动物实验基本操作

动实基操一固、别定标）【实目】在做动物试验时，为确保给药、实验顺利进行，防止被动物咬伤、准确辨动物性别准确标识动物要学会用正确方法捉拿实验动物握辨别动物性别的方法以及掌握标识动物的方法。【实对】SD大鼠KM小鼠雌雄各半，体重180-250g。【实器和品器材：鼠笼、大小鼠固定器、方木板、美式图钉、细绳、防护手套药品：苦味酸80%~90%酒精饱和溶液20%拉坦【实步】一小的拿徒固：用右手提起尾巴中部，在鼠笼盖或其他粗糙面上。向后上方轻拉，此时，小鼠前肢紧紧抓住粗糙表面拇指和食指迅速捏住小鼠颈背部皮肤小鼠于左手心，并以左手掌心和中指夹住小鼠背部皮肤名指压住小鼠尾根部将其固定于手中右手可行注射或其它操作。固器定静注射或给药时小放进固定器中或者大小和量适当的容如烧杯露出尾巴，该类容器够压住尾部，避免其活动。勿固定过紧造成窒息死亡。进行腹腔手术或心脏采血时先准备一个15-20cm的木板边钉入五颗钉子将小鼠四肢分别用20-30cm的绳捆绑的另一头分别绑在方木板的钉子上且在头部上颚切齿牵引一根线绳，也固定在钉子上，达到完全固定。二大的拿4-5周内大鼠，方法同小鼠。龄较大的，则1首先戴好防护手套。、用右手拇指和食指抓住大鼠尾巴中部将大鼠提起，放在大鼠饲养盒的面罩上3、手顺势按、卡在大鼠躯干背部，稍加压力向头颈部滑行4、以左手拇指和食指捏住大鼠两耳后部的头颈皮肤，其余三指和手掌握住大鼠背部皮肤，完成抓取保定。三性判小鼠、大鼠性别判定幼鼠外殖器与肛门间隔短的♀，外生殖器与肛门间隔长的是♂。成年动物可直接肉眼辨认，雄性有膨起的阴囊和阴茎，雌性动物有阴道口。四动的记小鼠的短期标记法：苦酸80%~90%精饱和溶液（黄色出于自己的编号【注事】实验人员要有精神准备：掌握方法，胆大心细，做好防护。动物兴奋的时候不要抓取，待其安静下来。根据受试动物的给药部位或采血方法的不同，事先选择徒手固定还是固定器固定。固定时把握好力度，过分用力会使小鼠颈椎脱臼或窒息死亡，若用力过轻头部能反转过来咬伤实验者的手。【思考题】1.在定实验动物时如何才能快准、稳？动实基操二给途、血【实目】在做动物试验时，为确保给药、采血实验顺利进行，要掌握根据不同的情进行动物给药以及采血的正确方法。【实对】SD大鼠180-250g小18-22g雄半。【实器和品器材：鼠笼、大小鼠固定器、方木板、长钉、细绳、防护手胃，注射器1ml,5ml棉球，剪毛剪、手术剪、手术刀、采血管、弯头镊子药品：生理盐水75％酒精棉球，一次性采血管，一次性EP管【实步】一给途、大小的胃用左手固定鼠手持灌胃器安好灌胃针并已吸好药)灌胃针从鼠的嘴角插入口腔，压迫鼠的头部口腔和食管成一直线轻转动针头刺激鼠的吞咽将胃针沿咽后壁慢慢插入食管，如果动物挣扎厉害，退出灌胃针，待动物安静下来，重新插入。灌胃针前端达到膈肌水平即可慢推灌药液，如很通畅，则说明已进入胃内。如不通畅，且动物挣扎厉害，须拔出重新操作。皮注左手拇指和食指轻轻提起动物皮肤，右手持注射器注针刺入皮下针头容易摆动则证明针头已在皮下送药液缓慢拔出注射针稍微用手指压片刻针刺部位，以防药物外漏。肌注选用肌肉发达，无大血管经过的部位，如臀部或股部肉注比皮下和腹腔注射用得较少当给动物注射不溶于水而混悬于油或其他溶剂中的药物时采肌肉注射）腹注、左手抓取并固定好动物，将腹部朝上B、右手持注射器将针在下腹部腹白线稍左或偏右的位置，从下腹部朝头方向几乎平行地刺入皮下，进针3-5mm。