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文档简介

微生物送检标本的采集指南微生物学检验标本的正确采集、运送及处理,与细菌的培养。(SARS炭疽、肺鼠疫等)患者采集标本时,必须按国家规范化要求严格注意生物安全;医生、护士、检验人员均应重视微生物学检验标(一)1.标本采集1)申请单标记必须清楚(姓名、性别、年龄、病例号、临床诊断、标本采集、采集时间、检查项目、抗生素应用情况等便实验室能够合理选择培养环境和培养基;2)尽量在抗生素应用前采集标本,以提高阳性检出率和避免漏检;标本采集应严格执行无菌操作;咽拭、肛拭、伤口拭等拭子标本,应插入运送培养基送检;养基内送检;6)采集标本的容器必须经灭菌处理,但不可用消毒剂。标本运送标本采集后应尽快送到微生物实验室;2h标本验收实验室只能接受和处理合格标本;系。注意事项并给评价其意义带来麻烦甚至误导;成对患者的损害以及经济和时间的浪费。实验室检验。室温放置或延迟送检,可使检出的阳性率降低,不能使用冷藏的标本检验。果,不能使用。(二)微生物学检验标本采集和处理1.尿液标本采集和处理通常留取晨起第一次尿液(此时尿液在膀胱内储存4h以上;尿液采集后要及时送检,并保证2h4~88h淋球菌培养的标本不能冷藏!怀疑沙门氏菌感染时,应于发病2w2w(1)10—20ml,盛于无菌容器内,立即加盖送检。(2)导尿法:是一种无菌采集法,主要适用于手术后患者,10-15内感染。(3)集尿法:尿液检查结核分枝杆菌时,可用一洁净容器,留取24h200-250(4)培养结果与患者病情有矛盾时,可考虑用此法采集尿液。(5)肾盂尿采集法:为确定菌尿是否来自肾脏,可用导尿管用导尿管插入输尿管,分别标记左右侧,收集331132.粪便标本采集和处理1)采集时间:① 腹泻患者于急性期,尽量在用药前采集粪便:② 2w③ 2)采集方法:① 自然排便法:取新鲜粪便的粘液、脓血、或絮状物等有内送检;若疑似霍乱者应置于碱性蛋白胨水中(PH:8.6)。② 直肠拭子法:难以获得粪便或排便困难患者及幼儿可采4-5c(2-3cm后取出,盛于无菌试管中或保存液中送检。3、痰及下呼吸道标本采集和处理1)自然咳痰法:①晨痰为佳;②先冷开水洗漱、清洁、口腔和牙齿;③再用力咳出呼吸道深部的痰,吐至无菌容器中;④痰量不得少于1ml;⑤痰咳出困难时可先雾化吸入NaCl溶液(100g/L,加温到45℃)使痰容易咳出。查结核分枝杆菌,应留取24小时痰。2)小儿取痰法:用弯压舌板向后压舌,将拭子深入咽部,小儿因压舌板刺激引起咳嗽,喷出的肺或气管分泌物粘在拭子上即可送检。3)支气管镜、支气管穿刺、支气管肺泡灌洗等采集法,此采集法必须由医生操作。① 气管导管法:用气管插管吸取下呼吸道痰液。② 用支气管刷直接取得。4)呼吸道标本采集方法:鼻咽拭子法,先用清水漱口,对光坐,头向上仰,口张大,用压舌板轻压舌根,用棉拭子在病人咽后壁,悬雍垂后侧涂抹数次,立即放入无菌试管中。注意事项:痰经过口腔,所以患者应用清水漱口数次,尽量排除口腔内大量杂菌。痰液标本要求涂片镜检:达到低倍镜视野中≤10个鳞状上皮细胞,以及≥25个白细胞方可送检。4、血液及骨髓培养标本1)血培养标本采集指征:培养,患者出现以下体征可作为血培养的重要指征:① 发热(≥38℃)或低热(≤36℃)② 寒热③ 白细胞增多(>10×109/L的或带状的白细胞增多时)④ 粒细胞减少(成熟的多核白细胞<1109/L)⑤ 血小板减少⑥ 皮肤黏膜出血⑦ 昏迷⑧ 多器官衰竭2)8-10ml1~3ml要儿童瓶,标本量与血液相同。