高中生物选修1《微生物的实验室培养》实验教学设计

《生的验培》验学计教目标确立依据课程标准中内容标“行生物的分离和培养活动建“用大肠杆菌为材料进行平面培养．分离菌落合人社选修1教和本校实验条件，确立本课题教学目标如下：知识目标：列举培养基的种类等基础知识，说明培养基配方及作用；概述无菌技术。能力目标尝培养基的制备高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术练范地进行无菌操作，成功地培养微生物。情感态度价值观方面体验制作肉膏蛋白胨培养基养纯化大肠杆菌的方法参与实验过程体实验操作领悟实验原交实验体会；形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神。教学重难点无菌技术的操作由于微生物在自然界分布广泛实验室培养微生物除了要为微生物提供合适的营养和环境条件外需要确保其他微生物无法混入因此实时针对培养基作于养的器皿种具等使用不同的方法进行消毒灭菌处理菌”的条件下接种和培养，获得纯净培养物成培养微生物。可见无菌技术是微生物培养过程的关键。教学中可联系医疗和生活实际深入理解无菌技术。教实施建议．拟实验计划微生物实验室培养需要在无菌条件下进行验技术要求高本题教学组织采用实验探究的模式注微生物实验基本作和技能的训练用课上和课下统筹安排理论和实践并举，在操作中理解原理，利用原理指导实践。基于此，对本实验教学安排如下：实验计划

教学目标

教师活动

学生活动

设计意图第一课时学有关培养基的知识和无菌技术提相关材料，进行基础知识介绍明确实验原理通讲解，设计表格进行知识归纳第二课时学有关制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法进行制备牛肉膏蛋胨培养基、倒平板操作提实验器具，和培养基配方，指导学生操作进实验培养基和器皿灭菌，倒平板操作尝试配制培养基及倒平板第三课时进实验室纯化大肠杆菌操作介平板划线和稀释涂布平板原理导生接种操作利各小组自己配制的培养基在无菌条件下接种大肠杆菌操作尝试利用牛肉膏蛋白胨培养基接种大肠杆菌并纯化培养

第四课时培观察、展示成果，分析原因和课题延伸组织交流和介绍菌种保藏观察记录结果并进行分析观并分析成功和失败原因，拓展视野．理实验原理实验原理是实验所遵循的科学道理体说它是进行实验设计和操作的理论依据为决某方面生物学问题所应用到的生物学及相关学科中的方法和理论验原理是实验设计和操作的前提。本课题依据的实验原理是：．．1培基配制原理：微生物的生长繁殖时需要各营养物质，一般包括水、无机盐、碳源和氮源的需要少量特营养物长因子据生物的种类和实验目的不同，选择不同的原料配制不同培养基课题使用牛肉膏蛋白胨培养基是种应用最广泛和最普遍的细菌基础培养基，也称普通培养基。它含有牛肉膏、蛋白胨和，其中牛肉膏为细菌提供碳源和能源磷酸盐；蛋白胨主要提供氮源；而NaCl提无机盐。在配制固体培养基时还要加入琼脂作凝固剂。在培养细菌时要用稀酸或稀碱将pH调中性或微碱性，以利于细菌的生长繁殖。牛肉膏蛋白胨培养基的配方见教材．。12无操作原理：针对不同对象采用不同的消毒和灭菌的方法，在高温、高压、化学药剂强和强碱作用下，使微物蛋白质凝固变性，从而达到杀菌的目的。本实验采用酒精对实验者双手消毒紫外线对作环境照射消毒培养基采用高压蒸汽灭菌对玻璃器皿进行干热灭菌和接种环灼烧灭菌等。3纯大肠杆菌的理为了获得某种微生物的纯培养，选用平板划线法或稀释涂平板法牛膏蛋白胨培养基操作培养后可分离得到有单个细胞繁殖而来的子细胞群，即菌落。．准实验材料微生物实验涉及的实验仪器较多，完成本课题所用材料、仪器及药品列表如下：实验材料实仪器和设备实试剂或药品大肠杆菌或金黄色葡萄菌等细菌培养皿试管试管架锥形瓶量筒烧（100mL酒精灯、石棉网、高压蒸汽灭菌锅、移液管、胶头滴管、托盘天平（或电子秤环、涂布器、恒温箱、干热灭菌箱、玻璃棒、称量纸、棉花、牛皮纸（或旧报纸筋牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、盐酸、氢氧化钠、琼脂、蒸馏水等就目前中学生物实验室条件来说，多数学校都没有单独设立无菌室，一些实验器材也不全，这是制约微生物实验顺利进行的瓶颈学中为了满足实验要求极造条件开展好微生物培养实验，具体做法是：通过自制无菌操作箱（即接种箱见图1可解决没有无菌室的问题；高压蒸汽灭菌锅可用家用高压锅代替，也可用铝锅隔水蒸煮～分钟，温度100，隔24小再照样蒸煮，连

煮三次可杀死全部细菌和孢环可用废电炉丝或细钢丝做针环璃棒做柄，自己动手制作；培养时如果没有恒温箱，冬季可用电暖风或暖气附近保持温度在～30即可。．指实验操作本课题实验可按照下面实验流程进行操作：．．1配牛肉膏蛋白胨培养基操作配制合适的培养基是培养察研究微生物的基础织学生配制牛肉膏蛋白胨培养基操作时注意：（1溶化琼脂时要控制火力的大小并不断搅拌，以免培养基溢出或糊底引起烧杯破裂；（2加热过程中部分水分蒸发，待琼脂完全溶化后应补加蒸馏水，以保持溶液的浓度；（3培养基各种成分溶化后灭菌前要根据培养微生物需要调节pH；（4一般是培养基先灭菌再倒平板，倒平板操作必须在酒精灯火焰旁进行，并且不要将皿盖完全打开；（5冷却后的平板要倒置，以确保拿放方便，同时避免水分蒸发，以利微生物生长。．．2接操作微生物接种方法有两种：一是平板划线接种（图2用种环划线将菌体沾在面培养基或平板培养基上。微生物的生长和繁殖迅速一段时间就在培养基表面形成长满菌落的细线线的作用是纯化微生物，通过划线将微生物单个地分离，并最终形成标准的菌落。划线操作时注意：（1用接种环取菌种之前、每次划线之前和划线结束都要进行灼烧灭菌，灼烧后要在酒精灯附近冷却后再操作线时不要划破培养基如果采用分段划线法操作第二次操作应总在上一次划线末端开始，首尾区不能相连）作必须始终在酒精灯火焰旁进行。二是稀释涂布平板接种（图先将菌液进行一系列梯度释，用涂布器将不同稀释度的菌液均匀地涂布在平板上进行培养稀释度足够高的菌液里集一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落布操作时注意配制系列梯度稀释液必须用无菌水配制系列梯度稀释液和转移菌液以及涂布过程必须都在酒精灯火焰旁进行。教学中要求学生认真领会无菌种的技术原理复练习操步骤作通过练习达到熟练程度，并培养严谨认真的科学精神和一丝不苟的实验态度。．．3培操作将接种后的培养基和一个未接种的培养基放入37℃恒温箱中培养12h和后观察并记录这间可安排生物科代表或实验小组长进行定期观察做好计录以及时让其他学生观察到自己的实验成果。特别需要说明的是，如果学生不能及时观察，培养的时间过长，

很多菌落就会联成一片，就不能观察到单个菌落了。教反思本节课可以通过生产实