生化室作业指导书

生化室作业指导书文件编号：BPJSZ-3-SH-01~69第A版编制：吕刚审核：吕刚徐桂荣批准：房建英生效日期：2016111日北票计生站检验室北票计生站检验室北票计生站检验室生化室作业指导书主题内容目录文件编号：BPJSZ-3-SH版本修订号：A/3第2页共69页目 录序号 主题内容血清总胆红素测定血清丙氨酸氨基测定血清天门冬氨酸氨基测定血清葡萄糖氧化酶法测定血清尿素氮谷氨酸测定血清肌酐酶法测定血清总胆固醇酶试剂法测定血清甘油三酯酶试剂法测定血清高密度脂蛋白胆固醇测定血清低密度脂蛋白胆固醇测定血清天门冬氨酸氨基转移酶速率法测定复合质控品复合校准品高、低密度脂蛋白胆固醇校准品15QS-RO90纯水机操作维护规程16TBA-40FR生化分析仪操作维护规程17洗板机的标准操作程序18科华酶标仪KHBST-360酶标仪操作程序19血清总蛋白液体双缩脲法测定20血清白蛋白溴甲酚绿法测定21血清γ-谷氨酰转移酶测定22血清尿酸测定

代号 页号BPJSZ-3-SH-01 5BPJSZ-3-SH-02 6BPJSZ-3-SH-03 11BPJSZ-3-SH-04 14BPJSZ-3-SH-05 17BPJSZ-3-SH-06 21BPJSZ-3-SH-07 24BPJSZ-3-SH-08 27BPJSZ-3-SH-09 30BPJSZ-3-SH-10 34BPJSZ-3-SH-11 38BPJSZ-3-SH-12 43BPJSZ-3-SH-13 45BPJSZ-3-SH-14 47BPJSZ-3-SH-15 49BPJSZ-3-SH-16 51BPJSZ-3-SH-17 56BPJSZ-3-SH-18 57BPJSZ-3-SH-19 62BPJSZ-3-SH-20 64BPJSZ-3-SH-21 66BPJSZ-3-SH-22 68北票计生站检验室 生化室作业指导主题内容 修订页修订页

文件编号：BPJSZ-3-SH版本/修订号：A/3第369页序号文件编号页码需更改的内容更改内容批准人批准日期1BPJSZ-3-SH62增加血清总蛋白液体双房建英20160111缩脲法测定2BPJSZ-3-SH64增加血清白蛋白溴甲酚房建英20160111绿法测定3BPJSZ-3-SH68增加血清尿酸测定房建英201601114567891011121314151617181920北票计生站检验室生化室作业指导书文件编号：BPJSZ-3-SH版本修订号：A/3北票计生站检验室生化室作业指导书文件编号：BPJSZ-3-SH版本修订号：A/3第569页血清总胆红素(T-BIL)测定主题内容血清总胆红素(T-BIL)测定实验原理血清中总胆红素在PH为3.0的缓冲液中在钒酸盐作用下氧化成胆绿素。通过测定钒酸盐作用前后吸光度差异，与同样处理的标准液比较，即可求得总胆红素的含量。标本：病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。类型：血清、肝素或EDTA血浆，应避光保存。标本存放：2～87-203标本运输：常温条件下避光保存运输，在2～8℃7标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。实验材料试剂：英科新创总胆红素试剂盒（12）试剂组成试剂1240试剂2120试剂1与试剂2混合后含有下列物质：磷酸缓冲液 钒酸盐 0.8mol/L表面活性剂,稳定剂 适量注：本试剂为成熟产品，各批次产品成分相同，完全可以混合使用。试剂准备：试剂为即用式。试剂稳定性与贮存试剂避光保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为18个月。试剂2必需避光保存。试剂不可冰冻。变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。注意事项：此试剂为体外诊断用，不要入口，毒性还末确定；警告！腐蚀剂！不要入口；避免和眼睛，皮肤或衣服接触，如果接触到，立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟，接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护。校准品：朗道校准品对自动分析仪进行校准，参见生化检验校准品和质控品.SOP文件质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件TBA-40FR生化分析仪操作步骤项目基本参数：参见生化检验TBA-40FR生化分析仪项目测定参数.SOP文件。仪器操作步骤：参见生化检验TBA-40FR生化分析仪操作规程.SOP文件。检验结果的判断与分析质量控制：在每周定期标本中作定值血清水平质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。计算方法：以RANDOX复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果无需手工计算，以μmol/L报告。手工测定计算方法为：样本A2-样本A1总胆红素(μmol/L)= ×校准液浓度校准A2-校准A1参考值范围：婴儿：出生24小时内 ＜150μmol/L出生第2天 22-193μmol/L出生第3天 12-217μmol/L出生第4～6天 1.7-216μmol/L儿童：＞一个月 3.4-17μmol/L成年人： 1.7-21μmol/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。临床意义：胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强，几乎不溶解于水。在血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中，胆红素与葡萄糖醛酸结合,生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道。溶血（肝前黄疸、实质的肝损伤（肝性黄疸）和胆管堵塞（肝后黄疸）都会导致血液胆红素增高，形成高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症，称为Gilbert综合症。由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增多，使60～70%的婴儿血液出现总胆红素增高。常用的胆红素检测方法能检测总胆红素和直接胆红素。直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红素，因此可以根据总胆红素和直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量。操作性能线性范围：0～600μmol/L精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法

