呼吸道传播的病原微生物-其他细菌市公开课一等奖省名师优质课赛课一等奖课件

DepartmentofMicrobiology,HarbinMedicalUniversityMedicalMicrobiology医学微生物学DepartmentofMicrobiology,GMC第9章呼吸道传输病原微生物第8节呼吸道路径传输其它细菌第9章呼吸道传输病原微生物1、棒状杆菌属Corynebacterium白喉棒状杆菌（C．dephtheriae）类白喉杆菌（diphtheroidbacilli）白喉棒状杆菌Corynebacterium.dephtheriae形态与染色革兰阳性，细长弯曲，一端或两端膨大呈棒状美蓝或奈瑟染色，菌体两端或一端可见着色较深异染颗粒培养特征需氧或兼性厌氧吕氏培养基亚碲酸钾（K2TeO2·3H2O）血琼脂平板变异、抵抗力变异形态、菌落和毒力S型变为R型抵抗力较其它无芽孢细菌强对青霉素及广谱抗生素敏感，对磺胺不敏感致病物质白喉毒素（diphtheriatoxin）索状因子（cordfactor）K抗原白喉棒状杆菌（鼻咽腔）飞沫、污染物品鼻咽喉气管局部细菌和毒素作用灰白色假膜粘膜水肿及假膜脱落，引发呼吸道阻塞，甚至窒息死亡。外毒素入血毒血症心肌肝肾上腺外周神经内脏出血心肌炎软腭麻痹声嘶

肾上腺功效障碍2-7天潜伏期所致疾病：白喉免疫性抗毒素免疫锡克试验（Schicktest）

原理：毒素和抗毒素中和试验

微生物学检验法标本直接涂片镜检分离培养毒力试验防治标准人工自动免疫人工被动免疫抗菌治疗2、鲍特菌属（Bordelella）革兰阴性小球杆菌常借居于人和动物上呼吸道引发人类百日咳和急性呼吸道感染百日咳鲍特菌（B.pertussis）人类百日咳病原体

分类百日咳鲍特菌(B.pertussis)副百日咳鲍特菌（B.parapertussis）支气管鲍特菌(B.branchiseptica)鸟鲍特菌(B.avium)欣氏鲍特菌(B.hinzii)霍氏鲍特菌(B.holmesii)临床意义是百日咳致病菌一年四季均可发病，冬春季多发，小儿多于成人传输路径：飞沫传染源：病人潜伏期：1~2周致病原因：百日咳毒素(PT)、丝状血细胞凝集素(FHA)腺嘌呤环酶毒素(ACT)、气管细胞毒素、皮肤坏死毒素临床表现：1.卡他期：1~2周，显著卡他症状，传染性强，感染标本培养阳性率高2.痉挛期：1~4周，阵发性猛烈咳嗽，直至咳出粘稠痰液或呕吐为止3.恢复期：1~2周，阵咳减轻，渐趋停顿生物学特征革兰阴性短小杆菌无芽孢，有荚膜支气管鲍特菌、鸟鲍特菌有鞭毛专性需氧，最适温度35℃，最适pH6.8~7.0百日咳鲍特菌革兰染色

O抗原为共同抗原，K抗原因子7为百日咳、副百日咳和支气管炎鲍特菌所共有。经屡次传代后，菌落变为粗糙而呈多形性；失去荚膜变为无毒株。变异：相位变异等抵抗力弱，但在低温能生存，对紫外线敏感，日光照射60分钟可死亡。

培养：B-G培养基，菌落特点有珠光色泽菌落。引发百日咳检验：鼻咽拭子或咳碟法防治：DPT三联疫苗我国当前采取百日咳杆菌死菌苗与白喉、破伤风类毒素进行人工主动免疫，取得良好预防效果3、军团菌属（Legionella）军团菌是引发军团菌病病原体首发于1976年美国一次军人聚会，故称作军团病1982年,在我国南京首次证实了军团菌病。