C、再使针头与皮肤呈45°角斜穿过腹，当针尖穿过腹肌进入腹腔时，有落空感，然后固定针头，保持针尖不动，回抽，无回血，无肠液、尿液，便可缓缓推入药液。静注（静注）A、大、小鼠尾静脉共有(左、中、)，一般常选用两侧的静脉。注射前，先把动物固定在暴露尾部的鼠尾固定器可用烧杯、铁丝罩或粗试管等物代替.B、拔去尾部静脉走向毛，用75酒精棉球反复擦拭鼠尾，以达到消毒、血管扩张及软化表皮角质的目的C、量从静脉的远心端刺入血管一血，将药液缓慢注入。D、注射完毕，用棉球压住针眼拔去针头，继续压迫数分钟。二采心采将动物仰卧固定在鼠板上，剪去胸前区部位的被毛，消毒。在侧第3-4肋间用手食指摸到心搏处右持注射器选择心搏最强处穿刺。当针穿刺入心脏时，血液由于心脏搏动的力量自动进入注射器需保留动物存活时麻后切开动物胸膛，直接用注射器刺入心脏内采血，也可剪破心脏直接用注射器或吸管吸血。摘球血用手抓住动物颈部皮肤，并将动物轻压在实验台上，稍微侧卧，左手拇指尽量将动物眼周围皮肤往眼后压动物眼球突出并充血用弯头镊子迅速摘除眼球眼眶内很快流出血液。眶脉（）血将物麻醉，采用侧眼向固定体位，用左手拇指和食指从背部较紧地握住大（小）鼠颈部。取血时，左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧，是头部静脉血液回流困难，眼球充分外突，眶静脉丛充血。【注事】掌握方法，胆大心细，做好防护。常用灌胃量：小鼠：～1ml,大～4ml摘取眼球采血法一般可取约为小鼠体重4-5%血液量。【考】1.如熟练掌握大小鼠的给药途和采血方法？动物实验基本操作三安乐）【实目】在科学应用和教学实验中，因实验终结、研究所需提供血液或其他组织脏、不适合繁殖或者是当动物的疼痛与窘迫程度超过预期等情况下，需要我们以人道的方式使动物死亡动物在最低程度的疼痛恐惧并在最短的时间内失去知觉和痛觉。【实对】KM小鼠雌雄各半，体重。【实器和品器材：鼠笼、大小鼠固定器、注射器1ml球，剪毛剪、手术剪、手术刀、采血管、弯头镊子、烧杯100ml、木板药品：吸入性麻醉剂、注射型麻醉剂75酒精棉球【验骤、颈椎臼用指和食指用力往下按住鼠头，另一只手抓住鼠尾（鼠尾根部往后上方一拉，使颈椎脱臼，造成脊髓与脑髓断离，动物立即死亡。放法麻动物后，将动物股、颈动、静脉全切断，血液立即喷出；用一块湿纱布不断擦去股动脉切周围处的血液和血凝块时不断的用自来水冲洗流血股脉切口处保持畅通，动物3～5分内即可致死。药致法药吸药吸入是将有毒气体或挥发性麻醉剂，被动物经呼吸道吸入体而致死，将小鼠入含有乙醚的密封烧杯中3-5分后可死亡药注将物（腹腔注射硫酸镁）通过注射的方式注入动物体内，使动死亡【意项1、实验人员要有精神准备：掌方法，胆大心细，做好防护、克服心理紧张等因素【考】1.安死的意义是什么？实二

家的管动插实目学习捉拿家兔的正确方法和固定。掌握常用手术器械的正确使用方法。学习动物实验的基本作技术包括麻醉、口与止、气管插管、颈动脉插管术实对健康家兔,雄均可,体～实内家兔的捉拿、麻醉与固定颈总动脉、神经等的分离技术气管插管动脉插管器与品器：兔手术台、哺乳类动物手术器械一套、三通、动脉夹、动脉插管、气管插管、纱布、棉线、注射器、绑腿带、污物杯。20%氨甲酸乙酯溶液(乌拉坦，4-5ml/kg体重，麻醉用)步和法一家的拿称、兔捉：右抓住家兔颈背部皮肤，轻轻将家兔提起，迅速以左手托住其臀部，使家兔体重主要落左掌心上，以免损伤动物颈部。