TBA-40FR批内精密度小于3%SD0.07，总精密度小于5%SD0.10。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。超出范围结果处理：本法线性上限为600μmol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9％氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2病危报警值的处理当新生儿血清标本测定结果总胆红素〉340μmol/L时，在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。方法局限性本法线性上限为600μmol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度≤1704μmol/L，血红蛋白浓度≤5.00g/L，甘油三酯浓度≤22.6mmol/L 时没有观察到干扰。补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。参考文献Thomas Led.Clinical Laboratory Diagnostics. 1sted.Frankfurt:THVerlagsgesellschaft;1998.p.192-202.TolmanKG,RejR.Liverfunction.In:BurtisCA,AshwoodER.editors.TietzTextbookofClinicalChemistry. 3rded.Philadelphia: W.B.SaundersCompany;P.1125-77.RandRN,diPasquaA.Anewdiazomethodforthedeterminationofbilirubin.ClinChem1962;6:570-8.20.其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按《检验科废物处置管理规定》执行。北票计生站检验室生化室作业指导书文件编号：BPJSZ-3-SH版本修订号：A/3北票计生站检验室生化室作业指导书文件编号：BPJSZ-3-SH版本修订号：A/3第669页血清丙氨酸氨基转移酶测定主题内容血清丙氨酸氨基转移酶IFCC推荐方法测定实验原理国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法。ALTL-丙氨酸+ -酮戊二酸 丙酮酸+L-谷氨酸丙酮酸+NADH+H

LDH（乳酸脱氢酶）

L-乳酸+NAD+

+HO2加入磷酸吡哆醛（P-5-P）是为了稳定ALT活性，避免样品中因内源性磷酸吡哆醛不足造成测定结果假性偏低。(如心肌梗死、肝病和特别监护病人的结果)1标本：病人准备：12小时禁食。类型：血清，肝素或EDTA血浆。3.标本存放：3天内的活性损失：2～8<10%15～25<17%；标本稳定性：-20℃保存至少可稳定4周。标本运输：常温条件下保存运输。标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。实验材料试剂英科新创ALT测定试剂盒（12*45ML21*18ML）试剂组成试剂1（R1：Tris缓冲液 pH7.5 L-丙氨酸 500mmol/LLDH（乳酸脱氢酶试剂2（R2：

≥1200U/La-酮戊二酸 15mmol/LNADH 试剂准备：试剂为即用式。试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。校准品：使用英科新创公司提供的RADOX校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。TBA-40FR生化分析仪操作步骤项目基本参数：参见生化检验TBA-40FR生化分析仪项目测定参数.SOP文件仪器操作步骤：参见生化检验TBA-40FR生化分析仪操作规程.SOP文件检验结果的判断与分析质量控制：在每周定期标本中作定值血清水平质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。计算方法：以RANDOX复合校准品ALT校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以U/L报告。参考值范围4不含磷酸吡哆醛女性7-40U/L男性9-50U/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。临床意义[1,2]：丙氨酸氨基转移酶（ALT）旧称谷丙转氨酶（GPT，天门冬氨酸氨基转移酶（AST）旧称谷草转氨酶（GOT。它们是氨基转移酶类的典型代表。氨基转移酶催化氨基从氨基酸转移给-酮酸的反应。ALT是肝脏的特异性酶，仅在肝胆疾病时显著升高。而AST水平的升高和心肌或骨骼肌损伤，以及肝组织损害等都有关。因此同时进行ALT和AST的检测，可用于鉴别肝损伤和心肌或骨骼肌损伤。AST/ALT比率用于肝病的鉴别诊断。比率<1预示中度的肝损伤；比率>1和严重肝病有关，常见慢性肝病。操作性能线性范围0～600U/L精密度：批内变异系数：＜5%10%灵敏度：本试剂的检测限为4U/L病人结果可报告范围超出范围结果处理本法对ALT活力检测的最大ΔA/min在340334nm为0.16,在365nm为0.08。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作19稀释，重新测定，结果乘以10病危报警值的处理方法局限性本法对ALT活力检测的最大ΔA/min在340334nm为0.16,在365nm为0.08样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作19稀释，重新测定，结果乘以10干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度1704mol/L，胆红素浓度684mol/L，血红蛋白浓度4.00g/L，甘油三酯浓度22.6mmol/L时没有观察到干扰。补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。参考文献ThomasL.AlanineaminotranSMerase(ALT),AspartateaminotranSMerase(AST).In:ThomasL,editor. Clinical Laboratory Diagnostics. 1sVerlagsgesellschaft;1998.p.55-65.

ed.Frankfurt: TH-BooksMossDW,HendersonAR.Clinicalenzymology. In:BurtisCA,AshwoodER.editors.TietzTextbookofClinicalChemistry. 3r1999.P.617-721.

ed.Philadelphia: W.B.SaundersCompany;BergmeyerHU,HorderM,RejR.InternationalFederationofClinicalChemistry(IFCC)ScientificCommittee,Analyticalsection:appr ovedrecommendationonIFCCmethodsforthemeasurementofcatalyticconcentrationofenzymes.PartIFCC method for alanine aminotranSMerase(L-alanine: aminotranSMerase,EC).JClinChemClinBiochem1986;24:481 -95.LorentzK,RohleG,SiekmannL.EinfuhrungderneuenStandardmethoden1994zurBestimmungderkatalytischenEnzymkonzentrationenbei37 ℃.DGKlinischeMitteilungen1995;26:190-2.20.其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按《检验科废物处置管理规定》执行。北票计生站检验室生化室作业指导书文件编号：BPJSZ-3-SH版本修订号：A/3北票计生站检验室生化室作业指导书文件编号：BPJSZ-3-SH版本修订号：A/3第PAGE1369页血清天门冬氨酸氨基转移酶测定主题内容血清天门冬氨酸氨基转移酶IFCC推荐方法测定实验原理：国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法。L-天门冬氨酸+ -酮戊二酸 AST 草酰乙酸+L-谷氨酸草酰乙酸+NADH+H标本：

