、灭活的仙台病毒用途获得杂种植株制备单克隆抗体2、杂交瘤技术和单克隆抗体制备:(1)传统抗体生产方法:抗原动物体内抗体刺激效应B(抗体不纯)筛选单一效应B细胞不能增值,产生大量抗体特异性差、纯度低;产量低、反应不够灵敏。(2)单克隆抗体制备过程:设计方案:一个B淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞杂交瘤细胞+化学性质单一、特异性强的抗体。特性:单克隆抗体的应用:疾病的诊断、治疗和预防优点:特异性强,灵敏度高,优越性强临床应用:单抗探针正在研究:用单克隆抗体治疗癌症受精卵>胚胎干细胞>多能干细胞>单能干细胞>体细胞3、动物细胞全能性的表现程度如多能造血干细胞:可分化为红细胞、白细胞、血小板等(2)低等动物细胞:全能性一般容易体现。如水螅的上皮细胞,不经过分裂就可以转变为上皮、肌肉细胞。(1)高等动物细胞4、动物难以克隆的根本原因:在动物的个体发育过程中,分化的结果使得细胞在形态和功能上高度特化,这是由于细胞在伴随着它们发育过程中在时间、空间的变化,基因表达的调控使得细胞中合成了专一的蛋白质。核移植胚胎细胞核移植体细胞核移植(难度高)(1)基本过程:动物体细胞核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移如入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中.使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体.5、细胞核移植实验和动物的克隆繁殖(2)培育过程去核卵细胞体细胞核细胞核移植重组细胞电脉冲刺激早期胚胎(或重组胚胎)胚胎移植母体子宫妊娠、出生个体(3)原理动物体细胞核具有全能性卵细胞A母绵羊B母绵羊乳腺细胞细胞质细胞核细胞核移植8细胞胚胎卵裂C母绵羊子宫胚胎移植多莉羊分娩妊娠重组细胞多莉羊的培育过程重组移核细胞丢失了源于乳腺细胞的调节蛋白,经过三次分裂后,原乳腺细胞的调节蛋白便全部被卵细胞质中的蛋白因子替换了,因此核DNA被重新编排,细胞开始表达自己的基因。克隆羊成功的分子细胞生理学机理多莉羊的克隆成功证明:1、高度分化细胞经一定技术处理,也可回复到类似受精卵时期的功能。2、在胚胎和个体发育中,细胞质具有调控细胞核(包括异源的细胞核)发育的作用。1、在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正确的是()A.结果是相同的 B.杂种细胞的形成过程基本相同C.操作过程中酶的作用相同D.诱导融合的手段相同B2、单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞,在这种培养基上不能存活增殖的细胞是()①淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞⑤杂交瘤细胞A.②④B.①③⑤C.①②③④D.②③C3、单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是()A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成D4、动物细胞克隆是指()A.一个单细胞培养成一个新的细胞群的技术B.一个重组细胞经分裂、分化发育成一个动物个体的技术C.几个同种动物的细胞培养成一个新的细胞群的技术D.一个卵裂球经胚胎分割发育成四个细胞群的技术A5、下列关于动物细胞培养的叙述,正确

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