分类军团菌属(Legionella)属于军团菌科（Legionellaceae）常见与人类疾病相关军团菌：嗜肺军团菌（Legionellapneumophila）米克戴德军团菌（L.micdadei）长滩军团菌（L.longbeachae）杜莫夫军团菌（L.dumoffii）波兹曼军团菌（L.bozemanii）形态染色革兰阴性，但不易被着色球杆菌，形态有多形性Gimenen染色，菌体呈红色，背景为绿色用Dieterle镀银法染成黑褐色不形成芽孢，无荚膜，有端生或侧生鞭毛培养特征营养要求高专性需氧需2.5～5％CO2生长迟缓惯用培养基及菌落特征BCYE培养基：灰白色、圆形光滑湿润菌落F-G培养基：针尖大小、黄色荧光军团菌菌落形态(CYE琼脂培养基)抗原结构Ｏ抗原：含有型特异性军团菌病约90%是由嗜肺军团菌所致,已发觉15个血清型，其中以Lp1血清型最常见,Lp6次之。抵抗力分布广泛、抵抗力强水中存活时间长军团菌病主要污染源是供水系统及冷却塔和空调系统临床意义致病物质：内毒素、外毒素、侵袭性酶传染路径：呼吸道（吸入含有军团菌气溶胶）所致疾病：军团菌病引发肺炎型和非肺炎型(庞蒂亚克热Pontiacfever)感染肺炎型:多器官损害，肺部、消化道及神经系统症状及体征，致死率高。医院感染可高达23%。非肺炎型（类似感冒）慢性心、肺、肾病变、艾滋病或接收免疫抑制剂者易发本病，且死亡率高达45%免疫性：感染者血清中出现特异性IgG、IgM抗体临床意义引发肺炎型和非肺炎型(庞蒂亚克热Pontiacfever)感染肺炎型：多器官损害，肺部、消化道及神经系统症状及体征，致死率高医院感染可高达23%慢性心、肺、肾病变、艾滋病或接收免疫抑制剂者易发本病，且死亡率高达45%临床意义空气－乳胶微粒传输发病机制：①内毒素和细胞产生各种酶②裂解红细胞③消化卵黄囊定时清洗空调预防军团菌病标本采集：临床标本：痰、气管分泌物、胸水和血液为主。病理组织标本：必须制成悬液，再进行涂片和分离培养。环境污染标本：应先浓缩再接种。微生物学检验检验程序标本（痰、支气管分泌物、血液、）涂片染色镜检（Giemsa染色）

分离培养（BEYE琼脂）判定试验结果汇报形态染色菌落特征氧化酶、触酶荧光抗体染色等分离培养：营养要求苛刻，生长迟缓生长温度为35℃最适pH6.7~7.0首次分离必须采取(BCYE)3~5天可形成1~2mm直径光泽菌落微生物检验核酸检测：是快速特异方法，采取DNA探针及PCR扩增rRNA方法均可用于军团菌快速诊疗抗体检测：是检测军团菌感染临床惯用伎俩，常采取方法：IFA、MAA、TAT、ELISA法等血清学试验检测指标：检测患者血清中特异性抗体方法：ELISA意义：检测特异性IgM：诊疗军团菌病检测特异性IgG：军团菌病流行病学调查军团菌感染诊断试验试验敏感性(%)特异性(%)评注培养70100参考方法直接免疫荧光25～70>95不推荐常规应用间接免疫荧光70～90>99只用于嗜肺军团菌血清群1酶标识免疫70～90>99乳胶凝集55～9085～99血清学（间接免疫荧光）70～80>95辅助培养

适应症：

军团菌病、肺炎支原体肺炎、肺炎衣原体肺炎、沙眼衣原体结膜炎、厌氧菌所致口腔感染、空肠弯曲菌肠炎、百日咳等。4、嗜血杆菌属

（Haemophilus）嗜血杆菌属—是一类革兰阴性短小杆菌、常呈多形态性、无鞭毛、无芽胞，可形成荚膜，营养要求高，需要特殊物质才能生长一类细菌。

分类嗜血杆菌属（Haemophilus）隶属于巴斯德菌科，嗜血杆菌属流感嗜血杆菌（H.influenzae）副流感嗜血杆菌（H.parainfluenzae）溶血嗜血杆菌(H.haemolyticus)副溶血嗜血杆菌（H.parahaemolyticus）克雷嗜血杆菌（H.ducreyi）埃及嗜血杆菌（H.aegyptius）嗜沫嗜血杆菌（H.aphrophilus）副嗜沫嗜血杆菌(H.paraphrophilus)迟缓嗜血杆菌（H.segnis）临床意义菌种常栖部位及所致疾病流感嗜血杆菌

