肾脏病电子显微镜检查课件整理

innisfreeShenzangbingrue肾脏病电子显微镜检查Naturalbeautyinnisfree1主要内容◎电子显微镜概述◎肾脏于电镜下观察的主要内容肾小球正常的超微结构及其常,改变◎常见几种原发性肾小球疾病的电镜表现o其他肾小球疾病的特征性电镜下表现◎肾脏病电镜检査的意义主要内容2电子显微镜(EMDΔ电子显微镜是根据电子光学原理,用电子束和电子透镜代替光東和光学透镜,使物质的细微结构在非常高的放大倍数下成像的仪器。△20世纪70年代,透射式电子显微镜的分辨率约为0.3纳米(人眼的分辨本领约为0.2毫米)。△现在电子显微镜最大放大倍率超过300万倍,而光学显微镜的最大放大倍率约为2000倍。电子显微镜(EMD3光学显微镜与电子显微镜比较表10-1光学显微镜与电子显微镜的区别项目电子显微镜光学显微镜照明光源电子束可见光照明波长加速电压80kV时,波长为0.0042m其中紫色光波长400m分辨率0.2am0.2μm(肉眼分辨率0.2放大倍数100万倍1000倍成像透镜电磁透镜玻璃透镜照明介质1.33×10Pa以上真空度空气,玻璃、油焦距调整调整物镜电流,改变磁场强度调整焦距改变物镜与样品之间距离调焦样品50~100m超薄切片厚切片样品载体具有支持膜载网载玻片光学显微镜与电子显微镜比较4电镜技术应用的进展√电镜诞生于30年代初,但直到60年代以前,电镜在生物医学中的应用主要限于细胞生物学、微生物、实验病理学等研究领域。60年代初期人们开始将电子显微镜应用于人体病理标本,通过对这些人体病理标本的超微结构分析,进一步了解了疾病的病理变化及其发生机制,为某些疾病的诊断提供重要的形态依据√电子显微镜在肾活检诊断、疑难肿瘤的病理诊断、感染性疾病(病毒性,细菌性等)、代谢性疾病(贮积性疾病)、细胞外物质沉积性疾病(如淀粉样变性)、组织细胞增生症(郎格罕细胞增生性疾病)、纤毛不能运动综合征等特殊病的诊断中公认起着重要的作用。电镜技术应用的进展5电子显微镜在医学中的应用诊断电镜学基础医学研究·肿瘤诊断超微结构学病毒诊断超微病理学肾活检电镜细胞活血心肌活检免疫电镜肝活检定性定量研究肌肉活检·遗传性疾病交叉学科(医工结合)研究纳米医药新技术电子显微镜在医学中的应用6电镜的分类透射电铮(超高压电子显微镜、高压电子显微镜、高分镜、普及型电子显微镜、简易型电子显微镜)电子束透过样品(透射电子)直接放大成像内部结构2(扫描电镜)电子束以扫描形式轰声在样品上,产生一次面超微结构订后再将二次电子等信息收集起来放大成像3.分析电子显微镜:将X射线和显微分析仪与扫描电镜或透射电镜相连,常见的是能谱仪和波谱仪。★免疫电镜:是免疫组织化学与透身电镜相结合的方法。电镜的分类7透射电子显微镜(TEM,TransmissionElectronMicroscope△TEM是以电子束为照高压电子枪明源,电子束穿透样品,在穿过样品时电高速电子束子束被标上了样品的信息,经多级放大后电磁透镜在荧光屏上成像的大型仪器。产生的图像样品是平面的,它要求样品极薄,因此样品必电子束发生投射须备成50-70nm的超薄切片荧光屏电能转变成光能TEM成像原理→浓淡不同的图像图像各处浓淡的不同真实反映了样品不同部位的物质结构透射电子显微镜8扫描电子显微镜(SEM,ScanningElectronMicroscope△SEM是利用电子束在样品表面扫电子枪描激发出来代表样品表面特征的电子束光点的亮度一所发出的次银电子数要用来作微形貌扫描量观察、显微成分电磁透镜次级电子信号分析。