还原糖的测定

..精品精品提取液的制备常用的提取剂有水和乙醇溶液能的转化后，每毫升含糖量应在0.5~3.5mg之间，提取10克含糖2%的样品可在100毫升容量瓶中进展；而对于含糖较高的食品，可取5~10克样品于250毫升容量瓶中进展提取。②含脂肪的食品，如乳酪，巧克力，蛋黄酱及蛋白杏仁糖等，通常需经脱脂后再以水进展提取。一般以石油醚处理一次或几次，必要时可以加热。每次处理后，倾去石油醚层〔如分层不好，可以进展离心分别，然后用水提取。③含大量淀粉和糊精的食品，如粮谷制品，某些蔬菜，调味品，用水提取会使局部淀粉，糊精溶出，影响测定，同时过滤也困难，为此，宜承受乙醇溶液提取。乙醇溶液的浓度应高到足以使淀粉和糊精沉淀，通常用70~75%的乙醇溶液。假设样品含水量较高，混合后的最终浓度应掌握在上述范围内。提取时可加热回流，然后冷却并离心，倾出上清液，如此提取2~3次，合并提取液，蒸发除去乙醇。用乙醇溶液作提取剂时，提取液不用除蛋白质，由于蛋白质不会溶解出来。④含酒精和二氧化碳的液体样品，通常蒸发至原体积1/3~1/4，以除去酒精和二氧化碳。但酸性食，在加热前应预先用氢氧化钠调整样品溶液至中性，以防止低聚糖被局部水解。40~50℃，一般不超过80做提取剂，加热时应安装回流装置。〔2〕提取液的澄清作为澄清剂必需具备以下几点要求剩的澄清剂应不干扰后面的分析操作，易于除掉。常用三种澄清剂：中性醋酸铅[Pb〔CHCOO)2•3H2O]乙酸锌和亚铁氰化钾溶液硫酸铜和氢氧化钠溶液澄清剂的用量样液除铅食品中复原糖的测定直接滴定法、高锰酸钾法、萨氏法、碘量法2.1 直接滴定法(1)原理(2)适用范围(3)试剂(4)测定方法(5)结果计算(6)说明与争论原理淀，待二价铜全部被复原后，稍过量的复原糖把次甲基蓝复原，溶液由蓝色变为无色滴定终点。依据样液消耗量可计算复原糖含量。适用范围及特点本法又称快速法，它是在蓝-爱农容量法根底上进展起来的，其特点是试剂用量少，操作和计算都比较简便、快速，滴定终点明显。适用于各类食品中复原糖的测定。但测定酱油、深方法试剂①碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜及0.05g四甲基蓝，溶于水中并稀释到1000ml②碱性酒石酸铜乙液:取50g酒石酸钾钠及75g氢氧化钠，溶于水中，在加4g亚铁1000ml，储存于橡胶塞玻璃瓶内。③乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌，加3ml冰醋酸，加水溶解并稀释1000ml。④ 106g/L亚铁氰化钾溶液。⑤ 盐酸。 1.000g5ml1000ml。测定方法样品处理碱性酒石酸铜溶液的标定样品溶液推测样品溶液测定①样品处理取适量样品，按其次节中的原则对样品进展提取，提取液移入250ml容量瓶中，渐渐参加5ml乙酸锌的溶液和5ml亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，摇匀后静至30分钟。用枯燥滤纸过滤，弃初滤液，收集滤液备用。②碱性酒石酸铜溶液的标定准确吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5ml，置于250ml10ml，加玻璃珠3粒。② 碱性酒石酸铜溶液的标定准确吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5ml，置于250ml锥形瓶中，加水10ml，加玻璃珠3从滴定管滴加约9ml葡萄糖标准溶液，加热使其在2分钟内沸腾，准确沸腾30秒，趁热以每2标准溶液的总体积。平行操作3次，取其平均值。F =c •V式中：F 10mg碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量，mg;C 葡萄糖标准溶液的浓度，mg/ml；V 标定时消耗葡萄糖标准溶液的总体积，ml。③样品溶液推测吸取碱性酒石酸铜甲液及乙液各5ml，置于250ml锥形瓶中，加水10ml，加玻璃珠3粒。加热使其在2分钟内沸腾，准确沸腾30秒钟，趁沸以先快后慢的速度从滴定管中滴加样品2秒一滴的速度滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。记录消耗溶液的体积。④样品溶液测定吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5ml，置于250ml锥形瓶中，加水10ml，加玻璃珠3粒。从滴定管参加比推测时样品溶液消耗总体积少1ml的样品液，使其在2沸腾30秒钟，趁热以每2秒一滴的速度连续滴定，直至蓝色刚好褪去为终点。记录消耗样品液的体积。平行操作3次，取其平均值结果计算 复原糖〔以葡萄糖计%〕 m

