7、项目六 拓展案例.中职课件电子教案

项目六拓展案例试样的采集与制备项目六拓展案例学习引导船舶机舱舱底水、生活污水采样PM2.5的采集和测定口岸检测样品的采集和运送拓展案例供微生物检测的样品采集与保存任务目标理解PM2.5的定义、来源、成份、危害；熟悉PM2.5采样的设备和采样时的注意事项；学习PM2.5的测定方法。任务一PM2.5的采集和测定任务一PM2.5的采集和测定一、PM2.5是什么？PM是英文particulatematter（颗粒物）的首字母缩写。PM2.5是对空气中直径小于或等于2.5微米的固体颗粒或液滴的总称。这些颗粒如此细小，肉眼是看不到的，它们可以在空气中漂浮数天。人类纤细的头发直径大约是70微米，这就比最大的PM2.5还大了近三十倍。任务一PM2.5的采集和测定二、PM2.5来自哪里，都有些什么成分？PM2.5来源自然来源人为排放风扬尘土、火山灰、森林火灾、漂浮的海盐、花粉、真菌孢子、细菌。直接排放主要来自燃烧过程，比如化石燃料（煤、汽油、柴油）的燃烧、生物质（秸秆、木柴）的燃烧、垃圾焚烧。在空气中转化成PM2.5的气体污染物主要有二氧化硫、氮氧化物、氨气、挥发性有机物。任务一PM2.5的采集和测定二、PM2.5来自哪里，都有些什么成分？PM2.5成份常见成分各种金属元素，既有钠、镁、钙、铝、铁等地壳中含量丰富的元素，也有铅、锌、砷、镉、铜等主要源自人类污染的重金属元素。主要成分元素碳、有机碳化合物、硫酸盐、硝酸盐、铵盐。任务一PM2.5的采集和测定三、PM2.5的采集和测定1.PM2.5的采样设备任务一PM2.5的采集和测定三、PM2.5的采集和测定1.PM2.5的采样设备图6-1PM2.5大流量颗粒物采样器任务一PM2.5的采集和测定三、PM2.5的采集和测定将PM2.5分离出来的切割器又是怎么工作的呢？在抽气泵的作用下，空气以一定的流速流过切割器时，那些较大的颗粒因为惯性大，一头撞在涂了油的部件上而被截留，惯性较小的PM2.5则能绝大部分随着空气顺利通过。对于PM2.5的切割器来说，2.5微米是一个踩在边线上的尺寸。直径恰好为2.5微米的颗粒有50%的概率能通过切割器。大于2.5微米的颗粒并非全被截留，而小于2.5微米的颗粒也不是全都能通过。注意事项采样时，采样器入口距地面高度不得低于1.5m。采样不宜在风速大于8m/s等天气条件下进行。采样点应避开污染源及障碍物，如果测定交通枢纽处PM2.5，采样点应布置在距人行道边缘外侧1m处。采用间断采用方式测定日平均浓度时，其次数不应少于4次，累积采样时间不少于18h。任务一PM2.5的采集和测定三、PM2.5的采集和测定2.PM2.5的测定PM2.5测定方法有三种：重量法、β射线吸收法和微量振荡天平法。重量法采样时，将已称重的滤膜用镊子放入洁净采样夹内的滤网上，滤膜毛面应朝进气方向。将滤膜牢固压紧至不漏气。如果测定任何一次浓度，每次需要更换滤膜，如测日平均浓度，样品可采集在一张滤膜上。采样结束用镊子取出，将有尘面两次对折放入样品盒或纸袋，并做好记录。然后用天平称重，这就是重量法。β射线吸收法β射线吸收法：将PM2.5收集到滤纸上，然后照射一束beta射线，射线穿过滤纸和颗粒物时由于被散射而衰减，衰减的程度和PM2.5的重量成正比。根据射线的衰减就可以计算出PM2.5的重量。任务一PM2.5的采集和测定三、PM2.5的采集和测定2.PM2.5的测定PM2.5测定方法有三种：重量法、β射线吸收法和微量振荡天平法。微量振荡天平法微量振荡天平法：一头粗一头细的空心玻璃管，粗头固定，细头装有滤芯。空气从粗头进，细头出，PM2.5就被截留在滤芯上。在电场的作用下，细头以一定频率振荡，该频率和细头重量的平方根成反比。于是，根据振荡频率的变化，就可以算出收集到的PM2.5的重量。任务一PM2.5的采集和测定四、PM2.5对健康有什么危害？PM2.5主要对呼吸系统和心血管系统造成伤害，包括呼吸道受刺激、咳嗽、呼吸困难、降低肺功能、加重哮喘、导致慢性支气管炎、心律失常、非致命性的心脏病、心肺病患者的过早死。老人、小孩以及心肺疾病患者是PM2.5污染的敏感人群。虽然肉眼看不见空气中的颗粒物，但是颗粒物却能降低空气的能见度，使蓝天消失，天空变成灰蒙蒙的一片，这种天气就是灰霾天。PM2.5是灰霾天能见度降低的主要原因。值得一提的是，灰霾天是颗粒物污染导致的，而雾天则是自然的天气现象，和人为污染没有必然联系。两者的主要区别在于空气湿度，通常在湿度大于90%时称之为雾，而湿度小于80%时称之为霾，湿度在80-90%之间则为雾霾的混合体。讨论与交流

