真空采血管的技术特点及临床应用

真空采血管的技术特点及临床应用血液标本的实行用真空采血管系列已成为主流,由于过去采血后血液自然凝固,血液从离心到测定放置时间长,影响分析结果和速度。为了快速推动检测技术的快速化,往采血管中添加分别胶，促凝剂缩短了血液凝固时间，血清〔血浆〕分别胶抗凝采血管的应用,为急诊干化了穿插感染等生物安全隐患,标准了检验科采血技术,提高了检测标本的质量,便利了就诊患者。但是,随着分别胶促凝采血管等在临床实践应用不断增加,消灭很多误区及使用中值得留意的有关问题，有必要对这些问题作一介绍。一、材料的性能指标自动化仪器的大量使用及血液的保存对血样原始性状稳定性提出了更高的要求,使真空采血技术突破了仅仅只为安全的要求,而准确不能无视,影响标本原始性状及检测准确性的因素有如下几项。真空采血管的材质:以往采血管多为玻璃材料,pH相差甚远,溶血的可能性大大增加,而拉管工艺制作的玻璃试管线性沟密布,深浅粗细无常导致细胞的挂壁,玻璃试管的主要成分是亲水性硅酸盐,采血后玻璃试管内壁可消灭吸附水分子的吸水层,所以,分别胶不能直接黏附于玻璃试管的内壁。随着放置时间的延长,红细胞中的钾或者酶等物质,可以通过水分子吸水层向血清中集中。所以,玻璃采血管在原状态下保存血清的期限以2~3d为宜。塑料采血管常用聚对苯二甲酸(乙二)醇酯(polyethyleneterephthalates,PET)材质制作,是疏水性质,其管壁不产生水分子层,分别胶可结实地黏附着内壁上,红细胞中的钾不能集中到血清中,因而冷藏保存8dPET塑料真空采血管可在-20℃保存标本,这是一般塑料试管和玻璃试管难以到达PET塑料采血管为佳。密封胶塞:密封胶塞的质量直接影响到试管的真空性能及血液样本的原始状态,推举使用丁基橡胶而不用自然橡胶，自然橡胶填料外渗严峻,是一种可致溶血的材料,很多有机填料和助剂(包括石蜡油,硅油,松软剂,着色剂等)在真空状态下会沿玻璃管壁往下爬,这类物质尤其透性也不符合真空管的技术要求,真空丧失严峻,管塞结合部可见塞屑粘壁严峻。而丁基橡胶具有良好的塞封性能,溶出物大大削减,使得采血管即便是在101.3kPa的负压时仍能在24空恒定使采血对象即使有血压及血液粘度的差异,以及采血环境温度的变化仍能保持采血量的相对准确,实际采血量误差可掌握在±5%以内。二、添加剂的正确使用添加剂包括多种成分,如抗凝剂、促凝剂、缓冲剂、保护剂、分别血技术则在品种、浓度方面做到标准全都,并能长期维持其有效性,使添加剂对检测结果的影响降到最小。由于血液分析的多样性,故抗凝剂的使用种类较多,抗凝及促凝原理,效果也不一样,常用的有如下几种。,用于生化、血库和血清学检验。有的内壁涂有硅酮,避开血细胞附壁,防止离心时细胞裂开,释放细胞内物质至细胞外,影响试验结果。由于这种采血管内无分别胶，血液从凝固到离心须在一小时以上已越来越不适应目前医院繁重的工作量的需要，现在有逐步被带分别胶促凝管所替代。分别胶促凝管(黄帽):血清分别胶由疏水有机化合物和硅石粉组成,是具有触变性的黏液胶体,其构造中含有大量氢键,由于氢键的缔合作用形成网状构造,在离心力的作用下网状构造被破坏变为黏度低的流体,当离心力消逝之后又重形成网状构造,这种性质被称为触变性(thixotropy)。即在温度不变的状况下,对这种黏液胶体加肯定的机械力,可从高黏度的凝胶状态变为低黏度的溶胶状态,假设机械力消逝又恢复原高黏度的凝胶状态。分别胶比重维持在1.05,血清比重约1.02,血块比重约1.08，当分别胶与凝固后的血液在同一试管中离心时,由于对分别胶施加离心力而引起硅石分散体中的氢键网状构造被破坏变成链状构造,分别胶就成为黏度低的物质,比分别胶重的血块就转移到管的底部,分别胶发生返转现象,形成管底部血块、分别胶、血清三层。当离心机停顿转动失去离心力后,分别胶中硅石分散体的链状粒子间再次由氢键构成网状构造,恢复初始高黏度凝胶状态,在血清和血制的促凝剂,一般常用硅石粉、玻璃粉、碳素粉末及蛇毒等促凝成分,经特别加工制成粉剂用定量喷雾器均匀喷涂在血清分别胶真空采血管内壁上,到达快速促凝的目的。肝素抗凝管(绿帽):肝素是一种含有硫酸基团的粘多糖,分子量15000,因有硫酸基团,带有强大的负电荷“其抗凝原理为与抗凝血酶2(AT2)结合,使AT2的精氨酸反响中心更易与各种丝氨酸蛋白酶起作用,使凝血酶的活性丧失。常用其钠、钾、锂盐,100~125U/mg可使5~10ml血液不凝固。