+ MDH

L-苹果酸+NAD

++HO2病人准备：12小时禁食。类型：血清，肝素或EDTA血浆。3.标本存放：3天内的活性损失：2～8<8%15～25<10%；标本稳定性：-20℃保存至少可稳定3个月。标本运输：常温条件下保存运输。标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。实验材料6.1试剂：英科新创AST测定试剂盒（货号：141260171701 试剂1：6×64ml；试剂2：6×16ml）试剂组成试剂1（R1：Tris缓冲液pH7.880mmol/LL-天门冬氨酸240mmol/LMDH(苹果酸脱氢酶)≥600U/LLDH(乳酸脱氢酶)≥600U/L试剂2(R2)：a-酮戊二酸12mmol/LNADH0.18mmol/L磷酸吡哆醛试剂：Good’s缓冲液pH9.60.7mmol/L磷酸吡哆醛0.09mmol/L试剂准备：试剂为即用式。试剂稳定性与贮存试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。校准品：使用英科新创公司提供的RANDOX校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。TBA-40FR生化分析仪操作步骤项目基本参数：参见生化检验TBA-40FR生化分析仪项目测定参数.SOP文件仪器操作步骤：参见生化检验TBA-40FR生化分析仪操作规程.SOP文件检验结果的判断与分析质量控制：在每一批标本定值血清质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。计算方法：以RANDOX复合校准品AST校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。不使用校准品进行AST活力检测，可以直接使用ΔA/min均值乘以计算因子得到结果，但是这样所得结果的可靠性不如使用校准品。计算ALT活力的计算因子见下表：ΔA/min×因子=AST活力[U/L]底物起始的反应（37℃） 样品起始的反应（37℃340nm 2143 1745334nm 2184 1780365nm 3971 3235参考值范围4不含磷酸吡哆醛 含磷酸吡哆醛女性 13-35U/L 10～35U/L男性 15-40U/L 10～50U/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。13.临床意义12丙氨酸氨基转移酶（ALT）旧称谷丙转氨酶（GPT，天门冬氨酸氨基转移酶（AST）旧称谷草转氨酶（GOT。它们是氨基转移酶类的典型代表。氨基转移酶催化氨基从氨基酸转移给-酮酸的反应。ALT是肝脏的特异性酶，仅在肝胆疾病时显著升高。而AST水平的升高和心肌或骨骼肌损伤，以及肝组织损害等都有关。因此同时进行ALT和AST的检测用于鉴别肝损伤和心肌或骨骼肌损伤。AST/ALT比率可用于肝病的鉴别诊断。比率<1预示中度的肝损伤；比率>1和严重肝病有关，常见慢性肝病。操作性能线性范围2-800U/L。精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，批内精密度小于3%总精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。不含磷酸吡哆醛含磷酸吡哆醛灵敏度：本试剂的检测限为2U/L病人结果可报告范围2-800U/L。超出范围结果处理：本法对AST活力检测的最大ΔA/min在340334nm为0.16为0.08。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1+9稀释，重新测定，结果乘以10病危报警值的处理无。方法局限性本法对AST活力检测的最大ΔA/min在340334nm为0.16,在365nm为0.08品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1+9稀释，重新测定，结果乘以10干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度1704mol/L，胆红素浓度684mol/L，甘油三酯浓度22.6mmol/L时没有观察到干扰。红细胞内富含AST，因此溶血血清检测结果明显偏高。补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。参考文献：ThomasL.AlanineaminotranSMerase(ALT),Aspartateaminotran SMerase(AST).In：ThomasL,editor.ClinicalLaboratoryDiagnostics.1stVerlagsgesellschaft;1998.p.55-65.

ed.Frankfurt：TH-BooksMossDW,HendersonAR.Clinicalenzymology. In：BurtisCA,AshwoodER.editors.TietzTextbookofClinicalChemistry.3rd1999.P.617-721.

ed.Philadelphia：W.B.SaundersCompany;BergmeyerHU,HorderM,RejR.InternationalFederationofClinicalChemistry(IFCC)Scientific Committee, Analytical section：approvedrecommendation onIFCCmethodsforthemeasurementofcatalyticconcentrationofenzymes.PartIFCC method for alanine aminotranSMerase(L-alanine ： aminotranSMerase,EC).JClinChemClinBiochem1986;24 ：481-95.LorentzK,RohleG,SiekmannL.EinfuhrungderneuenStandardmethoden1994zurBestimmungderkatalytischenEnzymkonzentrationenbei37 ℃.DGKlinischeMitteilungen1995;26 ：190-220.其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按《检验科废物处置管理规定》执行。北票计生站检验室生化室作业指导书文件编号：BPJSZ-3-SH版本修订号：A/3北票计生站检验室生化室作业指导书文件编号：BPJSZ-3-SH版本修订号：A/3第PAGE1669页血清葡萄糖氧化酶测定法主题内容血清葡萄糖（GLU）氧化酶终点测定法实验原理标本：病人准备：12小时禁食。类型：血清或血浆（EDTA，肝素或氟化钠，标本最好不要溶血。迅速分离血清或血浆，减少红细胞糖酵解时葡萄糖的损失。随机收集尿样。标本存放：血清、血浆应在血液采集1小时内，尽早分离。加入糖分解抑制剂（NaF）后的稳定性：15～25℃保存可稳定1天,4～8℃保存可稳定7天。血清中的葡萄糖，无溶血，无细菌污染，没有添加的防腐剂，在25℃下可稳定8个小时，在472小时。尿样应保存在2～8℃下并尽快进行分析。脑脊髓液如果避免蒸发可在2～8定至少55天内不检验的标本应在收集后立即储存在-20℃的条件下。标本运输：常温条件下保存运输。标本拒收标准：细菌污染、超时送检的的标本。实验材料试剂英科新创血糖测定试剂盒（试剂440ml）试剂组成试剂1Tris缓冲液 pH7.8 100mmol/L苯酚 4mmol/L4-氨基安替吡啉 0.2mmol/L葡萄糖氧化酶 15U/L过氧化物酶 1.2U/L试剂准备：试剂为即用式。试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。注意事项：校准品：RANDOX校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。TBA-40FR生化分析仪操作步骤项目基本参数：参见生化检验TBA-40FR生化分析仪项目测定参数.SOP文件仪器操作步骤：参见生化检验TBA-40FR生化分析仪操作规程.SOP文件检验结果的判断与分析质量控制：在每周定期标本中作定值血清水平质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。计算方法：以RANDOX复合校准品血糖校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以mmol/L报告。手工测定计算方法为：Au葡萄糖浓度（mmol/L）＝ ×校准液浓度As参考值范围（mmol/L新生儿脐带血3.5～8.81小时2.0～5.52小时2.2～4.95～14小时1.9～4.310～28小时2.6～4.544～52小时2.7～4.4儿童（空腹）1～6岁 4.1～7.07～19岁 3.9～5.9成人（空腹） 3.9～6.1参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。临床意义：检测血清或血浆中葡萄糖主要用于糖尿病的诊断和治疗监视，还可用于检出新生儿低血糖症、排除胰岛细胞癌以及评估各种疾病碳水化合物代谢状况。血清葡萄糖水平可能会异常高（高血糖）或异常低（低血糖。葡萄糖测量用于诊断和治疗碳水化合物代谢紊乱，包括糖尿病，新生儿低血糖，自发性低血糖，郎格罕氏岛细胞癌等。葡糖尿（存在葡萄糖化尿）在健康，怀孕的妇女中很常见。妊♘葡糖尿的最主要的特征就是每天之间或一天之中有一个显著的变化。脑脊髓液（CSM）葡萄糖的测定帮助区别病毒性脑膜炎与细菌性脑膜炎；细菌性脑膜炎和结核性脑膜炎中的葡萄糖值通常很低（不到的40%至50%血清葡萄糖，病毒性脑膜炎中的葡萄糖值通常是正常的。癌性脑膜炎（肿瘤细胞在脑膜中广泛渗透）也使CSM葡萄糖值在正常值以下。操作性能线性范围：0～25mmol/L精密度：批内变异系数：＜5%10%超出范围结果处理：本法线性上限为25mmol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9%氯化钠溶液作1:10稀释，重新测定，结果乘以11病危报警值的处理：女性及婴儿的血糖测定值<2.2mmo/L 或者>22.2mmol/L；男性的血糖测定值<2.7mmo/L或>22.2mmol/L新生儿的血糖测定值<1.6mmo/L或>16.6mmol/L 时在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。方法局限性本法线性上限为25mmol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9%氯化钠溶液作1:10稀释，重新测定，结果乘以11干扰物质：使用试剂起始法，当样品中抗坏血酸浓度1704mol/L，胆红素浓度684mol/L，血红蛋白浓度5.00g/L，甘油三酯浓度22.6mmol/L 时没有观察到干扰。补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。参考文献Thomas L.Clinical Laboratory Diagnostics. 1sVerlagsgesellschaft;1998.p.131-7.