①抗生素治疗前,严格无菌静脉采血8~10ml(儿童1~4ml);不同时间或不同部位采取2-3份血液标本;型菌需要不同培养瓶)中送检;48h3④必要时可需氧菌、厌氧菌﹙10%﹚和L⑤疑为心内膜炎时,为提高阳性检出率,可酌情不同部位、不同时间,多次采血或动脉采血进行培养;⑥必要时可取骨髓1~2ml,无菌注入专用培养瓶中送检。注意事项:血液在正常情况下为无菌标本,应严格按照无菌1~25、脑脊液采集时间:怀疑脑膜炎时应立即采集脑脊液,最好是在应用抗生素之前采集脑脊液。3~5ml31~2ml)2ml。6、穿刺液培养标本2~3d采集方法①无菌操作穿刺抽取标本或外科手术采集标本;②标本采集量应>1ml(结核分支杆菌培养时应为1~5ml);③标本采集后注入无菌小瓶或无菌试管中立即送检;④可在盛器中先加入灭菌肝素然后在加入穿刺液,以防止穿刺液凝固(0.5ml肝素可抗凝5ml标本)。7、胃液及胆汁培养5ml,置无菌管内送检;胃液和胆汁采集后必须立即送检。8、脓汁和病灶分泌物培养标本采集前局部消毒后无菌采取脓汁或病灶分泌物或组织。标本采集后立即置无菌管内送检。9、眼、耳、鼻、咽拭子培养标本拭干,再用无菌棉拭子采集分泌物。310、泌尿生殖道培养标本2~4cm阴道、宫颈分泌物、通过阴道扩张器,用灭菌拭子采取阴道口1~2cm物污染拭子。宫腔分泌物:在必要时用外套保护膜的灭菌导管抽取。液于无菌容器内送检。5射精于无菌容器内送检。缘或基底部的分泌物,置无菌试管中送检。11、烧伤感染培养标本12h12、厌氧菌感染培养标本1)标本采集送检,严格遵守无菌操作;②血液及其他体液(胸水、腹水、心包液、关节液、胆汁、脑脊液等)注入厌氧血培养,立即送检;③深部脓肿,在病灶部位开放前取材,可用针管抽取,针头用无菌胶囊密封,也可用血气采集针抽取,立即送检;④抽取液体标本后,要尽快排除注射器内的空气。2)标本运送①标本采集后不得冰箱储存,必须尽快(半小时内)送实验室;②运送方法:A送培养基中直接运送;BCDE3)建议使用微生物组合:①细菌学涂片:快速回报标本中可能的病原微生物②普通细菌培养:(3天)③厌氧培养:(7天)④真菌培养:(5天)⑤微生物分子生学检测:(213、真菌感染培养标本1)浅部真菌感染标本采集①皮肤:常规消毒皮肤,从皮肤癣菌皮损边缘刮取鳞屑,置无菌平皿内送检,皮肤溃疡则采集病损边缘脓汁或组织;5~65~62)深部真菌感染标本采集8~10ml8~9h;②脑脊液采样量不少于3~5ml,分别注入两支无菌试管中送检(一管做真菌培养和墨汁染色一管测隐球菌抗原和其他培养);③呼吸道及泌尿生殖道深部真菌感染标本采集同一般菌培养标本。14、皮肤(主要指伤口、创面脓液等)标本采集方法皮肤表面污染菌混入影响检验结果,盛放标本器皿应无菌。脓液及病灶深部分泌物,并置无菌容器内送检。1215、空气培养标本采集方法采样时间:选择消毒处理后与进行医疗活动之前进行采样。80~150cm。布点方法:室内面积≤30㎡,设一条线上取三点,即中心一点,两端各距墙1m北、中5点,其中东、南、西、北距墙1m。9cm5后时间培养。标本保存:①采样后必须尽快送检。布把平皿和平皿盖子固定好以免在时间途中平皿和平皿盖子分离而造成污染。③将封好的平皿装入自封袋,并将自封袋封好后送检。血液、骨髓、无菌体液:严格消毒、避免体表正常菌群的污染。下次用药前采血。由于血液、骨髓、无菌体液含有极少量的病原体,就可以才能获得满意结果。成人未使用抗生素治疗采集骨髓0.5-1毫3-103-10对于感染性心内膜炎患者应增加采血次数,以提高阳性率。尿液:导尿法:是一种无菌采集法,主要适用于手术后患者,取10-15感染。