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2中国的PM2.5标准和其他国家相比远吗？PM10是什么，灰霾天是PM2.5引起的吗？

3我们更需要关注的是离我们生活、工作最近的监测点的数据。这个数据哪里有呢？请关注你在的城区实时PM2.5数据和年平均值。

任务二

口岸检测样品的采集和运送一、口岸样品采集的目的和作用二、口岸样品采集方案三、口岸样品采样器具的配置四、口岸采集的样品和方法任务目标了解口岸样品采集的目的、作用；熟悉口岸样品采集方案，其中样品采集和处置的生物安全，样品采集的时效性、代表性、针对性，样品采集时间和种类；学习口岸采样器具的配置、采集的样品和方法、采集后的合理处置。任务二

口岸检测样品的采集和运送任务二

口岸检测样品的采集和运送样品运输样品保存现场采样执法有效性技术验证口岸样品现场卫生检疫查验安全操作安全防护任务二

口岸检测样品的采集和运送一、口岸样品采集的目的和作用任务二

口岸检测样品的采集和运送二、口岸样品采集方案（一）制定详细样品采集计划任务二

口岸检测样品的采集和运送二、口岸样品采集方案（一）制定详细样品采集计划表6-1根据检测目的拟选择的样品种类检测目的样品选择检测抗体血液、呼吸道分泌物、唾液、脑脊液、可疑物等检测抗原血液、呼吸道分泌物、唾液、脑脊液、粪便、组织、可疑物等分离病原血液、各种拭子标本、含漱液、粪便、尿液、脑脊液、疱疹液、空气采样标本、各种卫生评价样品等检测核酸血液、粪便、尿液等各种分离病毒用标本任务二

口岸检测样品的采集和运送二、口岸样品采集方案（一）制定详细样品采集计划表6-2根据临床症状拟选择的样品种类临床症状样品选择发热、呼吸道症状鼻咽拭子、含漱液、痰、双份血清等高热、周身疼痛鼻咽拭子、含漱液、痰、双份血清等神经症状脑脊液、脑组织、双份血清等出血性症状血液、胸水、尿、粪便、双份血清等黄胆血液、肝组织、尿、双份血清等出疹、痘脓疱液、痂、双份血清等任务二

口岸检测样品的采集和运送二、口岸样品采集方案（二）样品采集和处置的生物安全主要是通过个人防护和废弃物品的合理处置，达到在采样中避免造成人员感染、标本和环境的污染。样品采集前充分做好的个人生物安全防护准备。包括：任务二

