同济儿科翻译1-3英文文章

前脂肪细胞分化成熟过程中SOCS1/3沉默对C/EBPα、PPARγ表达的影响丹高金枝应艳琴 SOCS-1和SOCS-3是胰岛素信号传导通路中的负性调节因子其过度表达会加重胰岛素抵抗胰岛素抵抗常存在肥胖和SOCS-1、SOCS-3SOCS-1、SOCS-3可能参与了胰岛素抵抗时脂肪resultSOCS-1SOCS-3C/EBPα、PPARγSOCS-1、SOCS-3C/EBPα、PPARγ表达下DiscussionSOCS-1SOCS-3C/EBPαPPARγ的表达参与了胰岛素抵抗中脂肪组织的异常堆积。methods我们建立胰岛素抵抗IUGRSOCS-1、SOCS-3、C/EBPα、PPARγ蛋白表SOCS-1、SOCS-3shRNA质粒，转染原代分离培养的前脂肪细72hC/EBPα、PPARγ的表达.Introduction：大量流行病学研究显示，Intrauterinegrowthretardation(IUGR)成人后发生肥胖和胰岛素抵抗(insulin,IR)的风险大大提高（1,2,3）。我们的IUGR12w时即存在胰岛素抵抗，其肌肉组织SOCS-1、SOCS-3SOCS-1、SOCS-3可改善肌肉细胞葡萄糖的转运（4）SOCS-1/3IUGR大鼠肌肉细胞胰岛SOCS-1SOCS-3（IR）（5,6,IR是指外周组织对胰岛素的敏感性降低.织的胰岛素敏感性最高,脂肪细胞是白色脂肪组织的主要组成部分,不仅能够储胞由前脂肪细胞分化而来。前脂肪细胞分化主要受C/EBPα、PPARγ和ADD1/SREBP1c3种转录因子的调节。PPARγC/EBPαmRNA的转衡.引起的脂肪细胞分化异常，都可能干预胰岛素的正常效应,引起胰本研究中，我们期建立胰岛素抵抗IUGR大鼠模型、并构建SOCS1/3shRNASOCS-1SOCS-3，C/EBPα、PPARγSOCS-1/3mRNA并诱导前脂肪细胞分化成熟，72hC/EBPα、PPARγ的表达水平变SOCS-1、SOCS-3C/EBPα、PPARγ调节前脂肪细胞的采用母孕期营养联合生后充足营养建立追赶生长IUGR大鼠模型，12W测空按照说明书步骤提取蛋白，BCA法(PierceCo,USA)测蛋白浓度后按每50ug的蛋白量电泳，转印到PVDF膜，5%脱脂牛奶封闭2h后，一抗1:10004℃过夜，2hECLVisualImagingsystem,AmbisInc.)扫描分析条带密度来检测C/EBP-α、PPAR-γ表Rodbell（11USA，1×105个／cm262mlUSAshRNA的质粒脂肪细DEME70%时开始转染。siRNALipofectamine2000250ulOpti-MEM®I5ulLipofectamine2000250ulOpti-MEM®I7.5ulshRNA5shRNALipofectamine2000，轻轻混合，在室温下孵育20分钟，以便允许复合物的形成。将shRNA-LipofectamineTM2000复合物加入到每一个包含细胞和培养基的孔（13sigma培养48h后，换普通的含10%胎牛的DMEM培养24h后进行后续的检测。Real-timePCRC/EBP-α、PPAR-γRNA260nmA260/RevertAid™HMinusFirstStrandcDNASynthesisKit(Fermentas,USA)逆转录为cDNA，ABI7500HTPCR仪上(ABI,USA)进行实时定量PCRPPARγ上游引物5’-ACCACAGTTGATTTCTCCAG-3’5’-TGTTGTAGAGCTGGGTCTTT-3’，片段长度178bp；C/EBPα上游引物5’-3’引物5’-GATCTTCATGGTGCTAGGAG-3’，片段长度165bp引物由生工公primer(10mol/L)1l，SYBRPremixExTaq12.5L，ddH2O25L。扩增条件：95℃5min预变性后，94℃20s，58℃20s，72℃20s，40个循环。72℃延长5min。采用2-△△CT计算目的的相对含量达显著增高。(p<0.05图1)RT-PCR检测正常组和IUGR组基础状态下的C/EBPαPPARγmRNA的表异。(p<0.05图2)显示，socs-1沉默后，细胞中C/EBPα、PPARγmRNA的表达量也是显著下降的。(p<0.05图4)，图5表明，SOCS-3沉默导致分化3d时实验组细胞中C/EBPα、PPARγ蛋白含量下降显著低于对照组而图6则表明在水平上实验组的mRNA终导致肥胖和胰岛素抵抗。第三次国家健康与营养显示：SGA儿生长（14BMI（4肪细胞向成熟脂肪细胞的分化，其中PPARγ,C/EBPα起到了比较重要的作用。PPARγ诱导脂肪细胞的形成，调控成脂相关表达（15。C/EBPα则调控脂（16,既然,C/Eα能促进脂肪细胞的形成和肥胖，那么就可以从肥胖入手来寻找线索。我们知道胰岛素有促进脂肪形成、抑制脂肪分解的作用。在生长追赶IUG后期确实存在着胰岛素抵抗和高胰岛素血症。虽然胰岛素抵抗的形成涉及体内的多种分子和多个途径，至今尚未完全了解。但是我们注意到socs1、3（5,6,7，而且肥胖胰岛素抵抗患者体内的socs、3水平往往是增高的（17,18socs1、3、3通过诱导胰岛素抵抗产生高胰岛素血症而促进脂肪的形成和堆积，另一方面我们会想：socs1、是否有直接促进,C/Eα的表达从而引起成脂和肥胖的作用呢？PPARγ,C/EBPα表达的影响“鸡尾酒“法是诱导前脂肪细胞分化成经典方加入分化剂3天后，PPARγ,C/EBPα都已有较高的表达。因此我们选择此时为观察点。结果发现沉默SOCS1/3与PPARγ,C/EBPα之间存在着正相关，沉默,（19leptin、ad