ed. Frankfurt: TH-BooksSacksDB.Carbohydrates.In:BurtisCA,Ash woodER.editors.TietzTextbookofClinical Chemistry. 3r750-808.

ed.Philadelphia: W.B.Saunders Company; 1999.p.20.其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按《检验科废物处置管理规定》执行。北票计生站检验室生化室作业指导书文件编号：BPJSZ-3-SH版本修订号：A/3北票计生站检验室生化室作业指导书文件编号：BPJSZ-3-SH版本修订号：A/3第PAGE2069页血清尿素氮谷氨酸脱氢酶测定法主题内容血清尿素氮（BUN）谷氨酸脱氢酶测定法1.实验原理脲酶-谷氨酸脱氢酶（Urease-GLDH）连续监测法。尿素被脲酶水解产氨。在NADH的存在下，氨和α-酮戊二酸反应生成谷氨酸，NADH同时被氧化成NAD。NADH的减少和样品中尿素浓度成正比。本法是连续监测法。脲酶尿素+2HO 2NH2 4

+2HCO－3谷氨酸脱氢酶NH＋+α-酮戊二酸+NADH L-谷氨酸+NAD4标本：病人准备：血清无特殊要求。要留取24小时尿样。

＋+HO2类型：血清、血浆（不可使用肝素铵、新鲜尿液。无溶血和凝块的血清，如果必须使用血浆，建议使用无铵离子的抗凝血剂，如EDTA和肝素钠。用新鲜尿液作样品时，用蒸馏水作1:100稀释。标本存放：血清或血浆稳定性：4～25℃保存可稳定7-20℃保存可稳定1液稳定性：20～25℃保存可稳定24～8℃保存可稳定7-20℃保存可稳定1个月。标本运输：常温条件下保存运输。标本拒收标准：细菌污染的标本。实验材料6.1试剂：英科新创尿素测定试剂盒试剂1：6×64ml＋试剂2：616ml）试剂组成试剂1Tris缓冲液α-酮戊二酸pH7.8120mmol/L7mmol/LADP0.6mmol/L谷氨酸脱氢酶≥1000U/L脲酶≥6000U/L试剂2NADH0.25mmol/L试剂准备：试剂为即用式。试剂稳定性与贮存试剂保存于2～25℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。注意事项：此试剂为体外诊断用。不要入口，吞下有害。保护剂为叠氮钠，避免接触皮肤及粘膜，与下水管中的铅反应形成爆炸性化合物，即使只含有少量的叠氮钠，如果排向下水道请用大量的水冲洗。应采取必要的预防措施使用试剂。校准品：使用英科新创公司提供的RANDOX校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。TBA-40FR生化分析仪操作步骤项目基本参数：参见生化检验TBA-40FR生化分析仪项目测定参数.SOP文件仪器操作步骤：参见生化检验TBA-40FR生化分析仪操作规程.SOP文件检验结果的判断与分析质量控制：在每一批标本定值血清质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。计算方法：以RANDOX复合校准品尿素氮校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以mmol/L报告。将尿素量乘以系数2.8可以换算成尿素氮量；将尿素氮量乘以系数0.357可以换算成尿素量。手工测定计算方法为：Au尿素氮浓度（mmol/L）＝ ×校准液浓度As参考值范围血清/1成人（mmol/L）全球2.8～7.2女性<50岁2.6～6.7女性>50岁3.5～7.5男性<50岁3.2～7.3男性>50岁 3.0～9.2儿童1～3岁 1.8～6.04～13岁 2.5～6.014～19岁 2.9～7.5尿素/肌酐比率[1] 25～40[(mmol/L)/(mmol/L)]尿液2