中段尿采集法:是临床上最多采用的方法,女性病人先以擦干,让病人排尿,弃去前段尿,收集中段尿10—20ml,盛于无菌容器内,立即加盖送检。肾盂尿采集法:为确定菌尿是否来自肾脏,可用导尿管采导尿管插入输尿管,分别标记左右侧,收集33113膀胱穿刺尿采集法:将病人耻骨上皮肤消毒后,以无菌针培养结果与患者病情有矛盾时,可考虑用此法采集尿液。留尿法:尿液检查结核分枝杆菌时,可用一洁净容器,留24h200-2502、粪便标本采集和处理1)采集时间:腹泻患者于急性期,尽量在用药前采集粪便;伤寒患者于发病2w以后采集粪便;怀疑霍乱痰液:正常人下呼吸道是无菌的,上呼吸道有正常菌群寄居。6对于痰液不能自主咳出,可采用高渗盐水雾化吸入排痰。皮肤、创面:用无菌棉签取痂下脓性分泌物送检。生殖道分泌物:根据病人主述临床症状,采用不同方式取材:若病人白带呈淡黄色,稀水样,考虑滴虫感染,用无菌棉签取阴12-42-4厘米寄居的是柱状上皮细胞,这是淋球菌寄居的地方。对于女性患者,用温水湿润的扩阴器,取阴道分泌物或宫颈分泌物,棉签停留数秒钟,2.5应从扁桃体及扁桃体窝取材。支原体检查:支原体是简单的原核细胞,没有细胞壁,缺乏许多细胞器,直接镜检没有意义,只有通过培养,取材显得重要,采阴道拭子。衣原体检查:采取尿道标本,至少在排尿12-4(因为衣原体寄生在粘膜柱状上皮细胞,而不是寄生在复层鳞状上皮细胞中再用棉拭子(小2(小1-2不采用脓液作培养。10-30道制剂、清洁剂等病人标本不宜作衣原体检查。血液标本的采集指南一、血液标本的正确采集方法:1、采血时间:6-9(见附表)124采血尽量安排在其他检查和治疗之前进行。很多指标受昼夜节律影响,现将昼夜变化较大的指标列表如下:检验指标 峰值期低值期增加幅度(%)催乳素 5-710-1280-100TSH 20-27-135-15T4 8-1223-310-20睾酮 2-420-2430-50血钾 14-1623-15-10血红蛋白 6-822-248-15血清铁 14-182-450-70肾上腺素 9-122-530-50去甲肾上腺素 9-122-550-120嗜酸细胞 4-618-2030-40肾上腺皮质激素5-821-3180-200磷酸盐 2-48-1230-402、采血姿势和止血带的使用:对于有些检验指标来说,卧位采血与坐、立位采血结果是有区别的。坐、立位与卧位相比,静脉渗透压增加,一部分水从心血管系统转移到间质中去。正常直立位时血浆总量比卧位减少12%左右。血液中体积大于4nm的成分不能通过血管壁转移到间质中去,使其血浆含量升高5-15%。常见的指标有:Hb、WBC、RBC、RBC比积、钙、AST、ALP、IGM、IGG、IGA、ALB、TP、CHOL、TG、LDL-CHOL7-70%不等的升高。验指标的改变。建议:考虑姿势的影响。1当需要重复使用止血带时,应使用另一上臂。差。3、避免溶血:溶血通常被定义为:血细胞成分释放到血浆或血清中。血液由血浆和血细胞成分组成。很多指标在血细胞中的浓度比在血浆中要高很多如:乳酸脱氢酶、血红素、转氨酶、和钾等等。因此样本的溶血会严重干扰检验检测的结果。溶血又分为两种:显性溶血和非显性溶血。显性溶血:指样本经离心,血浆或血清呈现或深或浅的红颜色,这种红色是由红细胞中的血红素释放出来造成的。300mg/L(LDH、ASTALT、KHB、等值异常升高与临床病人症状不符时,应首先考虑非显性溶血原因.)建议:尽量

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