分辨率可接受达到1nm,放大倍样品表面探测器转变成光子数可达5×105倍放大、光电倍增管转换威电压信号SEM成像原理→显象管荧光屏扫描电子显微镜9TEM样品制备取材固定(戊二醛和锇酸)脱水SEM样品制备·浸透、包埋超薄切片取材、固定、干燥和喷金染色(枸橼酸铅和醋酸铀)·不需要经过超薄切片TEM样品制备10肾脏病电子显微镜检查课件整理11肾脏病电子显微镜检查课件整理12肾脏病电子显微镜检查课件整理13肾脏病电子显微镜检查课件整理14肾脏病电子显微镜检查课件整理15肾脏病电子显微镜检查课件整理16肾脏病电子显微镜检查课件整理17肾脏病电子显微镜检查课件整理18肾脏病电子显微镜检查课件整理19肾脏病电子显微镜检查课件整理20肾脏病电子显微镜检查课件整理21肾脏病电子显微镜检查课件整理22肾脏病电子显微镜检查课件整理23肾脏病电子显微镜检查课件整理24肾脏病电子显微镜检查课件整理25肾脏病电子显微镜检查课件整理26肾脏病电子显微镜检查课件整理27肾脏病电子显微镜检查课件整理28肾脏病电子显微镜检查课件整理29肾脏病电子显微镜检查课件整理30肾脏病电子显微镜检查课件整理31肾脏病电子显微镜检查课件整理32肾脏病电子显微镜检查课件整理33肾脏病电子显微镜检查课件整理34肾脏病电子显微镜检查课件整理35肾脏病电子显微镜检查课件整理36肾脏病电子显微镜检查课件整理37肾脏病电子显微镜检查课件整理38肾脏病电子显微镜检查课件整理39肾脏病电子显微镜检查课件整理40肾脏病电子显微镜检查课件整理41肾脏病电子显微镜检查课件整理42肾脏病电子显微镜检查课件整理43肾脏病电子显微镜检查课件整理44肾脏病电子显微镜检查课件整理45肾脏病电子显微镜检查课件整理46肾脏病电子显微镜检查课件整理47肾脏病电子显微镜检查课件整理48肾脏病电子显微镜检查课件整理49肾脏病电子显微镜检查课件整理50肾脏病电子显微镜检查课件整理51肾脏病电子显微镜检查课件整理52肾脏病电子显微镜检查课件整理53肾脏病电子显微镜检查课件整理54innisfreeShenzangbingrue肾脏病电子显微镜检查Naturalbeautyinnisfree55主要内容◎电子显微镜概述◎肾脏于电镜下观察的主要内容肾小球正常的超微结构及其常,改变◎常见几种原发性肾小球疾病的电镜表现o其他肾小球疾病的特征性电镜下表现◎肾脏病电镜检査的意义主要内容56电子显微镜(EMDΔ电子显微镜是根据电子光学原理,用电子束和电子透镜代替光東和光学透镜,使物质的细微结构在非常高的放大倍数下成像的仪器。△20世纪70年代,透射式电子显微镜的分辨率约为0.3纳米(人眼的分辨本领约为0.2毫米)。△现在电子显微镜最大放大倍率超过300万倍,而光学显微镜的最大放大倍率约为2000倍。电子显微镜(EMD57光学显微镜与电子显微镜比较表10-1光学显微镜与电子显微镜的区别项目电子显微镜光学显微镜照明光源电子束可见光照明波长加速电压80kV时,波长为0.0042m其中紫色光波长400m分辨率0.2am0.2μm(肉眼分辨率0.2放大倍数100万倍1000倍成像透镜电磁透镜玻璃透镜照明介质1.33×10Pa以上真空度空气,玻璃、油焦距调整调整物镜电流,改变磁场强度调整焦距改变物镜与样品之间距离调焦样品50~100m超薄切片厚切片样品载体具有支持膜载网载玻片光学显微镜与电子显微镜比较58电镜技术应用的进展√电镜诞生于30年代初,但直到60年代以前,电镜在生物医学中的应用主要限于细胞生物学、微生物、实验病理学等研究领域。