口岸检测样品的采集和运送二、口岸样品采集方案（二）样品采集和处置的生物安全样品采集时任务二

口岸检测样品的采集和运送二、口岸样品采集方案（二）样品采集和处置的生物安全样品采集后及时消毒处理使用过的防护用品及时消毒污染区表面和溢出物污染的废弃物品必须进行无害化消毒后废弃

污染区现场消毒养殖场现场消毒任务二

口岸检测样品的采集和运送二、口岸样品采集方案（三）样品采集的时效性在现场卫生检疫工作中，及时到达现场，及时采集到有价值的样品，是及时检验、及时诊断、及时处置的重要前提；尤其是一些应急突发公共卫生事件更应注重其时效性。有时样品采集的迅速及时比完整还要重要，如对外界标本的采集，要在消毒或处理之前；疑似病人的样品采集，要在发病初期或使用抗生药物或治疗之前采集等。任务二

口岸检测样品的采集和运送二、口岸样品采集方案（四）样品采集的代表性或针对性任务二

口岸检测样品的采集和运送二、口岸样品采集方案（五）样品采集时间和种类根据不同疾病的特点和临床表现，确定采样时间和标本种类：任务二

口岸检测样品的采集和运送二、口岸样品采集方案（六）样品采集的防污染任务二

口岸检测样品的采集和运送二、口岸样品采集方案（七）样品采集的标记样品采集后，应及时标明相关信息：样品名称、编号、采样时间、采样量、采样者、检测项目、其他可以识别或适用信息等。任务二

口岸检测样品的采集和运送二、口岸样品采集方案（八）样品采集后的合理处置和及时送检样品采集后原则上应及时送检样品运送的包装要求使用WHO三级包装系统第一层：装样品，要防渗漏。样品容器应置于带盖的容器（试管）内，容器（试管）上应有明显标记样品的编号或受检者信息。第二层：耐受性好，防渗漏，可以容纳第一层若干个容器。第一层容器与第二层包装之间放置足以吸附可能漏液的吸附材料，能防止第一层容器互相碰撞，对容器启到缓冲作用。第三层：可以容纳若干个第二层包装，防渗漏，保温、防污染，便于运输和消毒的密封容器，在外包装必须有明确的生物危害标识。任务二

口岸检测样品的采集和运送三、口岸样品采样器具的配置（八）样品采集后的合理处置和及时送检口岸卫生检疫采样包（箱）的基本配置要求和内容包括：1.采样箱是采样工具的主体；包括箱体、冰排、温控设备等。任务二

口岸检测样品的采集和运送三、口岸样品采样器具的配置（八）样品采集后的合理处置和及时送检2．采样管、采样瓶、采样袋是盛放样品的主要容器包括多种型号的样品保存管（病毒采样管、真空采血管、运送培养基等）、钢化或塑料瓶、优质包装袋等；任务二

口岸检测样品的采集和运送三、口岸样品采样器具的配置（八）样品采集后的合理处置和及时送检3．样品采集的辅助工具剪刀、镊子、止血带、试子、棉签、碘伏、酒精棉球、生理盐水、不干胶标签、记号笔、钢笔或圆珠笔、记录纸等。4．生物安全防护用品：包括一次性手套、一次性口罩、一次性帽子、一次性鞋套、工作服，隔离服，防护眼镜、免洗洗手液等。任务二

口岸检测样品的采集和运送四、口岸采集的样品和方法血液样品的采集静脉采血法毛细血管采血法呼吸道分泌物的采集咽拭子采集鼻拭子采集痰液洗漱液粪便样品的采集自然排便，对黏液脓血便应挑取黏液或脓血部分2-3g，液状粪便采集水样便或含絮状物的液状粪便2～5ml；成形粪便至少取蚕豆大小粪便1块（约5g），放于灭菌采样容器内（内有保存液或增菌液）；若无法获得粪便时，可用无菌生理盐水或保存液或增菌液湿润过的棉拭子插入肛门4～5cm深处(婴幼儿2～3cm)，轻轻转动一周擦取直肠表面的粘液后取出，放于灭菌采样容器内。可疑物品在可疑物品表面使用拭子擦拭后，将拭子保存于样品保存液中/无菌容器，适当时也可直接截取适量污染物，保存于样品保存液中/无菌容器。任务二

