y第十二章1马铃薯的组织培养教学课件

y第十二章1马铃薯的组织培养幻灯片PPT本课件PPT仅供大家学习使用学习完请自行删除，谢谢！本课件PPT仅供大家学习使用学习完请自行删除，谢谢！本课件PPT仅供大家学习使用学习完请自行删除，谢谢！本课件PPT仅供大家学习使用学习完请自行删除，谢谢！y第十二章1马铃薯的组织培养幻灯片PPT本课件PPT1本章内容提要与要求:

★掌握马铃薯的生物学习性

★掌握马铃薯脱毒培养的大致过程

★了解马铃薯脱毒苗的鉴定方法

★熟悉微型薯的生产过程本章内容提要与要求:2一、马铃薯生物学特性1、形态特性根：根系由出生根和匍匐根两局部组成。茎：地上局部茎和地下茎，地下茎分匍匐茎和块茎。叶：初生叶，全缘，心形；后期叶奇数、羽状全裂单叶花：单生，为聚伞花序果实：为球形或椭圆形浆果。种子：小，扁平肾形；可用来繁殖，但后代性状别离大。一、马铃薯生物学特性3y第十二章1马铃薯的组织培养教学课件42、生物学习性★原产于拉丁美洲，为全球性的重要经济作物之一，适应性广，营养价值高，耐贮藏适运输。★马铃薯性喜冷气候，不耐高温和霜冻，解除休眠的块茎4℃下发芽，发芽适温为12～18℃。★块茎形成要求昼温14~24℃，夜温12～14℃，土温16～18℃。★结薯期要求12h左右的短日照和疏松、湿润、肥沃以及通气良好的土壤条件。2、生物学习性5现象与问题：★马铃薯生产中普遍存在有种性退化问题，表现为植株长势衰弱，株形矮化，分枝变少，薯块变小，产量逐降低，造成品种退化。★经检测证明这是由于病毒引起的退化现象。★危害马铃薯的病毒有17种之多，如X病毒、S病毒、Y病毒、M病毒、A病毒、花叶病毒、纺锤形块茎病毒等。★由于多年的无性繁殖，病毒逐代积累，日益严重，引起严重退化。马铃薯病毒可使块茎产量减少50%~80%。现象与问题：6

解决方法：法国Morel和他的同事们，1955年从患病马铃薯植株中选取到了无病植株——马铃薯脱毒技术，为治疗作物病毒开辟了新途径。解决方法：7二、马铃薯脱毒技术★马铃薯在营养繁殖时易受病毒的浸染，当条件适合时，病毒就会在植株内增殖，转运和积累，随着世代传递，病毒危害逐年加重。★通过微茎尖组织培养技术能从马铃薯体内脱除PLRV、PVY、PVA、PAF、PVG、PVM、PSW等病毒，得到一定良种繁殖体系，生产优质种薯，是保证马铃薯高产、稳产的一项有效措施——马铃薯脱毒技术。★我国已有许多科研、推广单位开展了研究生产，已形成了脱毒草种薯生产体系。二、马铃薯脱毒技术81.马铃薯脱毒技术市场前景:★我国单产为13.60吨/公顷，是世界单产的1/4。最主要因素是种薯差，品种布局不合理。★全国现有播种面积300多万公顷，且有逐步增加趋势，年需合格种薯45亿公斤，脱毒原种4亿公斤，脱毒小薯或微型薯45亿粒。因此，脱毒马铃薯推广具有广阔的市场前景。★采用脱毒快繁技术，种用脱毒种薯，一般可增产30-50%，甚至成倍增产，提高马铃薯生产能力。如果我国现有马铃薯播种面积的1/3用脱毒种薯，就可年增产粮食100多亿公斤。1.马铃薯脱毒技术市场前景:92.脱毒种薯生产程序：★采用微茎尖组织培养的方法，诱导出苗，采用联免疫吸附试验法或指示植物方法鉴定马铃薯病毒和类病毒，经鉴定后，无主要病毒及类病毒的试管苗可定为脱毒试管根底苗。★试管苗采用固体、液体培养基相结合的方法，进展扩繁根底苗，在防虫网室栽植或封闭温室扦插，生产出原原种〔或称脱毒小薯〕。用原原种在一定隔离条件下产生原种1代，以后逐级称为原种2代、良种1代、良种2代。2.脱毒种薯生产程序：★试管苗采用固体、液体培养基相结合的103．茎尖培养脱毒〔1〕初代培养★预处理：多采用在室内发芽，芽经热处理〔38℃〕2周。★外表消毒：取顶芽或侧芽茎尖〔1cm〕自来水下冲洗70％的酒精浸润〔15-20s〕2％次氯酸钠溶液浸泡〔4～5min〕无菌水冲洗3次。3．茎尖培养脱毒〔1〕初代培养11★接种：把消毒好的芽放在解剖镜下仔细剥离，逐层剥去幼叶，露出圆滑的生长点，可以留1-2个叶原基，0.2—0.3毫米，随即接种于培养基中。★培养基：MS＋NAA0.1＋GA30.2＋BA0.5＋2%蔗糖〔液体，pH5.8〕★培养条件：21～25℃、2000～3000lx、12h/d。★