0.43～0.72mol/d（注：各实验室应有自己的参考范围。）参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。临床意义：尿素是蛋白质分解代谢的含氮终产物。高尿素血症或氮血症表现为血液中尿素水平升高。鉴别肾前和肾后氮血症时可以同时检测尿素和肌酐。因脱水、蛋白质代谢增加、皮质醇治疗或肾脏灌注减少等引起的肾前氮血症，表现为尿素水平升高而肌酐水平正常。由泌尿管道阻塞引起的肾后氮血症，表现为尿素和肌酐水平都升高，但肌酐升高程度较小。发生肾病时，肾小球滤过作用明显下降或蛋白质摄入量大于200g/天都会导致尿素浓度升高。尿素氮的检测用于诊断和治疗某些肾脏疾病和代谢紊乱。尿素氮大约占血液中非蛋白氮的75%。它通过肝脏中的氨进行合成，是蛋白质脱氨作用的产物。通过肾小球从血液中过滤尿素到尿中，是消除体内多余氮的主要方法。血液尿素氮（BUN）水平是肾功能以及肾前状态和肾后状态的度量标准，肾前因素引起的BUN的升高包括心脏代偿失调，缺水或增加的蛋白质分解代谢。水平增加的肾脏因素有急性肾小球肾炎，慢性肾炎，多囊肾，肾纤维化和肾小管坏死。任何类型的泌尿道的梗塞受阻是BUN水平升高的肾后因素1。肾小球清除尿素和肌酸酐，但是，尿素随后部分地被肾小管重吸收，然而肌酸酐却不会。因此，血清尿素氮和血清肌酸酐测定经常同时用于肾功能的不同诊断中。操作性能线性范围：0.3～50mmol/L精密度：批内变异系数：＜5%10%灵敏度：本试剂的检测限为0.3mmol/L。病人结果可报告范围：0.3～50mmol/L超出范围结果处理：本法线性上限血清/血浆为50mmol/L、尿液为5mol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9%的氯化钠溶液作1:2稀释，重新测定，结果乘以3病危报警值的处理：当尿素氮测定值>36mmol/L时，在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。方法局限性本法线性上限血清/血浆为50mmol/L、尿液为5mol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9%的氯化钠溶液作1:2稀释，重新测定，结果乘以3干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度1704mol/L，胆红素浓度684mol/L，血红蛋白浓度5.00g/L，甘油三酯浓度22.6mmol/L时没有观察到干扰。铵离子会影响检测结果，因此收集血浆时勿用肝素铵抗凝！补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。参考文献ThomasL,editor.Clinicallaboratorydiagnostics.Verlagsgesellschaft;1998.p.374-7.

sted.Frankfurt:TH-BooksBurtisCA,AshwoodER.editors.Tietztextbookofclinicalchemistry.Philadelphia:W.B.SaundersCompany;1999.p.1838.