口岸检测样品的采集和运送四、口岸采集的样品和方法消毒效果评价样品废五金消毒效果评价样品的采集垃圾、泔水消毒效果评价样品的采集餐具消毒效果评价样品的采集航空器坐便器消毒效果评价样品的采集饮用水样品的采集采集饮用水样品时，首先应对出水管口进行必要的消毒处理，然后开启管口放水约5分钟左右，再进行样品的采集，即取中段水，采集量约为30ml，做好样品标识，送实验室检测。船舶压舱水、江河水样品的采集采用经过消毒处理过的玻璃瓶进行压舱水、江河水样品的采集。需采水样样品体积约500ml左右。采样后做好样品标识并及时送实验室检测。

病媒生物样品采集入境的花卉盆景、水果蔬菜、畜禽产品、食品饲料、粮食谷物、海鲜产品、废旧物品、动物皮毛等易携带病媒昆虫的货物，外包装等附属材料讨论与交流

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2先查阅《口岸检测样品采集、运送、交接要求手册》，通常情况下口岸采集的样品包括血液、呼吸道分泌物、粪便、病媒生物和可疑物品样品等，请分享交流各类样品采集的具体步骤及要点。简述口岸样品采集的目的、作用和原则。

3请举例说明样品采集的时效性、代表性、针对性在口岸样品采集中的具体意义和必要性。

任务三

供微生物检测的样品采集和保存一、食品微生物学检验二、公共场所公共用品用具微生物采样方法三、化妆品微生物标准检验方法任务目标任务目标理解食品微生物学检验对实验室的要求、样品采集方法和检验方法；知道公共场所公共用品用具微生物采样方法；了解化妆品微生物标准检验方法中样品的采集和注意事项。一、食品微生物学检验1．环境（一）实验室基本要求：实验室环境不应影响检验结果的准确性。实验室的工作区域应与办公室区域明显分开。实验室工作面积和总体布局应能满足从事检验工作的需要，实验室布局应采用单方向工作流程，避免交叉污染。实验室内环境的温度、湿度、照度、噪声和洁净度等应符合工作要求。一般样品检验应在洁净区域[包括超净工作台或洁净实验室]进行，洁净区域应有明显的标示。病原微生物分离鉴定工作应在二级生物安全实验室（Biosafetylevel2,BSL-2）进行。一、食品微生物学检验（一）实验室基本要求：一、食品微生物学检验2．人员检验人员应具有相应的教育、微生物专业培训经历，具备相应的资质，能够理解并正确实施检验。检验人员应掌握实验室生物检验安全操作知识和消毒知识。检验人员应在检验过程中保持个人整洁与卫生，防止人为污染样品。检验人员应在检验过程中遵守相关预防措施的规定，保证自身安全。有颜色视觉障碍的人员不能执行涉及到辨色的实验。（一）实验室基本要求：一、食品微生物学检验3．设备实验设备应满足检验工作的需要。实验设备应放置于适宜的环境条件下，便于维护、清洁、消毒与校准，并保持整洁与良好的工作状态。实验设备应定期进行检查、检定（加贴标识）、维护和保养，以确保工作性能和操作安全。实验设备应有日常性监控记录和使用记录。（一）实验室基本要求：一、食品微生物学检验4．检验用品检验用品在使用前应保持清洁和/或无菌。常用的灭菌方法包括湿热法、干热法、化学法等。需要灭菌的检验用品应放置在特定容器内或用合适的材料（如专用包装纸、铝箔纸等）包裹或加塞，应保证灭菌效果。可选择适用于微生物检验的一次性用品来替代反复使用的物品与材料（如培养皿、吸管、吸头、试管、接种环等）。检验用品的储存环境应保持干燥和清洁,已灭菌与未灭菌的用品应分开存放并明确标识。灭菌检验用品应记录灭菌/消毒的温度与持续时间。一、食品微生物学检验4．检验用品（一）实验室基本要求：一、食品微生物学检验1．采样原则（二）样品的采集根据检验目的、食品特点、批量、检验方法、微生物的危害程度等确定采样方案。应采用随机原则进行采样，确保所采集的样品具有代表性。采样过程遵循无菌操作程序，防止一切可能的外来污染。