药品中残留溶剂内标法检测方法验证方案

版本号：01版本号：01第第1012页XXX中甲醇、乙醇、正己烷、甲苯残留检测方法验证方案方案编号：姓名职位 签名 日期起草XXX质量争论员审核XXX质量副部长审核XXXQA批准XXX质量部长概述XXX是生产XX的起始物料，生产该物料工艺中使用的溶剂有：甲醇、乙法属于杂质定量分析，依据USP<1225>要求需要验证的内容有：系统适用性、专属性、线性、范围、灵敏度、准确度、重复性、中间周密度、耐用性。1.验证所需试剂甲苯 AR级或更高级别甲醇 AR级或更高级别乙醇正己烷正庚烷N,N-二甲基甲酰胺〔DMF〕 2.试验所需仪器或设备气相色谱仪带有FID检测器mm，3.0μm高纯氮气量瓶〔十万分之一〕3.验证内容系统适用性目的： 承受标准：RSD5%。溶液制备 见附件分析方法中比照溶液的制备。分析待色谱系统稳定后，按下面序列表进样分析。名称名称空白〔溶剂〕〔S〕进样针数专属性目的：确保承受的方法能正确测定出被测物的特性。承受标准：空白溶液图谱中目标峰出峰位置四周无显著干扰峰。分别度测试溶液〔RS〕1.5。溶液制备样品溶液 溶液称取1.0g样品置50ml量瓶中，加溶剂约30ml使溶解，加溶剂定容至刻度，摇匀。标记为Sample。乙醇定位溶液制成乙醇浓度为0.08%〔v/v〕的DMF40μl50mlEthanol。0.002%〔v/v〕的DMF50μlMCBY，再量取该溶1ml50mlMethanol。正己烷定位溶液制成正己烷浓度为0.002%〔v/v〕的DMF溶液。量取正己HCBY，再量取该溶液1ml置50ml量瓶中加溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，标记为Hexane。0.002%〔v/v〕的DMF50μlTCBY，再量取该溶1ml50mlToluene。正庚烷定位溶液制成正庚烷浓度为0.04%〔v/v〕的DMF溶液。量取正庚烷20μl50mlHeptane。分别度测试溶液20mg/ml液的混合溶液。分别量取乙醇40μl、正庚烷20μl、MCBY溶液1ml、HCBY1.0g30mlRS。分析待色谱系统稳定后，按下面序列表进样分析。名称名称〔溶剂〕Sample比照品溶液〔S〕EthanolMethanolHexaneTolueneHeptane进样针数分别度测试溶液〔RS〕分别度测试溶液〔RS〕线性例关系的程度。承受标准：r，0.950。溶液制备0.5ml，50mla。b.5ml50mlL-01。10ml100mlL-02。5ml50mlL-03。10ml100mlL-04。1ml10mlL-05。1ml10mlL-06。标记乙醇〔%W/W〕W/W〕甲醇〔%W/W〕〔%W/W〕L-019.480.660.79标记乙醇〔%W/W〕W/W〕甲醇〔%W/W〕〔%W/W〕L-019.480.660.790.87L-027.110.4950.59250.6525L-034.740.330.3950.435L-042.370.1650.19750.2175L-050.9480.0660.0790.087L-060.4740.0330.03950.0435L-070.2370.01650.019750.02175分析待色谱系统稳定后，按下面序列表进样分析。名称 进样针数名称 进样针数空白〔溶剂〕 2针或更多比照品溶液〔S〕 6针空白〔溶剂〕 1针或更多L-06L-05L-04L-02L-01各1检出限目的：确定试样中的被测溶剂能够被检出的最低量。承受标准：检出浓度不得高于限度的15%，信噪比应≥3.3L-0710，L-07定量限目的：确定试样中的被测溶剂能够被定量的最低量。承受标准：检出浓度不得高于限度的50%，信噪比应≥10.当线性项下的某个溶液中的某个溶剂峰信噪比不小于10，该溶液浓度即可作为定量限浓度，即为定量限。如L-0710，则L-06方法准确度承受标准：75%~125%之间。各浓度水平内的回收率RSD值应不大于20%。溶液制备空白样品溶液 溶液制备周密称取三份，制备成供试品溶液，分别标记为：U-1、U-2、U-3。50%工作浓度准确度测试溶液 量取乙醇20ml、正己烷0.5ml、甲苯量瓶中加溶剂稀释至刻度摇匀再量取该0.5ml、内标溶液25ml置250ml的量瓶中，参加溶剂稀释至刻度摇匀，作为50%浓度稀释液。称取1.0g样品置50ml量瓶中，加50%浓度稀释液使溶解，再加溶剂定容刻度，摇匀。平行制备三份，标记为CR-01、CR-02、CR-03。100%工作浓度准确度测试溶液 量取乙醇20ml、正己烷0.5ml、甲苯0.5ml、甲醇0.5ml置100ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，再量取该1ml、内标溶液25ml置250ml的量瓶中，参加溶剂稀释至刻度摇匀，作为100%浓度稀释液。称取1.0g样品置50ml量瓶中，加100%浓度稀释液使溶解，再加溶剂定至刻度，摇匀。平行制备三份，标记为CR-04、CR-05、CR-06。名称乙醇甲醇甲苯XXX正庚烷150%Level4.74%(w/w)0.099%(w/w)0.1185%(w/w)0.1305%(w/w)20mg/mL0.04%(v/v)100%Level3.16%(w/w)0.066%(w/w)0.079%(w/w)0.087%(w/w)20mg/mL0.04%(v/v)50%Level1.58%(w/w)0.033%(w/w)0.0395%(w/w)0.0435%(w/w)20mg/mL0.04%(v/v)150%工作浓度准确度测试溶液 量取乙醇20ml、正己烷0.5ml、甲苯名称乙醇甲醇甲苯XXX正庚烷150%Level4.74%(w/w)0.099%(w/w)0.1185%(w/w)0.1305%(w/w)20mg/mL0.04%(v/v)100%Level3.16%(w/w)0.066%(w/w)0.079%(w/w)0.087%(w/w)20mg/mL0.04%(v/v)50%Level1.58%(w/w)0.033%(w/w)0.0395%(w/w)0.0435%(w/w)20mg/mL0.04%(v/v)分析中甲醇、乙醇、正己烷、甲苯的量，扣除空白残留,而后除以溶液配制时甲醇、乙醇、正己烷、甲苯的参加量，即得回收率。名称空白〔溶剂〕〔S〕空白〔溶剂〕空白样品溶液〔U-1、U-2、U-3〕