rded.TalkH,Schubert GE.Enzymatische Harstoff bestimmung inBlutundSerumoptischenTestnachWarburg(EnzymaticdeterminationofureainbloodandserumwiththeopticaltestaccordingtoWarburg).KlinWschr1965;43:174-5.20.其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按《检验科废物处置管理规定》执行。北票计生站检验室生化室作业指导书文件编号：BPJSZ-3-SH版本修订号：A/3北票计生站检验室生化室作业指导书文件编号：BPJSZ-3-SH版本修订号：A/3第PAGE2369页血清肌酐酶法测定主题内容血清肌酐（Creatine）酶法测定实验原理标本采集病人准备：早晨空腹采血（空腹12小时左右，静脉采血。类型：血清，肝素血浆，尿液。标本存放：血清、血浆的稳定性：4～25℃保存可稳定7天；-20℃保存至少可稳定3个月。尿液的稳定性：20～25℃保存可稳定24～8℃保存可稳定6-20稳定6个月对尿液用蒸馏水作1:49稀释后检测，结果乘50后报告。标本运输：常温条件下运输标本拒收的标准：细菌污染的标本不能作测定。实验材料北京英科新创肌酐检测试剂盒（1：245ml2：215ml。试剂混合后含有下列物质：缓冲液：100mmol/L抗坏血酸氧化酶＞2KU/L肌氨酸氧化酶＞8KU/L肌酸脒基水解酶＞40KU/L肌酐胺基水解酶＞450KU/L6.POD ＞55KU/L7.ESPAS 1.5mmol/L8.4-AA 2.5mmol/L试剂准备：试剂为即用式。试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～25℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。注意事项：校准品：使用英科新创公司提供的RANDOX校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。TBA-40FR生化分析仪操作步骤项目基本参数：参见生化检验TBA-40FR生化分析仪项目测定参数.SOP文件仪器操作步骤：参见生化检验TBA-40FR生化分析仪操作规程.SOP文件结果的判断与分析质量控制：在每一批标本定值血清质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。计算方法：以RANDOX复合校准品肌酐校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠检测结果，以mmol/L报告。参考值范围血清/1女性 44～80mmol/L男性 53～97mmol/L临床意义：肌酐是通过肾脏经由肾小球滤过作用排泄的废物。健康人血浆中肌酐的浓度相当稳定，与每天水的摄取量、活动和生成尿量无关。因此血浆肌酐水平升高常指示排泄量的降低，即肾功能受损。肌酐清除率能较好地评估肾小球滤过率（GFR，通过它能较好地检出肾病和监视肾功能。为此，在规定的时间内同时收集血清和尿液，进行肌酐检测。肌酐经肾小球滤过后不被肾小管重吸收,通过肾小管排泄。在肾脏疾病初期,血清肌酐值通常不升高,直至肾脏实质性损害,血清肌酐值才增高。在正常肾血流条件下，肌酐值如升高至176～353μmol/L,提示为中度至严重的肾损害。所以,血肌酐测定对晚期肾脏病临床意义较大。操作性能线性范围：10～8000μmol/L精密度：批内变异系数：＜5%10%灵敏度：本试剂的检测限为4mol/L。病人结果可报告范围：10～8000mol/L超出范围结果处理：本法对肌酐的检测范围为10～8000mol/L。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L的氯化钠溶液作1+1稀释，重新测定，结果乘以2病危报警值的处理：当肌酐测定值>352mol/L时，在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。方法局限性本法对肌酐的检测范围为10～8000mol/L。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L的氯化钠溶液作1+1稀释，重新测定，结果乘以2干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度1704mol/L，血红蛋白浓度5.00g/L，甘油三酯浓度22.6mmol/L时没有观察到干扰。胆红素浓度68.8mol/L起有干扰补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。参考文献NewmanDJ,PriceCP.Renalfunctionandnitrogenmetabolites.In:BurtisCA,AshwoodER.editors.TietzTextbookofClinicalChemistry.3rded.Philadelphia:W.B.SaundersCompany;1999.p.1204-.Thomas L.Clinical Laboratory Diagnostics. 1st ed. Frankfurt: THVerlagsgesellschaft;1998.p.366-74.20.其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按《检验科废物处置管理规定》执行北票计生站检验室生化室作业指导书文件编号：BPJSZ-3-SH版本修订号：A/3北票计生站检验室生化室作业指导书文件编号：BPJSZ-3-SH版本修订号：A/3第PAGE2669页血清总胆固醇酶试剂法测定法主题内容血清总胆固醇酶试剂法测定法实验原理胆固醇酯酶(CHE)、胆固醇氧化酶(CHO)、过氧化物酶(POD)、Trinder 反应偶联比终点法。反应式如下：CHE胆固醇酯+H2O 胆固醇＋脂肪酸CHO胆固醇＋O2 Δ4-胆甾烯酮＋H2O2POD2H2O2+4-氨基安替比林+苯酚 醌亚胺(显色)+4H2O标本：病人准备：12小时禁食。类型：血清，肝素或EDTA抗凝血浆。标本存放：血清稳定性：20～25℃保存可稳定14～8℃保存可稳定1-20存可稳定3个月。标本运输：常温条件下保存运输。标本拒收标准：细菌污染的标本。实验材料试剂英科新创总胆固醇试剂盒（试剂440ml）试剂组成Good’s缓冲液 pH6.7 100mmol/L酚 5mmol/L4-氨基安替比林 0.3mmol/L胆固醇酯酶(CHE) ≥200U/L胆固醇氧化酶(CHO) ≥50U/L过氧化物酶(POD) ≥3000U/L试剂准备 试剂为即用式。试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂，可以与金属反应，处理时大量清水冲洗。校准品：使用英科新创公司提供的RANDOX校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。TBA-40FR生化分析仪操作步骤项目基本参数：参见TBA-40FR生化分析仪项目测定参数.SOP文件仪器操作步骤：参见TBA-40FR生化分析仪操作规程.SOP文件检验结果的判断与分析质量控制：在每周定期定值血清质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见室内质控操作规程.SOP文件。计算方法：以RANDOX复合校准品总胆固醇校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠检测结果。参考值范围（mmol/L）合适范围： ＜5.16mmol/L高度危险临界值： 5.16～6.2mmol/L高度危险范围： ＞6.2mmol/L临床意义：胆固醇由体细胞合成和来自对食物的吸收1，是细胞膜的组分和类固醇激素、胆汁酸的前体。血液中的脂蛋白是脂肪和载脂蛋白的复合物，由它转运胆固醇。脂蛋白有四种形式：高密度脂蛋白（HDL，低密度脂蛋白（LDL，极低密度脂蛋白（VLDL）和乳糜微粒。LDL参与将胆固醇运送至外周细胞，而HDL负责从细胞中吸收胆固醇。四种形式的脂蛋白与冠状动脉粥样硬化有着明确的关系。低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）作用于动脉内膜形成动脉粥样硬化斑块，与冠心病(CHD)以及相关的死亡率有着非常密切的关系。即使总胆固醇在正常范围内，LDL-C浓度的升高也预示了高度危险。HDL-C具有抵御斑块形成的作用，它与冠心病的发生呈负相关。事实上，低HDL-C值是独立的危险因子。进行个体总胆固醇的检测只是起过筛作用，如果要对危险作较好的评估，必须另外进行HDL-C和LDL-C检测。近年来，通过控制饮食、改变生活方式的治疗、和/或使用各种药物治疗(特别他汀类药物[HMGCoA还原酶抑制剂])临床试验，说明了降低总胆固醇和LDL-C水平可极大地减少CHD的危险。操作性能线性范围：1～13mmol/L。精密度：批内变异系数：＜5%10%灵敏度：本试剂的检测限为0.03mmol/L。病人结果可报告范围：1～13mmol/L。