60年代初期人们开始将电子显微镜应用于人体病理标本,通过对这些人体病理标本的超微结构分析,进一步了解了疾病的病理变化及其发生机制,为某些疾病的诊断提供重要的形态依据√电子显微镜在肾活检诊断、疑难肿瘤的病理诊断、感染性疾病(病毒性,细菌性等)、代谢性疾病(贮积性疾病)、细胞外物质沉积性疾病(如淀粉样变性)、组织细胞增生症(郎格罕细胞增生性疾病)、纤毛不能运动综合征等特殊病的诊断中公认起着重要的作用。电镜技术应用的进展59电子显微镜在医学中的应用诊断电镜学基础医学研究·肿瘤诊断超微结构学病毒诊断超微病理学肾活检电镜细胞活血心肌活检免疫电镜肝活检定性定量研究肌肉活检·遗传性疾病交叉学科(医工结合)研究纳米医药新技术电子显微镜在医学中的应用60电镜的分类透射电铮(超高压电子显微镜、高压电子显微镜、高分镜、普及型电子显微镜、简易型电子显微镜)电子束透过样品(透射电子)直接放大成像内部结构2(扫描电镜)电子束以扫描形式轰声在样品上,产生一次面超微结构订后再将二次电子等信息收集起来放大成像3.分析电子显微镜:将X射线和显微分析仪与扫描电镜或透射电镜相连,常见的是能谱仪和波谱仪。★免疫电镜:是免疫组织化学与透身电镜相结合的方法。电镜的分类61透射电子显微镜(TEM,TransmissionElectronMicroscope△TEM是以电子束为照高压电子枪明源,电子束穿透样品,在穿过样品时电高速电子束子束被标上了样品的信息,经多级放大后电磁透镜在荧光屏上成像的大型仪器。产生的图像样品是平面的,它要求样品极薄,因此样品必电子束发生投射须备成50-70nm的超薄切片荧光屏电能转变成光能TEM成像原理→浓淡不同的图像图像各处浓淡的不同真实反映了样品不同部位的物质结构透射电子显微镜62扫描电子显微镜(SEM,ScanningElectronMicroscope△SEM是利用电子束在样品表面扫电子枪描激发出来代表样品表面特征的电子束光点的亮度一所发出的次银电子数要用来作微形貌扫描量观察、显微成分电磁透镜次级电子信号分析。分辨率可接受达到1nm,放大倍样品表面探测器转变成光子数可达5×105倍放大、光电倍增管转换威电压信号SEM成像原理→显象管荧光屏扫描电子显微镜63TEM样品制备取材固定(戊二醛和锇酸)脱水SEM样品制备·浸透、包埋超薄切片取材、固定、干燥和喷金染色(枸橼酸铅和醋酸铀)·不需要经过超薄切片TEM样品制备64肾脏病电子显微镜检查课件整理65肾脏病电子显微镜检查课件整理66肾脏病电子显微镜检查课件整理67肾脏病电子显微镜检查课件整理68肾脏病电子显微镜检查课件整理69肾脏病电子显微镜检查课件整理70肾脏病电子显微镜检查课件整理71肾脏病电子显微镜检查课件整理72肾脏病电子显微镜检查课件整理73肾脏病电子显微镜检查课件整理74肾脏病电子显微镜检查课件整理75肾脏病电子显微镜检查课件整理76肾脏病电子显微镜检查课件整理77肾脏病电子显微镜检查课件整理78肾脏病电子显微镜检查课件整理79肾脏病电子显微镜检查课件整理80肾脏病电子显微镜检查课件整理81肾脏病电子显微镜检查课件整理82肾脏病电子显微镜检查课件整理83肾脏病电子显微镜检查课件整理84肾脏病电子显微镜检查课件整理85肾脏病电子显微镜检查课件整理86肾脏病电子显微镜检查课件整理87肾脏病电子显微镜检查课件整理88肾脏病电子显微镜检查课件整理89肾脏病电子显微镜检查课件整理90肾脏病电子显微镜检查课件整理91肾脏病电子显微镜检查课件整理92肾脏病电子显微镜检查课件整理93肾脏病电子显微镜检查课件整理94肾