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ICS11.220CCSB4113河 北 省 地 方 标 准DB13/T5584—2022兔须癣毛癣菌诊断与防治技术规程20222022053120220701河北省市场监督管理局发布前 言GB/T本文件由河北省农业农村厅提出。本文件起草单位:河北工程大学。兔须癣毛癣菌诊断与防治技术规程范围本文件规定了兔须癣毛癣菌病的临床诊断、实验室诊断和综合判定。本文件适用于兔类、牛、羊、犬、猫等须癣毛癣菌病的诊断及其须癣毛癣菌病原的检测和防治。()DB51/T1419-2012大熊猫须癣毛癣菌病检验技术规范须癣毛癣菌Trichophytonmentagrophytes为人畜共患的皮肤真菌。缩略语TSAYEPD:酵母浸出粉胨葡萄糖培养基;DMSO:二甲基亚砜;当兔出现以下部分或全部情形时,可作为初步诊断的依据。感染的兔皮肤出现瘙痒、脱毛和皮肤炎症,以头部、四肢部位最多。各种年龄的兔均可感染。病变部位因脱毛而露出粉红色的皮肤并发炎,有的出现结痂,有的结痂下面出现化脓性炎症。包括常规检测和定量PCR检测技术。75把采集的病料接种到沙氏培养基(含0.5mg/mL氯霉素)平板,放入27℃真菌培养箱培养10d,观察菌落生长情况菌落特征,并涂片镜检,确定纯化后保存备用。对照兔须癣毛癣菌菌典型菌落形态和菌体形态特征进行初步鉴别(参见附录A)。(KOH()KOH溶液(KOH15g加入30mLDMSO40mL20mL1000mL)1~2PCRDNA使用真菌DNA提取试剂盒提取。参照GenBankbenAfum(KP099602)PrimerExpress6.0140bp):上游引物F:(5'-GCAAAGAAGCCTGGAAGAAG-3')下游引物R:(5'-GGAGACCATCTGTGAGAGTT-3)PCR采用25采用25μL:SYBRPremixExTaq(2×)12.5μL0.5μL,DNA模板1.025μL601030S,7230S,406.2.5结果判断当待测样品实时荧光定量PCR检测结果有“S”型扩增曲线,Ct值≤36.5,且Tm值介于86.48℃~86.65Tm结合临床诊断、实验室检测结果,可确诊兔须癣毛癣菌病。力。根据药敏试验结果,选择敏感抗真菌药物治疗。对病兔的药物治疗
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