生长情况:2～3周愈伤，4-5周绿点，3～6月长成2～3厘米小芽，越慢越好，出芽很快的扔掉。★接种：把消毒好的芽放在解剖镜下仔细剥离，逐层剥去幼叶，露12〔2〕继代和生根★培养成功的马铃薯脱毒苗，经ELISA〔试剂盒〕鉴定后〔检测:1次/3月，4次/年〕鉴定后，采用固体、液体培养基相结合方法扩繁。★取试管苗单节切段扦插在〔或平放〕固体培养基上培养，长成5～10cm高，继续切段繁殖，每月可繁殖5～8倍；试管苗也可采用浅层静止液体培养。★培养基：MS+NAA0.2～0.5+D-泛酸钙10+3%蔗糖★培养条件：20-25度，3000-4000LX，14-16小时光照，每3周继代一次，单芽茎段约1厘米，可插也可平放，原那么试管苗用2年—3年。〔2〕继代和生根★培养基：MS+NAA0.2～0.513y第十二章1马铃薯的组织培养教学课件14(3)驯化与移栽★为增强试管苗对温室内环境条件的适应能力，移植前对试管苗要进展光、温锻炼。★炼苗期温度：白天23~27℃，夜间不低于14℃。★方法：移植前7d左右，将长有3~5片叶、高2~3cm的试管苗，在不开瓶口的状态下，从培养室移至温室排好。★为防止强光、高温灼伤试管苗，在温室顶上加盖一层黑色遮阳网。(3)驯化与移栽154、微型薯生产★网室内，铺6厘米蛭石，3%撒可富稀释一倍，喷潮湿即可。插前浇水湿润，插后浇透。覆膜一周〔但不要压紧〕，湿度80%以上，期间喷水2次。★揭膜后喷营养液撒可富3%，喷水冲洗〔每周2次〕，每周喷一次0.5%硫酸铜〔叶面〕，中后期喷药防病，防早疫、晚疫病，连续喷2-3-4次。喷辛硫磷防害虫。★苗高6—8厘米培蛭石防绿薯，1-2厘米厚，约35-40天出现气生薯，不断盖蛭石。4、微型薯生产16微型薯微型薯17四、马铃薯无病毒苗的鉴定材料1、指示植物鉴定在马铃薯的病毒鉴定中，汁液鉴定是最常用的方法，Ｘ病毒、Ｓ病毒和纺锤块状病毒很容易通过汁液来接种。2、鉴定寄主的准备马铃薯常用的鉴定寄主植物有苋科的千日红，茄科的洋酸浆、毛曼佗罗等。寄主植物应在无虫网室中培养。四、马铃薯无病毒苗的鉴定材料18３、接种液制备及接种叶片洗净研钵中研成糊状用纱布滤出汁液蒸馏水稀释１０倍（混入金刚砂接种物）蘸取接种液均匀在寄主叶背面擦过（不成伤痕）清水冲洗多余接种物放置在防虫室内５～１０天可发病。３、接种液制备及接种19五、无病毒株的繁殖通过茎尖培养只能得到很少的无病毒植株，而生产上需要数以万计的安康种薯。同时无病毒植株并没有对该病毒获得免疫能力，仍会在繁殖中再次侵染。如何防止病毒再侵染，有主要几种方法：〔１〕直接块茎繁殖〔２〕扦插繁殖〔３〕组织培养切段繁殖A：继代培养B：低温保存五、无病毒株的繁殖〔１〕直接块茎繁殖20复习思考题1、对马铃薯脱毒苗的培养大致分几个阶段？各阶段是怎样操作的？2、马铃薯的生物学习性有哪些？复习思考题21y第十二章1马铃薯的组织培养幻灯片PPT本课件PPT仅供大家学习使用学习完请自行删除，谢谢！本课件PPT仅供大家学习使用学习完请自行删除，谢谢！本课件PPT仅供大家学习使用学习完请自行删除，谢谢！本课件PPT仅供大家学习使用学习完请自行删除，谢谢！y第十二章1马铃薯的组织培养幻灯片PPT本课件PPT22本章内容提要与要求:

★掌握马铃薯的生物学习性

★掌握马铃薯脱毒培养的大致过程

★了解马铃薯脱毒苗的鉴定方法

★熟悉微型薯的生产过程本章内容提要与要求:23一、马铃薯生物学特性1、形态特性根：根系由出生根和匍匐根两局部组成。茎：地上局部茎和地下茎，地下茎分匍匐茎和块茎。叶：初生叶，全缘，心形；后期叶奇数、羽状全裂单叶花：单生，为聚伞花序果实：为球形或椭圆形浆果。种子：小，扁平肾形；可用来繁殖，但后代性状别离大。一、马铃薯生物学特性24y第十二章1马铃薯的组织培养教学课件252、生物学习性★原产于拉丁美洲，为全球性的重要经济作物之一，适应性广，营养价值高，耐贮藏适运输。★马铃薯性喜冷气候，不耐高温和霜冻，解除休眠的块茎4℃下发芽，发芽适温为12～18℃。★块茎形成要求昼温14~24℃，夜温12～14℃，土温16～18℃。★结薯期要求12h左右的短日照和疏松、湿润、肥沃以及通气良好的土壤条件。2、生物学习性26现象与问题：★马铃薯生产中普遍存在有种性退化问题，表现为植株长势衰弱，株形矮化，分枝变少，薯块变小，产量逐降低，造成品种退化。★经检测证明这是由于病毒引起的退化现象。★危害马铃薯的病毒有17种之多，如X病毒、S病毒、Y病毒、M病毒、A病毒、花叶病毒、纺锤形块茎病毒等。★由于多年的无性繁殖，病毒逐代积累，日益严重，引起严重退化。马铃薯病毒可使块茎产量减少50%~80%。现象与问题：27