样品在保存和运输的过程中，应采取必要的措施防止样品中原有微生物的数量变化，保持样品的原有状态。一、食品微生物学检验2．各类食品的采样方法即食类预包装食品取相同批次的最小零售原包装，检验前要保持包装的完整，避免污染。非即食类预包装食品原包装小于500g的固态食品或小于500mL的液态食品，取相同批次的最小零售原包装；大于500mL的液态食品，应在采样前摇动或用无菌棒搅拌液体，使其达到均质后分别从相同批次的n个容器中采集5倍或以上检验单位的样品；大于500g的固态食品，应用无菌采样器从同一包装的几个不同部位分别采取适量样品，放入同一个无菌采样容器内,采样总量应满足微生物指标检验的要求。散装食品或现场制作食品根据不同食品的种类和状态及相应检验方法中规定的检验单位，用无菌采样器现场采集5倍或以上检验单位的样品，放入无菌采样容器内,采样总量应满足微生物指标检验的要求。食源性疾病及食品安全事件的食品样品采样量应满足食源性疾病诊断和食品安全事件病因判定的检验要求。一、食品微生物学检验2．各类食品的采样方法（二）样品的采集一、食品微生物学检验3．采集样品的标记应对采集的样品进行及时、准确的记录和标记，采样人应清晰填写采样单（包括采样人、采样地点、时间、样品名称、来源、批号、数量、保存条件等信息）。4．采集样品的贮存和运输采样后，应将样品在接近原有贮存温度条件下尽快送往实验室检验。运输时应保持样品完整。如不能及时运送，应在接近原有贮存温度条件下贮存。（二）样品的采集一、食品微生物学检验5．样品检验样品处理实验室接到送检样品后应认真核对登记,确保样品的相关信息完整并符合检验要求。实验室应按要求尽快检验。若不能及时检验，应采取必要的措施保持样品的原有状态，防止样品中目标微生物因客观条件的干扰而发生变化。冷冻食品应在45℃以下不超过15min，或2℃～5℃不超过18h解冻后进行检验。检验方法的选择应选择现行有效的国家标准方法。食品微生物检验方法标准中对同一检验项目有两个及两个以上定性检验方法时，应以常规培养方法为基准方法。食品微生物检验方法标准中对同一检验项目有两个及两个以上定量检验方法时，应以平板计数法为基准方法。（二）样品的采集一、食品微生物学检验6．记录与报告记录：检验过程中应即时、准确地记录观察到的现象、结果和数据等信息。报告：实验室应按照检验方法中规定的要求，准确、客观地报告每一项检验结果。7．检验后样品的处理检验结果报告后，被检样品方能处理。检出致病菌的样品要经过无害化处理。检验结果报告后，剩余样品或同批样品不进行微生物项目的复检。（二）样品的采集二、公共场所公共用品用具微生物采样方法一般要求：

随机抽取清洗消毒后准备使用的公共用品用具，无菌操作，使用灭菌干燥棉拭子，于10mL灭菌生理盐水内浸润（吸取约1mL溶液）后，在用品用具的适当部位来回均匀涂抹进行样品采集，再用灭菌剪刀剪去棉签手接触的部分，将棉拭子放入剩余的9mL生理盐水内，4h内送检。二、公共场所公共用品用具微生物采样方法三、化妆品微生物标准检验方法样品的采集及注意事项所采集的样品，应具有代表性，一般视每批化妆品数量大小，随机抽取相应数量的包装单位。检验时，应分别从两个包装单位以上的样品中共取10g或10mL。包装量小的样品，取样量可酌减。供检样品，应严格保持原有的包装状态。容器不应有破裂，在检验前不得开启，以防再污染。接到样品后，应立即登记，编写检验序号，并按检验要求尽快检验。如不能及时检验，样品应放在室温阴凉干燥处，不要冷藏或冷冻。若只有一个样品而同时需做多种分析，如细菌、毒理、化学等，则宜先取出部分样品作细菌检验，再将剩余样品作其他分析。在检验过程中，从开封道全部检验操作结束，均须防止微生物的再污染和扩散，所用器皿及材料均应事先灭菌，全部操作应在无菌室内进行。或在相应条件下，按无菌操作规定进行。如检出粪大肠菌群或其他致病菌，自报告发出起该菌种及被检样品应保存一个月备查。三、化妆品微生物标准检验方法任务四

