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文档简介

一微生物筛选原理及介绍二微生物筛选流程三微生物筛选操作content微生物的筛选专家讲座第1页一、微生物筛选介绍1、概念2、筛选及纯化方法3、培养基选择微生物的筛选专家讲座第2页概念:

在混杂微生物群体中,按照微生物代谢特征,分离出特定功效微生物,并进行纯化直至取得单一菌株操作过程。土壤是微生物大本营,混杂着大量微生物,从中分离可得到只含有一个微生物纯培养。概念

筛选及纯化方法培养基选择微生物的筛选专家讲座第3页微生物筛选方法有:稀释涂布法和平板划线法。稀释涂布法:将土壤溶液稀释成一定梯度,将其涂布到固体平板培养基上。平板划线法:挑取稀释涂布后长出菌落,在固体平板培养基上划线培养,获取纯菌落。概念筛选及纯化方法培养基选择微生物的筛选专家讲座第4页微生物的筛选专家讲座第5页细菌筛选:选择性培养基

依据某种微生物特殊营养要求或其对某化学、物理原因抗性而设计培养基。其功效是使混合菌样中劣势菌变成优势菌,从而提升该菌筛选效率。概念筛选及纯化方法培养基选择微生物的筛选专家讲座第6页细菌保留:牛肉膏蛋白胨培养基配方(g):牛肉膏3,蛋白胨10,氯化钠5,琼脂15,蒸馏水1000ml,pH7.2。概念筛选及纯化方法培养基选择微生物的筛选专家讲座第7页二、微生物筛选纯化流程样品富集培养梯度稀释涂布培养平板划线纯化斜面保留微生物的筛选专家讲座第8页三微生物筛选纯化操作注意事项:①筛选之前,提前制作好试验用培养基。②与培养微生物相关试验器材需要灭菌,方法为在121℃条件下高压灭菌20分钟。③与微生物相关操作需要在无菌操作台上进行。操作之前15分钟打开紫外灯。微生物的筛选专家讲座第9页样品富集培养梯度稀释涂布培养划线纯化斜面保留采样:土壤样品,梅花形布点采样,取得用四分法进行取样,将样品放入4℃冰箱中保留待用。微生物的筛选专家讲座第10页富集培养:指从微生物混合群开始,对特定种数量百分比不停增高而引向纯培养一个培养方法。在适于目标微生物而不适于其它微生物生长条件下继续培养,则目标微生物将成为优势种而得到纯培养。样品富集培养梯度稀释涂布培养划线纯化斜面保留微生物的筛选专家讲座第11页以筛选产DMS功效微生物为例:

取2.5g土样置于50ml改良基础盐液体培养基中,28℃震荡培养4天。样品富集培养梯度稀释涂布培养划线纯化斜面保留微生物的筛选专家讲座第12页样品富集培养梯度稀释涂布培养划线纯化斜面保留微生物的筛选专家讲座第13页样品富集培养梯度稀释涂布培养划线纯化斜面保留①将菌种用无菌水制成悬液。②取若干只无菌试管,每只内盛9ml无菌水。

③吸收上述菌悬液lml加入第1只含有没有菌水试管内。也就是10-1。④从第1只试管内(10-1)吸收lml注入第2只含有没有菌水试管内,也就是10-2。⑤用一样方法,制成10-3~10-8菌悬液。微生物的筛选专家讲座第14页样品富集培养梯度稀释涂布培养划线纯化斜面保留划线目标:逐步纯化,直至出现单菌落,取得纯菌株。3~5次。微生物的筛选专家讲座第15页样品富集培养梯度稀释涂布培养划线纯化斜面保留微生物的筛选专家讲座第16页样品富集培养梯度稀释涂布培养划线纯化斜面保留微生物的筛选专家讲座第17页样品富集培养梯度稀释涂布培养划线纯化斜面保留微生物的筛选专家讲座第18页将接种菌株斜面放入4℃冰箱中保留。至此,

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