原发化脓性感染及继发性感染，包含脑膜炎、鼻咽炎、关节炎、心包炎、鼻窦炎及中耳炎等。副流感嗜血杆菌口腔及阴道正常菌群，偶然可引发心内膜炎、尿道炎。溶血嗜血杆菌鼻咽部正常菌群，常引发儿童上呼吸道感染。副溶血嗜血杆菌口腔、咽部正常菌群，偶可引发咽炎、化脓性口腔炎和心内膜炎杜克雷嗜血杆菌软下疳，为性传输病菌。常引发外阴脓疱、溃疡、淋巴结肿大。埃及嗜血杆菌急性亚急性结膜炎、儿童巴西紫癜热嗜沫嗜血杆菌咽部正常菌群、牙菌斑中常见菌、偶致心内膜炎和脑脓肿副嗜沫嗜血杆菌咽部及阴道正常菌群，偶可引发亚急性细菌性心内膜炎、败血症、甲沟炎、、脑脓肿、脑膜炎。几个主要嗜血杆菌常栖部位及所致疾病

生物学特征G-短小球杆菌呈双球形或短丝状或多形性无芽孢、无鞭毛有毒菌株形成荚膜以流感嗜血杆菌（H.influenzae）为例

1.形态与染色流感嗜血杆菌培养基中需加入血液，以提供X因子和V因子（巧克力色培养基）X因子－－血红素V因子－－辅酶Ⅰ或辅酶Ⅱ菌落光滑、无色透明、露滴状首次培养需要CO2培养“卫星现象”卫星现象流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血平板上共同孵育时，因为后者能合成较多V因子，在金黄色葡萄球菌菌落周围生长流感嗜血杆菌菌落较大，离金黄色葡萄球菌菌落越远越小。致病性呼吸道常见菌对人有致病作用代表菌种是流感嗜血杆菌杜克嗜血杆菌、埃及嗜血杆菌也是致病其余菌种多为条件致病菌依据荚膜抗原分ABCDEF六型，B型毒力最强可产生自溶酶致病物质：荚膜、菌毛、内毒素、IgA蛋白酶所致疾病原发感染：脑膜炎、鼻咽炎等，多见于儿童继发感染：鼻窦炎等，多见于成人微生物学检验标本采集检验程序抗原检测及核酸检测分离培养与判定药品敏感试验标本采集标准在疾病早期采取标本，马上送检。在取标本时以肉汤湿润，预防干燥。对心内膜炎、患者取血液标本。痰液标本，应洗涤、消化，再接种。DNA探针杂交（快速检测）血液脑脊液脓汁痰分离培养(巧克力琼脂)涂片、镜检荚膜肿胀试验（初步汇报）标识抗体检测抗原涂片、荚膜肿胀试验（初步汇报）菌落形态、卫星现象、血清学现象汇报结果

嗜血杆菌检验程序增菌培养35℃5-10%CO2X、V因子需求试验吲哚、尿素酶、鸟氨酸脱羧酶（生物分型）分离培养培养条件：需要X、V因子营养要求高生长温度为35℃血琼脂平板培养基巧克力琼脂培养基菌落特征：巧克力琼脂培养基小、无色透明菌落流感嗜血杆菌巧克力琼脂养基菌落判定

培养需要X、V因子菌落形态卫星现象卫星现象(satellitephenomenon)卫星现象流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血平板上共同孵育时，因为后者能合成较多V因子，在金黄色葡萄球菌菌落周围生长流感嗜血杆菌菌落较大，离金黄色葡萄球菌菌落越远越小。嗜血杆菌因子β溶血发酵XV葡萄糖蔗糖乳糖甘露醇木糖触酶CO2生长ONPG流感嗜血杆菌++-+---D+--副流感嗜血杆菌-+-++-+-DDD溶血嗜血杆菌++++---D+--副溶血嗜血杆菌-++++---+--注：D为不一样结果嗜血杆菌属中种特征判定依据革兰阴性小杆菌、多形性培养采取巧克力色培养基，CO2培养血平板上有“卫星现象”X、V因子需求试验5、克雷伯菌属Klebsiella肺炎克雷伯菌肺炎亚种引发各种感染，有肺炎、肺脓肿、败血症、脑膜炎鼻炎亚种（臭鼻杆菌）慢性萎缩性鼻炎鼻硬结亚种（鼻硬节杆菌）慢性肉芽肿样病变肺炎衣原体（只有一个血清型：TWAR株）（一）生物学特征：1、原体平均直径0.38um，梨形，有周浆间隙，原体无质粒DNA；