超出范围结果处理：本法对胆固醇的检测范围为1～13mmol/L。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1+4稀释，重新测定，结果乘以5病危报警值的处理：高度危险范围>6.2mmol/L。方法局限性本法对胆固醇的检测范围为1～13mmol/L。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1+4稀释，重新测定，结果乘以5干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度≤2840mol/L，胆红素浓度≤342mol/L，血红蛋白浓度≤2.00g/L，甘油三酯浓度≤22.6mmol/L 时没有观察到干扰。补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。参考文献RifaiN,BachorikPS,AlbersJJ.Lipids,lipoproteinsandapolipoproteins.In:BurtisCA,AshwoodER.editors.TietzTextbookofClinicalChemistry.3 rded.Philadelphia:W.B.SaundersCompany;1999.P.809-61.RecommendationoftheSecondJointTaskForceofEuropeanandotherSocietiesonCoronaryPrevention.Preventionofcoronaryheartdiseaseinclinicalpractice.EurHeartJ1998;19:1434-503.ArtissJD,ZakB.Measurementofcholesterolconcentration.In:RifaiN,WarnickGR,DominiczakMH,eds.Handbookoflipoproteintesting.Washington:AACCPress,1997:99-114.DeegR,ZiegenhornJ.Kineticenzymaticmethodforautomatedoftotalcholesterolinserum.ClinChem1983;29:1798-802.SchaeferEJ,McNamaraJ.Overviewofthediagnosisandtreatmentoflipiddisorder.InRifaiN,WarnickGR,DominiczakMH,eds.Handbookoflipopr testing.Washington:AACCPress,1997:25-4820.其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按《检验科废物处置管理规定》北票计生站检验室生化室作业指导书文件编号：BPJSZ-3-SH版本修订号：A/3北票计生站检验室生化室作业指导书文件编号：BPJSZ-3-SH版本修订号：A/3第PAGE2969页血清甘油三酯酶试剂法测定法主题内容血清甘油三酯酶试剂法测定法实验原理脂蛋白酯酶（LPL、甘油激酶（GK、甘油-3-磷酸氧化酶（GPO、过氧化物酶(POD)、Trinder反应偶联比色终点法。反应式如下：LPL甘油三酯+HO 甘油+脂肪酸2GK甘油+ ATP 甘油-3-磷酸+ GPO甘油-3-磷酸+O 二羟丙酮磷酸+HO2 2 2POD2HO+4-氨基安替比林+4-氯酚 醌亚胺+HCl+4H O2 2 2标本：病人准备：12小时禁食。类型：血清，肝素或EDTA抗凝血浆。标本存放：血清稳定性：20～25℃保存可稳定24～8℃保存可稳定1-20存至少可稳定1年。标本运输：常温条件下保存运输。标本拒收标准：细菌污染的标本。实验材料试剂英科新创甘油三脂试剂盒（试剂440ml）试剂组成Good’s缓冲液pH7.2100mmol/L4-氯酚0.5mmol/LATP 2mmol/L镁离子 15mmol/L4-氨基安替比林 0.5mmol/L甘油激酶（GK） ≥0.5KU过氧化物酶（POD） ≥30KU脂蛋白酯酶（LPL） ≥10KU甘油-3-磷酸氧化酶（GPO） ≥1KU试剂准备：试剂为即用式。试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。可以与金属反应，处理时大量清水冲洗。校准品：使用英科新创公司提供的RANDOX校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。TBA-40FR生化分析仪操作步骤项目基本参数：参见TBA-40FR生化分析仪项目测定参数.SOP文件仪器操作步骤：参见TBA-40FR生化分析仪操作规程.SOP文件检验结果的判断与分析质量控制：在每周定期定值血清质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见室内质控操作规程.SOP文件。计算方法：以RANDOX复合校准品甘油三脂校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。参考值范围（mmol/L）合适范围： 0.4-1.86mmol/L高度危险临界值： 2.3～4.5mmol/L高度危险范围： >4.5mmol/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。临床意义：甘油三酯是甘油与3个脂肪酸形成的酯，是天然脂肪中含量最多的。在血液中，甘油三酯和载脂蛋白结合形成极低密度脂蛋白（VLDL）和乳糜微粒，运送到全身。甘油三酯的检测用于对脂肪状态的过筛，以检出致动脉粥样硬化的危险；监视降脂治疗的效果。近期的研究说明，甘油三酯的增高同时伴有低密度脂蛋白（LDL）的升高，特别对发生冠心病（CHD）具有高度危险。甘油三酯的升高也和肝、肾以及胰腺疾病有关。>2mmol/L（HDL-C）<1.0mmol/L（CHD）（>2.3mmol/L）的临床应用需结合CHD的其他危险因子。操作性能线性范围：≤11.7mmol/L精密度：批内变异系数：＜5%10%灵敏度：本试剂的检测限为0.03mol/L。病人结果可报告范围：0.01～11.7mol/L。超出范围结果处理：本法对甘油三酯的检测范围为0.01～11.7mmol/L 样品测定值过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1+4稀释，重新测定，结果乘以5。病危报警值的处理：当甘油三脂测定值>4.5mmol/L时，在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。方法局限性本法对甘油三酯的检测范围为0.01～11.7mmol/L样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1+4稀释，重新测定，结果乘以5干扰物质：当样品中胆红素浓度684mol/L时没有观察到干扰。当抗坏血酸浓度341mol/L、血红蛋白浓度2.50g/L时有干扰。补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。参考文献RifaiN,BachorikPS,AlbersJJ.Lipids,lipoproteinsandapolipoproteins.In:BurtisCA,AshwoodER.editors.TietzTextbookofClinicalChemistry.3rdPhiladelphia:W.B.SaundersCompany;1999.P.809-61.ColeTG,KlotzschSG,McNamaraJ.Measurementof triglycerideconcentration.In:RifaiN,Warnick GR,Dominiczak MH,eds.Handbook oflipoprotein Washington:AACCPress,1997.p.115-26.RecommendationoftheSecondJointTaskForceofEuropeanandotherSocietiesonCoronaryPrevention.Preventionofcoronaryheartdiseaseinclinicalpractice.EurHeartJ1998;19:1434-503.20.其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按《检验科废物处置管理规定》执行。北票计生站检验室生化室作业指导书文件编号：BPJSZ-3-SH版本修订号：A/3北票计生站检验室生化室作业指导书文件编号：BPJSZ-3-SH版本修订号：A/3第33页共69页血清高密度脂蛋白胆固醇测定法主题内容血清高密度脂蛋白胆固醇免疫抑制酶试剂测定法实验原理以往高密度脂蛋白胆固醇的测定采用沉淀法3。本试剂盒采用第三代均相法，不必离心步骤即可检测高密度脂蛋白胆固醇。使用抗人脂蛋白抗体与低密度脂蛋白(LDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)和乳糜微粒形成抗原抗体复合物，只有剩下的高密度脂蛋白胆固醇可以被胆固醇酶法试剂检测4。LDL,VLDL,乳糜微粒

