小鼠肺肿瘤的诱发实验

小鼠肺肿瘤的诱发实验实验目的：掌握药物致癌实验研究的设计和试验方法加深和理解药物致癌的相关理论了解药物剂量对致癌作用的影响掌握腹腔注射的方法和解剖镜的使用药物介绍：乌拉坦是由尿素和乙醇通过醇解法合成的医药化工原料与有机合成的中间体，是无色结晶和白色粉末。易燃，无臭，具有清凉味，与硝石相似。其又叫氨基甲酸乙酯，作为氨基甲酸乙酯类药的一种，乌拉坦也是一种易逆行胆碱酶抑制剂，在医药上曾作为镇静剂和催眠药。最主要的是它价廉，易得，好配置，而且它是一种典型的引发剂。实验原理：氨基甲酸乙酯在体内的代谢途径至少有三种：一是超过90%的它可被分解为乙醇，氨和淡水化合物。二是约0.5%的它被细胞色素P450氧化成DNA加聚物，造成DNA双链破坏，可导致癌变。三是约0.1%的它被细胞色素P450氧化为N-羟基-氨基甲酸乙酯，后者能诱导铜离子调控的DNA损伤，这种损伤多发生在胸腺嘧啶（T）和胞嘧啶（C）的残基上。大多数人认为体内铜离子存在时形成的N0和氧负离子所诱导产生的8-二氢-2-脱氧鸟苷以及8-N-鸟氨酸的脱嘌呤作用是它的主要致癌机理它是一种具有基因治癌作用的物质国际癌症调研机构（LARC）指出它对人类的致命毒性为2B群。实验材料：实验动物：昆明鼠种。雌鼠：70只体重17~21g,随机分于对照组和各实验组，自由饮食（每天给食量50-50.45g之间），饲养室气温21±2°C，湿度保持50~60%，房间自然通风消毒，自然采光，发现有病鼠及时处死，每个星期一换一次垫料。实验药物：纯乌拉坦，0.9%生理盐水，甜菜红素实验器材：解剖器材：手术剪（两个：直的和弯的各一个，）手术刀，手术镊，注射器，解剖板，锥子两把。灌胃器（以上所有器材备四组）。胶皮手套，台秤，解剖镜。切片器材：（因为解剖镜只能看表面，若表面看不清楚，防止实验失败，做一次光镜观察，那么需要做成切片：10%福尔马林，100%酒精，石蜡，蛋白廿油，苏木精（Hematoxylin）和伊红（Eosin）染色，简称H-E染色，二甲苯（1,11）,中性树胶,水浴锅，干燥箱，光镜）实验内容：取七十只老鼠随机分为4个组，标为1组（对照组）2组（乌拉坦组）3组（甜菜红素一组）4组（甜二组）。分别给2,3,4组动物单次腹腔注射乌拉坦染毒设1000mg/kg,染毒体积为0.2ml/10g（）；开始时1g25ml水，后来看有副作用就同时给第3,4组小鼠灌胃甜菜红素（2克加25ML水）（一组一只注射0.25ML，另一组注射0.5ML）；1组腹腔注射同等体积的生理盐水（0.9%的氯化钠）；五月十日灌胃完成,后期观察后面那部分（未来计划）15星期后拖颈椎处死，取肺脏肉眼宏观检查，肉能确定为肿瘤时置解剖镜下观察肺表面肿瘤数，镜下观察到肺肿瘤呈圆形，刚好在肺胸膜下，略突出于表面，灰白色半透明，0.1~3mm不等，边界整齐清楚，经福尔马林固定后呈乳白色，左右两肺无明显固定的发生部位制作病理切片，实验数据记录和处理注意事项配置乌拉坦溶液的时候尽量带胶皮手套防止乌拉坦接触暴露的皮肤如接触了快用清水洗洁精等清洗在腹腔注射时候，头部朝下，防止液体外溢灌胃前应空腹毒理实验的操作技能……填空30分例如：灌胃的最高剂量啊什么的，注意一下老师讲过的实验操作内容名词解释20分课后习题（作业本上的）50分我认为重点是王文斌说的一定要