DB15T 2348-2021奶牛营养代谢病判定及防控技术规范

ICS65.020.30CCSICS65.020.30CCSB43内蒙古自治区地方标准DB15/T2348—2021奶牛营养代谢病判定及防控技术规范Technicalspecificationfordeterminationandpreventionofthenutritionalmetabolicdiseasesindairycows2021-09-082021-09-082021-10-08内蒙古自治区市场监督管理局发布前 言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会（SAM/TC19）归口。本文件起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院。本文件主要起草人：王丽芳、宋洁、杨健、史培、张三粉。奶牛营养代谢病判定及防控技术规范范围本文件适用于内蒙古地区奶牛养殖场对奶牛常见营养代谢病的判定及防控。（DB15/T1899围产后期奶牛原发性亚临床酮病判定DB15/T1903奶牛亚急性瘤胃酸中毒预警指标下列术语和定义适用于本文件。下列术语和定义适用于本文件。3.1奶牛酮病ketosisofdairycows由于奶牛碳水化合物和脂肪代谢紊乱引起的一种全身功能失调的疾病。3.2亚急性瘤胃酸中毒subacuteruminalacidosis动物采食过量的精料或长期饲喂酸度过高的青贮饲料，在瘤胃内产生大量乳酸等有机酸，导致24h内，瘤胃pH维持在5.2～5.6之间长达3h，引发机体代谢性酸中毒的一种疾病。3.3产后瘫痪parturientparesis母畜产后突发的以血钙含量急剧下降、知觉消失、肌肉松弛、四肢麻痹、卧地瘫痪为特征的疾病。4临床症状34.1.23d12h～48h12hS5检验方法及判定标准奶牛酮病检验方法及判定标准按附录A执行。奶牛亚急性瘤胃酸中毒检验方法及判定标准按附录B执行。奶牛产后瘫痪检验方法及判定标准按附录C执行。6预防措施15d15d8.0%～10.019.01:14～518%。B（120g210d）2h～3h日粮干物质中可添加0.75%的缓冲剂,如碳酸盐、碳酸钙等，能有效降低亚急性瘤胃酸中毒发病率。在日粮中添加富含纤维的粗饲料是控制酸中毒的有效方法。在日粮中添加富含纤维的粗饲料是控制酸中毒的有效方法。15:857d～10。注：精粗比例以干物质计。pH产前50d～605d～8D3100015d3d1/2～1/34d～5d附录A（规范性）奶牛酮病的检测方法及判定标准酮粉法原料（材料亚硝基铁氰化钠，无水碳酸钠，硫酸铵，无菌试管，载玻片，无菌滴管。称取亚硝基铁氰化钠0.5g，加无水碳酸钠10g和硫酸铵20g，混合后研磨成粉状，置于棕色瓶中保存。无菌采集10mL乳样或10mL新鲜尿液于无菌试管中。测定时取0.1g粉剂置于载玻片上，用滴管吸取新鲜尿样或乳样2～3滴于粉剂上。根据表A.1判定结果，无颜色变化为阴性，如果变成紫色，结果判定为阳性。表A.1奶牛酮病酮粉法判定标准根据表A.1判定结果，无颜色变化为阴性，如果变成紫色，结果判定为阳性。表A.1奶牛酮病酮粉法判定标准原理酮体中β-羟丁酸含量稳定，通过β-羟丁酸脱氢酶法检测血中β-羟丁酸的含量可以判定奶牛是否患有酮病。材料酮体检测试纸条，真空采血管。设备血酮仪。颜色反应判定标准30s出现紫色，并逐渐加深++++30s开始呈微紫色，60s后呈现紫色+++60s开始呈淡紫色，2min后呈深紫色++3min后呈现微紫色+5min后仍无明显颜色改变-根据DB15/T18993mL于5mL30A.2.5判定标准根据表A.2判定结果。