抗原抗体复合物+HDL抗人-脂蛋白抗体HDL-C+H

O+O2 2

Δ4-胆甾烯酮+脂肪酸+HOCHECHO 2 2HO+F-DAOS+4-氨基安替比林2 2

蓝色复合物+HOPOD 2注：F-DAOS为N-乙基-N-(2-羟基-3-丙磺基)-3,5-二甲氧基-4-氟苯胺标本：病人准备：12小时禁食。类型：血清，肝素抗凝血浆。标本存放：稳定性：4～6℃保存可稳定4-20℃保存至少可稳定2周。标本运输：常温条件下保存运输。标本拒收标准：细菌污染的标本。实验材料试剂英科新创HDL-C测定试剂盒（货号：141352171701 试剂1 6×64ml＋试剂2 6×16ml）试剂组成试剂1（R1：Good’s缓冲液 pH7.0 26mmol/L4-氨基安替比林 0.60mmol/L过氧化物酶(POD) 1600U/L抗坏血酸氧化酶 1800U/L羊抗人b-脂蛋白抗体 适试剂2（R2：Good’s缓冲液pH7.026mmol/L胆固醇酯酶(CHE)800U/L胆固醇氧化酶(CHO)4000U/LF-DAOS 0.16mmol/L试剂准备：试剂为即用式。试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。开盖后放于仪器的冰箱中可以稳定30天。变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。注意事项：不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。校准品：使用英科新创公司提供的TruCalHDL/LDL 校准品对自动分析仪进行校准具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。TBA-40FR生化分析仪操作步骤项目基本参数：参见TBA-40FR生化分析仪项目测定参数.SOP文件仪器操作步骤：参见TBA-40FR生化分析仪操作规程.SOP文件检验结果的判断与分析质量控制：在每一批标本定值血清质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见室内质控操作规程.SOP文件。计算方法：以英科新创提供HDL/LDL校准品HDL-C校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。参考值范围5：1.2-1.68mmol/L期望水平＞1.2mmol/L临界水平0.9-1.2mmol/L治疗最低水平＞0.9mmol/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。临床意义12胆固醇由体细胞合成和来自对食物的吸收1，是细胞膜的组分和类固醇激素、胆汁酸的前体。血液中的脂蛋白是脂肪和载脂蛋白的复合物，由它转运胆固醇。脂蛋白有四种形式：高密度脂蛋白（HDL，低密度脂蛋白（LDL，极低密度脂蛋白（VLDL）和乳糜微粒。LDL参与将胆固醇运送至外周细胞，而HDL负责从细胞中吸收胆固醇。四种形式的脂蛋白与冠状动脉粥样硬化有着明确的关系。低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）于动脉内膜形成动脉粥样硬化斑块，与冠心病(CHD)以及相关的死亡率有着非常密切的关系。即使总胆固醇在正常范围内，LDL-C浓度的升高也预示了高度危险。HDL-C具有抵御斑块形成的作用，它与冠心病的发生呈负相关。事实上，低HDL-C值是独立的危险因子。进行个体总胆固醇的检测只是起过筛作用，如果要对危险作较好的评估，必须另外进行HDL-C和LDL-C检测。近年来，通过控制饮食、改变生活方式的治疗、和/或使用各种药物治疗(特别他汀类药物[HMGCoA还原酶抑制剂])临床试验，说明了降低总胆固醇和LDL-C水平可极大地减少CHD的危险。流行病学研究观测到男性HDL-C浓度小于0.9mmol/L、女性小于1.0mmol/L，又出现空腹甘油三酯浓度大于2mmol/L时，预示冠心病的高度危险2。操作性能线性范围：0.1～3.5mmol/L精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，批内精密度小于5%总精密度小于10%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。灵敏度：本试剂的检测限为0.04mmol/L。病人结果可报告范围：0.1～3.5mmol/L。超出范围结果处理：本试剂盒对高密度脂蛋白胆固醇检测范围为0.1～3.5mmol/L。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1+23病危报警值的处理：无。方法局限性本试剂盒对高密度脂蛋白胆固醇检测范围限为3.5mmol/L。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1+2稀释，重新测定，结果乘以3干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度2840mol/L，胆红素浓度684mol/L，血红蛋白浓度5.00g/L，甘油三酯浓度13.6mmol/L 时没有观察到干扰。补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。参考文献RifaiN,BachorikPS,AlbersJJ.Lipids,lipoproteinsandapolipoproteins.In:BurtisCA,Ashwood ER,editors. TietzTextbook ofClinical Chemistry. 3rdPhiladelphia:W.B.SaundersCompany;1999.P.809-61.RecommendationoftheSecondJointTaskForceofEuropeanandotherSocietiesonCoronaryPrevention. Prevention ofcoronaryheartdiseaseinclinicalpractice.EurHeartJ1998;19:1434-503.WiebeDA,WarnickGR.Measurementofhigh -densitylipoproteincholesterol.In:Rifai N,Warnick GR,Dominiczak MH,eds.Handbook oflipoprotein Washington:AACCPress,1997:127-44.NauckM,MaerzW,WielandH.Newimmu noseparation-basehomogenousassayHDL-cholesterolcomparedwiththreehomogenousandtwoheterogeneousmethodsforHDL-cholesterol.ClinChem1998;44:1443-51.Schaefer EJ,McNamara J.Overview ofthediagnosis andtreatment ofdisorder. InRifaiN,Warnick GR,Dominiczak MH,eds.Handbook oflipoproteintesting.Washington:AACCPress,1997:25-4820.其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按《检验科废物处置管理规定》执行。北票计生站检验室生化室作业指导书文件编号：BPJSZ-3-SH版本修订号：A/3北票计生站检验室生化室作业指导书文件编号：BPJSZ-3-SH版本修订号：A/3第PAGE3769页血清低密度脂蛋白胆固醇测定法主题内容血清低密度脂蛋白胆固醇化学选择性抑制酶测定法实验原理以往LDL-C的测定通常用总胆固醇、HDL-C和甘油三酯的检测结果进行综合，经Friedwald公式计算而得3。本LDL-C试剂盒为均相方法，省却离心步骤直接检测LDL-C。在反应第一步，LDL被选择性保护，而非LDL脂蛋白被酶处理。第二步中，LDL被释放，由胆固醇酶法显色反应选择性地测定出LDL-CLDL＋试剂1 LDL被保护CHE&CHOHDL,VLDL,乳糜微粒 胆甾烯酮＋H2O2PODH2O2 H2O保护的LDL+试剂2 释放CHE&CHO