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文档简介
细胞工程前者是细胞水平或细胞器水平上生物技术,后者是分子水平上的生物技术。克隆多莉羊技术是
水平上的技术,培育抗虫棉是
水平上的技术。细胞工程与基因工程相比:细胞分子有什么相同点吗?典例精析知识梳理细胞的全能性与细胞分化植物细胞工程动物细胞工程细胞工程知识归纳比较细胞工程植物组织培养植物体细胞杂交动物细胞培养动物细胞融合单克隆抗体技术核移植植物细胞工程动物细胞工程理论基础细胞的全能性其他动物细胞技术的基础二植物细胞工程的基本技术一)细胞的全能性
1、概念:生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能。2、原因:受精卵有丝分裂体细胞含全套遗传基因3、全能性的程度(1)受精卵的全能性最高
受精卵生殖细胞体细胞>>(2)植物细胞>动物细胞
(3)4、形成不同组织、器官原因:基因选择性表达5、条件:
(1)离体状态,(2)完全营养物质、激素
一.细胞的全能性与细胞分化(1)细胞的全能性是指已分化的细胞仍具有发育成完整个体的潜能。其原因是生物体的每一个细胞都包含有该物种特有的全套遗传物质,都有发育成完整个体所必需的全部基因。(2)细胞全能性大小比较植物细胞﹥动物细胞(仅细胞核具全能性)受精卵﹥生殖细胞(卵细胞等)>体细胞幼嫩的细胞﹥衰老的细胞体细胞:分化程度低的﹥分化程度高的分裂能力强的﹥分裂能力弱的植物组织培养三植物组织培养技术(重点理解)1、概念:
在无菌和人工控制条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株。2、原理:植物细胞的全能性3、过程:
外植体
愈伤组织根、芽植物体再分化脱分化也叫:外植体如:茎尖、根尖
适宜的温度、PH值、养料、激素、充足氧气条件避光需光无细胞分裂、分化能力特点:具分裂、分化能力,既具全能性(主要)无定形状态、高度液泡化、排列疏松、无规则、无叶绿体,不进行光合作用离体植物细胞(外植体)胚状体根芽愈伤组织脱分化再分化植物体植物激素:细胞分裂素、生长素植物组织培养的过程杂种细胞愈伤组织杂种植株植物细胞A植物细胞B原生质体A原生质体B正在融合的原生质体去细胞壁!再生细胞壁植物组织培养植物细胞融合植物体细胞杂交过程将不同种的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。4、优势:(与有性杂交方法比较)克服植物远缘杂交不亲和性3、原理:细胞膜的流动性和细胞全能性主要:原生质体融合结果2、概念:四、植物体细胞杂交技术(重点理解):如小麦和玉米之间存在生殖隔离四、植物体细胞杂交技术:重点理解
白菜-甘蓝白菜甘蓝5、实例:生长期短、耐热性强和易于贮藏番茄-马铃薯(理性图)比较植物组织培养植物体细胞杂交技术所属范畴原理步骤意义联系无性繁殖细胞全能性①脱分化②再分化保持优良性状繁殖速度快、大规模生产提高经济效益杂交技术应用了组织培养克服不同种生物远缘杂交不亲和的障碍①去除细胞壁②融合形成杂种细胞③组织培养膜流动性细胞全能性染色体变异植物细胞工程的实际应用植物繁殖的新途径微型育种作物脱毒人工种子作物新品种的培育单倍体育种诱导突变体细胞产物的工厂化生产人参皂甘的生产单倍体育种1、单倍体的概念:体细胞中含有本物种配子染色体数目的个体2、单倍体育种涉及的技术:花药离体培养花药离体培养
过程:细胞工程植物组织培养植物体细胞杂交动物细胞培养动物细胞融合单克隆抗体技术核移植植物细胞工程动物细胞工程理论基础细胞的全能性其他动物细胞技术的基础动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液胰蛋白酶(分解弹性纤维、胶原蛋白)10代细胞原代培养50代细胞传代培养细胞株无限传代细胞系遗传物质改变遗传物质未改变单个细胞动物细胞的培养过程:3、条件:1、无菌、无毒的环境
2、营养3、温度和PH
4、气体环境:(添加一定量的抗生素,定期更换培养液)补充合成培养基中缺乏的物质36.5+0.5度;PH为7.2-7.4。O2作用:进行呼吸,提供能量CO2作用:维持培养液的PH值(95%空气和5%CO2)(葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、动物血清、血浆等。)有氧(1)生产蛋白质生物制品:病毒疫苗、干
扰素、单克隆抗体等。(2)获得大量自身的皮肤细胞,用于植皮。(3)用于检测有毒物质(4)用于生理、病理、药理等方面的研究,为治疗和预防疾病提供理论依据4、应用1、概念:六、动物细胞核移植和克隆动物
将一个动物的细胞核,移入另一个去核的卵母细胞中,使其重组发育成一个胚胎,最终发育成动物个体。结果:原理:分类:克隆动物(用核移植方法得到的动物)动物细胞核的全能性胚胎细胞核移植、体细胞核移植2、动物体细胞核移植的过程供体细胞(供核)细胞培养体细胞卵母细胞(减Ⅱ中期:供质)去核无核卵母细胞核移植杂种细胞早期胚胎胚胎移植代孕母体新个体分娩激活卵裂3克隆动物的研究意义1.克隆动物作为生物反应器,生产医用蛋白2.改良动物品种3.治疗人类疾病,作为供体4.保护濒危动物体细胞核移植技术存在的问题:许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷,如体型过大,异常肥胖,发育困难,脏器缺陷,免疫失调等。1、概念:qi、动物细胞融合两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。原理:结果:细胞膜的流动性得到杂交细胞诱导方式物理法:化学法:生物法:灭活的病毒(与植物细胞杂交不同点)离心、振动、电刺激;聚乙二醇;2、诱导融合的方法:细胞A细胞B杂种细胞灭活的病毒物理法化学法仙台病毒疱疹病毒新城鸡瘟病毒动物细胞融合比较:培养结果培养目的培养基特有成分培养基性质原理比较项目细胞的全能性植物体或组织快速繁殖、培育无病毒植株等蔗糖、植物激素固体培养基植物组织培养细胞株、细胞系获得细胞或细胞分泌蛋白葡萄糖、动物血清液体培养基细胞增殖动物细胞培养植物、动物细胞融合的比较主要用于制备单克隆抗体获得杂种植株用途物理、化学方法(同左)灭活的病毒物理(离心、振动、电刺激)化学(聚乙二醇)诱导方法使细胞分散后诱导细胞融合去除细胞壁后诱导原生质体融合细胞融合的方法细胞膜的流动性细胞膜的流动性、植物细胞全能性原理动物细胞融合植物体细胞杂交比较项目单克隆抗体制备过程
注射抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞细胞融合、筛选杂交瘤细胞细胞培养筛选,继续培养足够数量的、能产生特定抗体的细胞群体外培养注射到小鼠腹腔单克隆抗体用筛选培养基筛选专一抗体检验1、原理:杂交瘤细胞具有两个亲本的特性,即能迅速大量增殖,又能产生足够数量的单一抗体。2、过程B淋巴细胞骨髓瘤细胞诱导融合B-B细胞B-瘤细胞瘤-瘤细胞选择培养杂交瘤细胞(
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