注点家兔般不咬人但脚爪锐，在扎易抓伤捉者，所捕捉要特别意其四肢。、兔称：将兔放在婴儿秤上，待家兔安静的时候观察体重并记录。注点调零切勿使劲按压称面二家的醉1、醉药的注射如图1：助手的一侧上肢弯曲与侧的躯夹住家兔的半部位同时该侧的托住家兔的腹部，另一只向上抓家兔的背部，充分露耳背缘耳缘静脉实验者的左食指、中指轻夹耳根使静脉盈，从远心以℃角度进针刺入脉后顺血管平行方向深入1cm，手拇指、食指在刺入部位将针头与兔耳固定，即可注入麻醉药。2、醉效果判定：可以通过观动物呼吸平稳深慢、角膜反射迟钝或消失、肢体肌肉松弛、皮肤夹捏反射消失四方面来判定是否达到理想的麻醉效果三家的管动插仰固：头用一根粗棉线拉住兔的两门齿后栓在兔板的铁柱或固定钩上。两前肢平直放在胸部两侧,用粗绳一端腕关节以上部,缚绳从背后左右交叉穿过,压在对侧前肢的前臂上,再紧扎于兔板两侧的木钩上,两后肢左右分开,缚扎踝关节以上部,一端分别固定于兔板后两侧的木钩上，如下图2。气插操要1）手术刀时，先用手或器械两侧组织牵拉紧张情况下，以刀刃作垂直的轻巧的切开，不要作刮削的动作。2）管插管术操作要点（）：颈部正中切开皮肤，钝性分离暴露气管、穿线备用。于气管中段第三或第四软骨环上向头端作一纵向倒“”切口。将气管导管由切口向胸部方向插入气管腔内。在气管软骨环之间进行结扎，并将棉线固定于插管分叉处。、脉管作点于气管一侧小心分离颈总动脉约3cm穿线备用。远心端结扎、近心端用动脉夹夹紧。用眼科剪与血管呈45℃的度远心端开始在向心一侧剪开管壁的。④插管前导管和压力换能器的肝素化。⑤插管后结扎固定。注事麻醉动物时,注射度先快后慢,边注射边观察动物麻醉指征。如醉过浅,动物挣扎时可适量追加麻醉药,切忌麻醉过深引起家兔死亡；手术过程中操作应轻柔,尽避免不必要的损伤和出血；手术时,切颈部皮肤后,尽钝性分离,以损伤血管；气管插管前，应注意止血，并将气管分泌物清理干净；动脉导管的插入端要光滑，不能过尖，以防刺破动脉壁，引起大出血。未扎紧动脉插管前不要松动动脉夹。实验三、验性肺水肿【实验原理与目的水肿是临床上常见的危重症之一水肿是指过多的液体积聚在肺间质或溢入肺泡腔内的病理状态肺毛细血管流体静脉压增高血浆胶体渗透压降低肺微细管壁通透性增高淋巴回流障碍等因素的某个或多个同时或相继作用般水肿液先在组织间隙中积聚，形成间质性肺水肿，然后发展为肺泡性肺水肿肿生后可起气体弥散障碍以及肺泡通气与血流比例失调（如果气道内存在水肿液，还会引起通气障碍最终导致呼吸功能不全大量上腺素可引起机体血液重新分布周管广泛收缩血液由体循环急速转移到肺循环左房压力和肺毛细血管有效滤过压增高体入肺间质增多而出现肺水肿。本实验的目的是用大剂量肾上腺素复制肺水肿模型急性肺水肿的表现发机理。【实验对象大鼠，雌雄不限，体重180-250g【实验器材和药品】器材：弹簧磅秤，电子天平，手术器械套2ml,5ml注射器，听诊器1具，滤纸。药品：生理盐水盐酸肾上腺素注射液氨基甲酸乙酯溶液(乌拉坦体，麻醉用)。【实验步骤和观察指标】取180-250g左体重相近的大鼠两只，做好标记（甲鼠乙鼠，观察动物的一般情况、呼吸和肤色。甲鼠腹腔注盐酸肾上腺素注射2ml；乙鼠腹腔注射同体积生理水。观察动物变化如活动情况吸色做肺部听诊肺呼吸音意口鼻有无泡沫液体流出动物死亡，记录时间；若注射药物后物未死亡，可按%戊巴比妥钠溶液1ml/100g腹注射