《病理诊断技术》课件：包涵体染色

包涵体包涵体（Inclusionbody）：病毒感染细胞后在胞浆内形成的一种光学显微镜下可见的特殊结构，富含病毒的区域。大多数包涵体由病毒子组成，少数包涵体是细胞对病毒反应的产物。如狂犬病的Negri氏体。病毒包涵体染色法包涵体病毒包涵体染色法病毒染色法Mann亚甲蓝伊红染色法

Stovall-Black包涵体染色法

Lendrum包涵体染色法

Giemsa包涵体染色法病毒染色法Mann亚甲蓝伊红染色法

病毒包涵体染色法Mann亚甲蓝伊红染色法亚甲篮伊红染液：1％亚甲蓝水溶液6ml，1％伊红Y水溶液6ml，蒸馏水28ml。分化液：无水酒精100ml，40％氢氧化钠3滴。病毒包涵体染色法Mann亚甲蓝伊红染色法操作方法切片脱蜡至水；亚甲蓝伊红染液8－24h；蒸馏水10－20sec；分化液20－30sec；丙酮脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。结果：包涵体、尼氏体呈红色，细胞核呈蓝色。操作方法切片脱蜡至水；《病理诊断技术》课件：包涵体染色《病理诊断技术》课件：包涵体染色《病理诊断技术》课件：包涵体染色《病理诊断技术》课件：包涵体染色Giemsa法显示多种病毒包涵体。

1.切片脱蜡至水，蒸馏水洗。

2.浸入0.01M磷酸盐溶液(PBS)PH7.6中,换洗3次,3分钟/次。

3.

浸染于PH7.6的Giemsa染液中过夜。

4.PBS冲洗15分钟。

5.0.01%柠檬酸水溶液分化，于镜下控制。

6.

蒸馏水洗。

7.吸水纸吸干或风干切片。

8.丙酮脱水，1-2分钟。

9.入1：1丙酮和二甲苯1-2分钟。

10.二甲苯透明，中性树胶封固。Giemsa法显示多种病毒包涵体。

1.切片脱蜡至水，蒸Giemsa法显示多种病毒包涵体

结果：SARS病毒包涵体于肺细胞胞浆中呈现鲜红色；合胞病毒，巨细胞病毒包涵体于肺组织的细胞核内，在没有形成包涵体前呈鲜红色，形成包涵体后呈深紫色至蓝色。红血细胞显示绿色。Giemsa法显示多种病毒包涵体

结果：SARS病毒包涵体于病毒包涵体染色方法（苏木素-伊红）(1)二甲苯（Ⅰ）20min；(2)二甲苯（Ⅱ）20min；（3）100％无水乙醇2min；；(4)95%乙醇2min；(5)80%乙醇2min；(6)70%乙醇2min;(7)流水冲洗5min(8)苏木素染色5min(9)流水洗5min(10)盐酸分化20s (11)流水冲洗返蓝5min(12)伊红液染色30s(13)95%乙醇20s;(14)100%乙醇5min;(15)100%乙醇5min(16)二甲苯（Ⅰ）5min(17)二甲苯（Ⅱ）5min（18）中性树胶封片病毒包涵体染色方法（苏木素-伊红）《病理诊断技术》课件：包涵体染色《病理诊断技术》课件：包涵体染色《病理诊断技术》课件：包涵体染色思考题

1.包涵体形成的原理？

2.包涵体染色的方法有哪些？原理是什么？

思考题

1.包涵体形成的原理？

2.包涵体染色的方法有哪包涵体包涵体（Inclusionbody）：病毒感染细胞后在胞浆内形成的一种光学显微镜下可见的特殊结构，富含病毒的区域。大多数包涵体由病毒子组成，少数包涵体是细胞对病毒反应的产物。如狂犬病的Negri氏体。病毒包涵体染色法包涵体病毒包涵体染色法病毒染色法Mann亚甲蓝伊红染色法

Stovall-Black包涵体染色法

Lendrum包涵体染色法

Giemsa包涵体染色法病毒染色法Mann亚甲蓝伊红染色法

病毒包涵体染色法Mann亚甲蓝伊红染色法亚甲篮伊红染液：1％亚甲蓝水溶液6ml，1％伊红Y水溶液6ml，蒸馏水28ml。分化液：无水酒精100ml，40％氢氧化钠3滴。病毒包涵体染色法Mann亚甲蓝伊红染色法操作方法切片脱蜡至水；亚甲蓝伊红染液8－24h；蒸馏水10－20sec；分化液20－30sec；丙酮脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。结果：包涵体、尼氏体呈红色，细胞核呈蓝色。操作方法切片脱蜡至水；《病理诊断技术》课件：包涵体染色《病理诊断技术》课件：包涵体染色《病理诊断技术》课件：包涵体染色《病理诊断技术》课件：包涵体染色Giemsa法显示多种病毒包涵体。

1.切片脱蜡至水，蒸馏水洗。

2.浸入0.01M磷酸盐溶液(PBS)PH7.6中,换洗3次,3分钟/次。

3.

浸染于PH7.6的Giemsa染液中过夜。

4.PBS冲洗15分钟。

5.0.01%柠檬酸水溶液分化，于镜下控制。

6.

蒸馏水洗。

7.吸水纸吸干或风干切片。

8.丙酮脱水，1-2分钟。

9.入1：1丙酮和二甲苯1-2分钟。

10.二甲苯透明，中性树胶封固。Giemsa法显示多种病毒包涵体。

1.切片脱蜡至水，蒸Giemsa法显示多种病毒包涵体

结果：SARS病毒包涵体于肺细胞胞浆中呈现鲜红色；合胞病毒，巨细胞病毒包涵体于肺组织的细胞核内，在没有形成包涵体前呈鲜红色，形成包涵体后呈深紫色至蓝色。红血细胞显示绿色。Giemsa法显示多种病毒包涵体

结果：SARS病毒包涵体于病毒包涵体染色方法（苏木素-伊红）(1)二甲苯（Ⅰ）20min；(2)二甲苯（Ⅱ）20min；（3）100％无水乙醇2min；；(4)95%乙醇2min；(5)80%乙醇2min；(6)70%乙醇2min;(7)流水冲洗5min(8)苏木素染色5min(9)流水洗5min(10)盐酸分化20s (11)流水冲洗返蓝5min(12)伊红液染色30s(13)95%乙醇20s;(14)100%乙醇5min;(15)100%乙醇5min(16)二甲苯（Ⅰ）5min(17)二甲苯（Ⅱ）5min（1