表A.2奶牛酮病血酮仪法判定标准酮体含量mmol/L结果判定＜1.2正常1.2~2.0亚临床型酮病＞2.0临床型酮病附录B（规范性）奶牛亚急性瘤胃酸中毒的检测方法及判定标准pH原理当机体酸性物质过多时，会从尿液中排除多余的酸，故尿液酸碱度是奶牛机体酸碱水平的标志。设备pH计。收集奶牛排尿中间的尿液50mL。每次测量前后都用纯化水将电极清洗干净，用吸水纸吸干表面液体，开机后选择测量项目“pH值”，将电极浸入盛满尿液的试管中段，待屏幕读数不再闪动时读数，为减小试验误差对每头牛的尿液pH值测量3次取平均值。原理奶牛发生瘤胃酸中毒时，微生物蛋白合成将受到限制，导致氨不能被转化，尿素氮水平进而升高。原理奶牛发生瘤胃酸中毒时，微生物蛋白合成将受到限制，导致氨不能被转化，尿素氮水平进而升高。根据DB15/T1903，尿素氮检测采用ELISA方法，按照《全国临床检验操作规程（第四版）》执行。根据DB15/T19035.38mmol/L～5.62mmol/L3mmol/LB.1。表B.1奶牛亚急性酸中毒判定标准尿素氮含量mmol/L判定结果血清尿素氮5.38mmol/L~5.62mmol/L范围外提示有亚急性瘤胃酸中毒风险牛乳尿素氮3mmol/L范围外提示有亚急性瘤胃酸中毒风险附录C（规范性）奶牛产后瘫痪的检测方法及判定标准原理pH材料150mg/L和2000mg/L标准溶液，真空采血管。设备血钙仪。150mg/LC.1.5判定标准根据表C.1判定结果。表C.1奶牛产后瘫痪血钙仪法判定标准（MTB）原理在碱性条件下，血清中钙离子与MTB结合，生成蓝紫色复合物。加入适当的8-羟基喹啉，可消除镁离子干扰，与钙标准液进行比较，通过分光光度计检测610nm处吸光度值，可求出血清总钙含量。材料碳酸钙，醋酸铵，MTB，8-羟基喹啉，聚乙烯吡咯烷酮，二甲亚砜，2-氨基-2-甲基-1,3-丙二醇，乙醇胺，去离子水，真空采血管。设备分光光度计。C.1.5判定标准根据表C.1判定结果。表C.1奶牛产后瘫痪血钙仪法判定标准（MTB）原理在碱性条件下，血清中钙离子与MTB结合，生成蓝紫色复合物。加入适当的8-羟基喹啉，可消除镁离子干扰，与钙标准液进行比较，通过分光光度计检测610nm处吸光度值，可求出血清总钙含量。材料碳酸钙，醋酸铵，MTB，8-羟基喹啉，聚乙烯吡咯烷酮，二甲亚砜，2-氨基-2-甲基-1,3-丙二醇，乙醇胺，去离子水，真空采血管。设备分光光度计。血清离子钙含量mg/L判定结果42.4~53.2正常＜42.4提示有产后瘫痪风险精确称取经110℃干燥12h的碳酸钙0.25g，置于1L容量瓶内，加稀盐酸（1份浓盐酸加9份去离子水）7mL溶解后，加去离子水约900mL，然后用500g/L醋酸铵溶液调pH至7.0，最后加去离子水至刻度，混匀，使浓度为2.5mmol/L。称取MTB络合剂152mg，8-羟基喹啉650mg，聚乙烯吡咯烷酮（PVP）2.0g，溶于二甲亚砜100mL中，加去离子水至1000mL，调pH至3.8～4.0。2-氨基-2-甲基-1,3-丙二醇21g，乙醇胺200mL，溶于去离子水并加至1000mL，pH约为12.5。采集奶牛静脉血，静置于常温下，待血清析出后，分离出血清，-20℃冷冻保存。测定时取3支试管，按表C.2步骤操作，充分混匀，放置5min，波长610nm，以空白管调零，读取各管吸光度。表C.2MTB单位为毫升试剂取样量空白管标准管测定管去离子水0.05--2.5mmol/L钙标准液-0.05-血清--0.05MTB试剂1.501.501.50碱性溶液1.501.501.50C.2.4