BRM-SJS大鼠长期毒性试验

BRM-SJS大鼠长期毒性试验

北京临床肿瘤基因研究所

BEIJINGCLINICALTUMOURGENERESEARCHCENTER

摘要：本研究观察了BRM-SJS用药过程中对大鼠进食、生长、血象、肝肾功能生化指标，主要脏器系数和组织形态学影响。应用Wistar大鼠160只，采用三个剂量，连续灌胃给药90天，即1.0g/kg20ml，2.0g/kg20ml，4.0g/kg20ml。在给药过程中和停药后30天定期检查上述有关指标。结果证实：BRM-SJS对大鼠进食，血液学指标，血液生化指标均未见明显影响，对9种重要脏器，(心、肝、脾、肺、肾、胰、肾上腺、睾丸或卵巢)的脏器指数无明显影响，肉眼观察未见病理改变，镜下观察亦无阳性发现。

一、试验目的：观察大鼠在长期服用BRM-SJS过程中，有无蓄积性或迟缓性毒副反应，以及出现的毒副反应在停药后的30天内是否能够恢复正常。

二、材料与方法：1.药物：BRM-SJS，北京临床肿瘤基因研究所提供。2.动物：Wistar大鼠160只，50-60g，月龄1.5个月。雌雄各半，二级实验动物。购自中国医学科学院实验动物中心，合格证号医动字01-3008号。本所实验动物室实验动物设施合格证号：京动管准字(1994)第103号。动物实验设施合格证号，京动管准字(1996)第007号。

3.

试验方法：大鼠购入后观察1周，未发现不健康大鼠。随机分为4组，每组40只，雌雄各20只，即(1)空白对照组：灌服与药液同体积的供动物饮用的蒸馏水20ml/kg；(2)RBM-SJS低剂量组：1.0g/kg；(3)RBM-SJS中剂量组：2.0g/kg；(4)BRM-SJS高剂量组：4.0g/kg。

给药容积2ml/100g体重。每天灌胃，连续180天。服药的三个月内每周称重并调整药量，平时观察动物服药后的反应，包括饮食、活动、毛发、神志、口鼻眼眦、二便及死亡情况。每月定期记录1次日进食量。给药前，给药后30天，60天，90天和停药后30天，分别由尾静脉取血检查计数红细胞(RBC)，血色素(Hb)，白细胞(WBC)及分类，血小板(P)等指标。给药90天和停药后30天处死前，摘取眼球，取血测定血液学10项生化指标，包括谷草转氨酶(AST)，谷丙转氨酶(ALT)，碱性磷酸酶(ALP)，总蛋白(TP)，白蛋白(ALB)，总胆红素(T-BIL)，肌酐(Crea)，总胆固醇(T-CHOL)，尿素氮(BUN)和血糖(GLU)。每于尾静脉采血日，同时作尿常规检查。血象检查用日本东亚F820全自动血象分析仪，血液生化指标检测用OlympusAU600生化检测仪进行，病理切片采用OlympusBH-20光学显微镜阅片。给药结束后24h处死中、低剂量组全部大鼠，对照组、高剂量组处死半数动物(雌雄各20只)，停药后30天，再处死两组剩余的半数动物，作恢复期观察。凡处死后的大鼠，立即进行尸体解剖，目视主要脏器的外观是否有病理改变，留取并称重心、肝、脾、肺、肾、胰、肾上腺、睾丸或卵巢，用以计算脏器指数(g/100g体重)，留取全部或部分组织器官用10%福尔马林液固定，常规程序切片，HE染色后进行组织形态学镜检。

三、试验结果1.

动物一般状况：4组动物试验期间饮食正常，活动自如，口鼻眼雌无分泌物，毛发光泽不紊乱。试验期内，动物无死亡。表1显示BRM-SJS对大鼠进食量的影响，数据显示，大鼠的组间进食量无明显差异。2.BRM-SJS对大鼠体重的影响，结果见表二。停药后次日称重，高剂量雄性大鼠体重为290.818.5克，稍低于对照组相应的330.323.3(P<0.05)，停药后30天恢复期内，该组大鼠体重已升至356.518.8克，与对照组雄性鼠比较(361.821.6克)已无明显差异(P>0.05)。其余各组动物同期比较体重增长基本一致。3.

BRM-SJS对大鼠血象的影响：白细胞：给药前后各组大鼠同期比较。外周白细胞计数无明显差异，波动于正常值水平。见表3。白细胞分类：表4说明试验期间大鼠外周白细胞分类的组间同期比较，W-SCC和W-LCC均在正常值范围，无明显差异。红细胞和血色素：表5、表6为大鼠外周血红细胞和血色素检测结果，同期组间比较无差异，均在正常值范围。血小板计数：亦显示5次查血各组数值都在正常值水平。组间同期比较或组内不同期比较，均无明显差异(表7)。4.

血液生化指标：外周血生化指标测定结果证实，给药结束和恢复期后的10项指标约在正常值水平，同期或不同期组间比较基本一致(表8)。5.

尿常规：给药前、中、后5次检查结果，尿常规各项指标均未见异常(表10)。6.

主要脏器指数：表9显示大鼠9种脏器的重量和脏器的指数，表明心、肝、脾、肺、肾、胰、肾上腺，睾丸或卵巢的重量和脏器系数均属正常范围。服药组与对照组比较无明显差异。7.

病理组织学检查心脏：各组大鼠心肌细胞排列整齐，未见心肌变性，坏死或断裂，间质内未见炎症细胞浸润。肝脏：各组大鼠肝脏的肝小叶轮廓清楚，肝细胞索围绕中央静脉呈放射状排列。服药结束后和恢复期后，部分大鼠肝细胞出现浊肿变性，这种变化对照组和服药组均存在，且发生率相近。脾：脾包膜完整，脾小结清晰。肺：各组大鼠的肺泡清晰，细支气管粘膜完整。肾：皮质髓质界限清楚，皮质内肾小球结构可见，无肿胀、纤维化，肾曲管上皮完整。卵巢：雌性大鼠卵巢各级卵泡发育正常，黄体形成可见。胃、胰、肾上腺、睾丸：镜下检查均为正常结构。

四、小结：大鼠连续灌服BRM-SJS3个月，各服药组动物的一般状况，体重，血液学检查，血液生化学指标检查，尿常规，主要脏器重量和脏器系数均在生理范围。病理形态学检查中，部分大鼠肝细胞出