船舶机舱舱底水、生活污水采样一、机舱舱底水二、生活污水

任务目标任务目标知道机舱舱底水的采样方法和注意事项；了解生活污水的采样方法和注意事项。一、机舱舱底水（一）采样原则机舱舱底水采样方法油水分离装置外排水采样全层采样乳化及分散油水样的采样根据船舶排放机舱舱底水的实际情况和监测评价的目的，选择其中一种采样方法。一、机舱舱底水1.油水分离装置外排水采样是在油水分离装置排水管的取样点采集排放水的样品。2.采用混合水样法采样，即在同一采样点，每次用同一采样容器，按等体积、等时间间隔的方式采用。（二）油水分离装置外排水采样一、机舱舱底水3.采样步骤：（二）油水分离装置外排水采样采样前向油水分离装置供入机舱舱底水，使其达到稳定状态，即通过分离装置的油污水量不少于分离装置容积的两倍之后所形成的状态。每次取样前，应将取样旋塞打开，放泄1min以上开始取样。稳定后开始取样。按等时间间隔，从油水分离装置排水口的取样点等体积取样，其次数不少于三次。一、机舱舱底水1.采样（三）全层采样全层采样法是将全层采样器浸人机舱舱底水中，获取不同断面的机舱舱底水。各采样点的样品分别储存在不同的样品容器中，分析结果取全部采样点的平均值。1当机舱舱底水呈现稳定的油/水混合物分层状况，需要采集机舱舱底水全层水样，以获取机舱舱底水总的石油类含量时，可采用全层采样法；2全层采样器的设计参考ASTM5495，其构造见图6-1。全层采样器采用PVC、不锈钢或玻璃制作，内径一般为5cm一1Ocm，长度在50cm一100cm。根据实际需要，可增加其尺寸。一、机舱舱底水2.布点（三）全层采样根据船舶舱底结构和机舱舱底水分布的实际情况，一般情况下，在机舱内均匀布设五个采样点，如图6-2所示。根据船型大小和舱底各种管路分布情况，可以对采样点进行适当调整，增加或减少采样点个数。一、机舱舱底水3.采样步骤（三）全层采样采样前应将全层采样器清洗干净，工作正常，确保底部密封盖密封良好；打开全层采样器的底盖，使之处于开的状态；缓慢垂直地插人机舱舱底水中至底部，采样管内部和外部的液面应保持一致，避免采样速度过快；采样完毕后，闭合采样器底盖，一手轻提采样器离开舱底，一手用一次性抹布擦净外壳；采样器底部置于样品瓶上部，缓慢打开采样器底盖，小心地将样品排人样品瓶中，或直接加入取剂萃取。一、机舱舱底水4.注意事项（三）全层采样根据机舱舱底水的深度选择不同长度和内径的全层采样器，全层采样器的高度应至少大于机舱舱底水深度；每次样品采集前，按要求，应彻底清洗全层采样器。一、机舱舱底水1.采样

如果机舱舱底水表面的油呈小块状，机舱舱底水表面的油膜分布不均匀，则宜采集乳化及分散油水样。（四）乳化及分散油水样的采集一、机舱舱底水2.布点：布点按全层采样规定。3.采样步骤（四）乳化及分散油水样的采集1测定机舱舱底水深度；2撇开机舱舱底水表面上的油，将采样管插到水深的1/2处