中学奥林匹亚-lab二四年国际生物国手选拔营实作试题_第1页
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分 考生编二○○四年国际生物奥林匹亚国手选拔营实作（D试场 药品及材料1pXDNA（1-5）51限制酶11限制酶11限制酶11111111DNA111水浴槽（37℃，共享注：好之0.8％琼脂凝胶(内含DNA染剂)放置于电泳槽内之1xTAE（含40mMTris-醋酸，1mMEDTA，pH=8.0）缓冲液中。※请注意本试卷（含封面、试题卷）460题目：以限制酶切割DNA，并以胶体电泳分析结果来绘制限制酶图一、DNADNA之大小，并据以绘制限制酶在DNA上切割位点之图谱。编号1-5号离心管内各含有1μg之DNA(pX)，请依照下列步骤完成pX之限制酶切割作用及胶体电泳分析，并将结果拍照缴交(此部分实验操作占30分，由评审老师现场评分，相片占30分)，并利用实验之空闲时间回答问题I、II、III及IV(40分)。于装有pX之微量离心管上分别标上考生编号16μl无菌水、2μl25μl无菌水、2μl1μl之限制酵素N。34μl无菌水、2μl缓冲液及限制酶NH1μl。43μl无菌水、2μl缓冲液及限制酶N、H、E1μl。55μl无菌水、2μl1μl之限制酶E。37℃152μl先于琼脂胶体的第一个样品槽(M)10μlDNA（含有分别 、00、6000、7000、8000、9000及盐基对之DNA片段10μl100V25假设下方电泳图为本实验之结果，请回答以下问题问题I：请在图左方横线处，写出各横线所标示DNA并于电泳图之右边以+及－分别标示电泳时正负电极之方位。(5分问题II：请依据下方电泳图，大约估计pXDNA之大小？(5分问题III:12pXDNA之大小？为什么?（10分）问题IV下图为某科学家从事上述实验后所得之电泳图，假设结果正确，请依据此结果于右下方之圆圈上绘制pXDNA上N、H、E三种限制酶之切割位置图谱(12点处为限制酶N之切割位)。(20分)樣品號碼M 樣品NDNADNA片段的碱基对长度呈现对数的反比关系，因此生DNA分子。DNA限制酶图谱：在许多细菌中带有环状DNA，为外之双股DNA，常被用来做为选殖之载以相同之限制酶进行切割后，再用DNA连接酶加以连接形成重组DNA，选殖成功之重组DNA，可介由相同限制酶切割后，进行电泳分析所得之DNA片段之大小加以判DNA分子上各限制酶切割位的相对位置，我们可DNA片段的长度，并配合一种或同时被多种限制酶所切割后，切割产物经琼脂凝胶电泳分析，再以特殊的DNA染色后，便可在凝胶上观察这些切割后DNA片段，经与已知分子量之DNA分子标记比对后，可知道这些切

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