进样针数611准确度测试溶液〔CR-01、CR-02、CR-03、各1CR-04CR-05CR-06CR-07CR-08CR-09〕计算公式：回收率%= ×100%比照参加量周密度品含量测定结果无法反映周密度。故以准确度项下100%工作浓度测试溶液代替供试品考察周密度。重复性目的：在一样的操作条件下，测试在较短时间间隔周密度。承受标准：六份测试溶液所得图谱中甲醇、乙醇、正己烷、甲苯测得量的RSD20%。溶液制备6U-1、U-2、U-3、U-4、U-5、U-6。分析待色谱系统稳定后，按下面序列表进样分析。名称名称空白〔溶剂〕〔S〕空白〔溶剂〕进样针数重复性测试溶液〔U-1、U-2U-3U-4U-5U-6〕各1针中间周密度所得结果之间的周密度。承受标准：0.1%0.7%.溶液制备取三批产品，由两个不同的分析员在不同日按供试品溶液醇、正己烷、甲苯的残留量。分析待色谱系统稳定后，两个分析人员各按下面序列表进样分析。名称名称空白〔溶剂〕进样针数〔S〕空白〔溶剂〕、U-2〕、U-2〕、U-2〕耐用性

61承受标准：RSD%5%。溶液制备 按附件中6.2.2.4项比照溶液制备方法制备。分析不同载气流速名称空白〔溶剂〕名称空白〔溶剂〕〔S〕进样针数26不同进样口温度名称空白〔溶剂〕名称空白〔溶剂〕〔S〕进样针数26不同检测器温度名称空白〔溶剂〕名称空白〔溶剂〕〔S〕进样针数26不同色谱柱mm×3.0μm，DB-624，其余色谱条件按附件中色谱条件设置。待色谱系统稳定后，按下面序列表进样分析。名称名称空白〔溶剂〕〔S〕进样针数再验证周期方法进展再验证。偏差及订正措施序号工程偏差内容产生的缘由及实行的措施负责人完成日期序号工程偏差内容产生的缘由及实行的措施负责人完成日期1分析方法仪器载气流速柱温进样量分流比溶液制备

Agilent6890GCFID氮气5.0ml/min40℃3℃/min2min30℃/min10min。240℃240℃1μl5:1溶剂 N,N-二甲基甲酰胺〔DMF〕比照溶液DMF0.4ml100ml比照储藏液1 置50ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀。1100ml度，摇匀。2、1ml10mlS。SolventEthanol%V/V0.08%W/W3.16insample密度(g/ml)0.789n-Hexane0.0020.0660.660Methanol0.0020.0790.793Toluene0.0020.0870.8661.0g50ml30mlU-1、U-2。系统适用性空白溶剂应无干扰，假设有干扰，可积分时扣除空白。连续6针工作比照溶液RSD5%。计算(Riu)(Du)(Vis)(dis)〔100〕C％＝ ────────────(Ris)(Wu)disg/mL(甲苯0.866g/mL；甲醇0.793g/mL；乙醇0.660g/mL)；Riu为供试品溶液图谱中溶剂与内标物正庚烷峰面积的比值；Du50；0.0008；0.00002；甲醇0.00002.Wug。限度标准甲苯不得过0.5%；正己烷不得