解决方法：法国Morel和他的同事们，1955年从患病马铃薯植株中选取到了无病植株——马铃薯脱毒技术，为治疗作物病毒开辟了新途径。解决方法：28二、马铃薯脱毒技术★马铃薯在营养繁殖时易受病毒的浸染，当条件适合时，病毒就会在植株内增殖，转运和积累，随着世代传递，病毒危害逐年加重。★通过微茎尖组织培养技术能从马铃薯体内脱除PLRV、PVY、PVA、PAF、PVG、PVM、PSW等病毒，得到一定良种繁殖体系，生产优质种薯，是保证马铃薯高产、稳产的一项有效措施——马铃薯脱毒技术。★我国已有许多科研、推广单位开展了研究生产，已形成了脱毒草种薯生产体系。二、马铃薯脱毒技术291.马铃薯脱毒技术市场前景:★我国单产为13.60吨/公顷，是世界单产的1/4。最主要因素是种薯差，品种布局不合理。★全国现有播种面积300多万公顷，且有逐步增加趋势，年需合格种薯45亿公斤，脱毒原种4亿公斤，脱毒小薯或微型薯45亿粒。因此，脱毒马铃薯推广具有广阔的市场前景。★采用脱毒快繁技术，种用脱毒种薯，一般可增产30-50%，甚至成倍增产，提高马铃薯生产能力。如果我国现有马铃薯播种面积的1/3用脱毒种薯，就可年增产粮食100多亿公斤。1.马铃薯脱毒技术市场前景:302.脱毒种薯生产程序：★采用微茎尖组织培养的方法，诱导出苗，采用联免疫吸附试验法或指示植物方法鉴定马铃薯病毒和类病毒，经鉴定后，无主要病毒及类病毒的试管苗可定为脱毒试管根底苗。★试管苗采用固体、液体培养基相结合的方法，进展扩繁根底苗，在防虫网室栽植或封闭温室扦插，生产出原原种〔或称脱毒小薯〕。用原原种在一定隔离条件下产生原种1代，以后逐级称为原种2代、良种1代、良种2代。2.脱毒种薯生产程序：★试管苗采用固体、液体培养基相结合的313．茎尖培养脱毒〔1〕初代培养★预处理：多采用在室内发芽，芽经热处理〔38℃〕2周。★外表消毒：取顶芽或侧芽茎尖〔1cm〕自来水下冲洗70％的酒精浸润〔15-20s〕2％次氯酸钠溶液浸泡〔4～5min〕无菌水冲洗3次。3．茎尖培养脱毒〔1〕初代培养32★接种：把消毒好的芽放在解剖镜下仔细剥离，逐层剥去幼叶，露出圆滑的生长点，可以留1-2个叶原基，0.2—0.3毫米，随即接种于培养基中。★培养基：MS＋NAA0.1＋GA30.2＋BA0.5＋2%蔗糖〔液体，pH5.8〕★培养条件：21～25℃、2000～3000lx、12h/d。★

生长情况:2～3周愈伤，4-5周绿点，3～6月长成2～3厘米小芽，越慢越好，出芽很快的扔掉。★接种：把消毒好的芽放在解剖镜下仔细剥离，逐层剥去幼叶，露33〔2〕继代和生根★培养成功的马铃薯脱毒苗，经ELISA〔试剂盒〕鉴定后〔检测:1次/3月，4次/年〕鉴定后，采用固体、液体培养基相结合方法扩繁。★取试管苗单节切段扦插在〔或平放〕固体培养基上培养，长成5～10cm高，继续切段繁殖，每月可繁殖5～8倍；试管苗也可采用浅层静止液体培养。★培养基：MS+NAA0.2～0.5+D-泛酸钙10+3%蔗糖★培养条件：20-25度，3000-4000LX，14-16小时光照，每3周继代一次，单芽茎段约1厘米，可插也可平放，原那么试管苗用2年—3年。〔2〕继代和生根★培养基：MS+NAA0.2～0.534y第十二章1马铃薯的组织培养教学课件35(3)驯化与移栽★为增强试管苗对温室内环境条件的适应能力，移植前对试管苗要进展光、温锻炼。★炼苗期温度：白天23~27℃，夜间不低于14℃。★方法：移植前7d左右，将长有3~5片叶、高2~3cm的试管苗，在不开瓶口的状态下，从培养室移至温室排好。★为防止强光、高温灼伤试管苗，在温室顶上加盖一层黑色遮阳网。(3)驯化与移栽364、微型薯生产★网室内，铺6厘米蛭石，3%撒可富稀释一倍，喷潮湿即可。插前浇水湿润，插后浇透。覆膜一周〔但不要压紧〕，湿度80%以上，期间喷水2次。★揭膜后喷营养液撒可富3%，喷水冲洗〔每周2次〕，每周喷一次0.5%硫酸铜〔叶面〕，中后期喷药防