肝素是一种极佳的抗凝剂,对血液成分干扰少,,血浆渗透量、红细胞压积、血沉及一般生化测定“因肝素具有抗凝血酶的作用,不适于做血凝试验。过量的肝素会引起白细胞的聚拢,不能用于白细胞计数,因其可使血片染色后背景呈淡蓝色,故不适于做白细胞分类。由于肝素不能使离体后的血小板离散,成为单个颗粒或细胞通过微孔,可造成血小板计数减低,白细胞计数及淋巴细胞计数偏高。商品肝素常含有磷酸盐,可使无机磷测定偏高“肝素抗凝血应于短时间内使用,否则搁置过久血液又可凝固。乙二胺四乙酸(EDTA)盐管(紫帽):EDTA与血液中的钙离子螯合,从而使血液不凝,1.0~2.0mg1ml血液凝固。此抗凝剂不影响白细胞计数及大小,对红细胞形态影响最小,并且可以抑制血小板的,渗透压上升,造成细胞皱缩。EDTA溶液pH与盐类关系较大,pH可使细胞膨胀，EDTA-K2可使红细胞体积轻度胀大,采血后短时间内平均血小板体积(MPV)格外不稳定,半小时后趋于稳定。EDTA-K2使钙、镁下降,同时使肌酸激酶(CK)、碱性磷酸酶(ALP)减低,因这些酶测定需要这些金属离子。EDTA-K3的最正确浓度是1.5mg/ml,假设血少,EDTA浓,,产生正常血小板大小的碎片,使分析结果产生错误。EDTA依靠的IgM抗体可引起白细胞计数削减,同时造成血涂片时白细胞聚拢。EDTA由于螯合钙的作用强,使二磷酸腺苷(ADP)不能引起血小板聚拢,另外EDTA能抑制或干预纤维蛋白凝块形成时纤维蛋白单体聚合,不适用于血凝及血小板功能检查,亦不适用于钙、钾、钠及含氮物质测定。枸橼酸钠管(蓝帽!黑帽):抗凝原理为与钙结合,形成可溶性钙螯合物而使血液不凝。NCCLS推举的血凝测定要求的抗凝剂浓度是3.2%局部凝血试验都可用枸橼酸钠抗凝,它有助于因子和因子的稳定。另外,用枸橼酸钠抗凝的血浆做活化局部凝血活酶时间(APTT)试验,其对肝素的敏感性远远高于草酸盐抗凝血浆,当APTT试验用于监控承受肝素治疗的患者时,这一点显得格外重要。枸橼酸钠6mg才能抗凝1ml血,碱性强,不适于血液化验,亦不适于做生化检测,枸橼酸钠对MPV及其他凝血因子影响微小,作用随血浆中枸橼酸钠的浓度降低而增高,因此在贫血患者应参加较正常人为多的抗凝剂。对于血液凝固试验来讲,假设血液比例过低,APTT时间会延长,凝血酶原时间(PT)PT测定3.8%的抗凝剂比3.2%的国际标准化比值(INR)值高,其差异变化一0.7~2.7INR单位之间。由于枸橼酸钠毒性小,也用于血液保存，枸橼酸钠在水中溶解慢,故只能配成水剂而不能用粉剂。枸橼酸钠有2分子水(Na3C6H5O7.2H20)和5.5分子水(2Na3C6H5O7.11H2O)两种,3.8%,但后者很难买到。抗凝剂浓度高,血沉快,假设抗凝剂浓度恰当(无论枸橼酸钠或EDTA)均不影响血沉的结果,Zeta电位,使血沉加快,故不能使用。三、真空采血管使用中应留意的几个问题真空采血管的选择：应本着安全有效，质优价廉，保证检验结果品，那些质量好价格优待的国产品牌同样可以胜任于日常的临床应例〕各种类型真空采血管必要的试用和评价后才能正式在临床应用。推举的采血挨次为凝血管(血清管)→枸橼酸钠管→肝素或EDTA管→草酸钾2氟化钠管→,易造成凝血,不适于做血凝测定。取血时患者应松弛,环境温和,防止静脉挛缩，束膊时间不行过长,制止拍打手臂,否则可造成局部血液浓缩或激活凝血系统。观看采血是试验室分别血清标本的速度与全自动化很不同步,由于血液凝,凝血因子中的Ⅺ、Ⅻ因子接触玻璃试管壁后被激活,一般采血后在,30min大局部血液已凝固,1h。但,被激活的力量格外弱,需要2~4h血液才能完全凝固,管混合4~5次,置室温立放待血液完全凝固后离心，血液呈现收缩状态,可观看到有血清渗消灭象,证明血液完全凝固。血清分别胶促凝采血管离心操作的要求：如何正确地使用分别胶促凝管制备高质量血清标本,血液完全凝固和离心条件是至关重要的:采血后马上轻轻倒转采血试管4~5次混匀标本,等待标本充分凝固需要放置8cm,3500~4000r/min10min。血清与血凝块完全被分别胶分别,效果好。假设离心速度过低,作用于分别胶的力比较弱,分别胶返转不佳或者血液没有完全凝固就离心,可消灭纤维蛋白凝状物停留在血清中或胶体层中,有可能引起溶血,分别胶凝采血管时常常发生,假设有纤维蛋白丝停留于血清中很简洁BD公司等同类产品的分别时间，分别效果几乎没有区分。经用国产〔友利〕分别胶塑料试管,对生化、免疫30多个工程是否影响测定值作了调查,用一般玻璃试管做比照