FV 1000

100式中：m-----样品质量, g； 250F 10ml碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量，mg；V 测定时平均消耗样品溶液的体积，ml；250 样品溶液的总体积,ml。说明与争论①醋酸锌及亚铁氰化钾作为蛋白质沉淀剂这两种试剂混合形成白色的氰亚铁酸锌沉淀，能使溶液中的蛋白质共同沉淀下来。测得的是总复原糖量。③本法是依据肯定量的碱性酒石酸铜溶液〔Cu2+量肯定〕消耗的样液来计算样液中复原糖含量，反响体系中Cu2用铜盐作为澄清剂，以免样液中引入Cu2+，得到错误的结果。④次甲基蓝也是一种氧化剂，但在测定条件下氧化力量比Cu2+弱，故复原糖先与Cu2+反响，Cu2+完全反响后，稍过量的复原糖才与次甲基蓝指示剂反响，使之由蓝色变为无色，指示到达终点。⑤为消退氧化亚铜沉淀对滴定终点观看的干扰，在碱性酒石酸铜乙液中参加少量亚铁氰化钾，使之与Cu2O生成可溶性的无色络合物，而不再析出红色沉淀，其反响如下：Cu2O +K4Fe(CN)+H2O＝K2Cu2Fe(CN)6+2KOH⑥ 碱性酒石酸铜甲液和乙液应分别贮存，用时才混合，否则酒石酸钾钠铜络合物长期在碱性条件下会渐渐分解析出氧化亚铜沉淀，使试剂有效浓度降低。⑦ 滴定必需在沸腾条件下进展蓝遇空气中氧时又会被氧化为氧化型。此外，氧化亚铜也极不稳定，易被空气中氧所氧化。保持反响液沸腾可防止空气进入，避开次甲基蓝和氧化亚铜被氧化而增加耗糖量。⑦ 滴定必需在沸腾条件下进展蓝遇空气中氧时又会被氧化为氧化型。此外，氧化亚铜也极不稳定，易被空气中氧所氧化。保持反响液沸腾可防止空气进入，避开次甲基蓝和氧化亚铜被氧化而增加耗糖量。⑦ 滴定必需在沸腾条件下进展蓝遇空气中氧时又会被氧化为氧化型。此外，氧化亚铜也极不稳定，易被空气中氧所氧化。保持反响液沸腾可防止空气进入，避开次甲基蓝和氧化亚铜被氧化而增加耗糖量。⑧ 液中。⑨ 样品溶液推测的目的：一是本法对样品溶液中复原糖浓度有肯定要求0.1，测定时样品溶液的消耗体积过大或过小应加以调整，使推测时消耗样液量在10ml左右；二是通过推测可知道样液或许消耗量，以便在正式测定时，预先参加比实际用量少1ml左右的样液，只留下1mL左右样1分钟内完成续滴定工作，提高测定的准确度。⑩影响测定结果的主要操作因素是反响液碱度、热源强度、煮沸时间和滴定速度。2.2 高锰酸钾法高锰酸钾法系将复原糖与过理的碱性洒石酸铜溶液反响复原糖使二价铜复原为氧化亚铜中查得与氧化亚铜量相当的复原糖量，每计算样品中的复原糖含量。此法测定结果准确性、重现性较好，但较费时。(2)试剂① 碱性酒石酸铜甲液：称取34.639g硫酸铜(CuSO4。5H2O)加适量的水溶解，参加0.5mL500mL，用精制石棉过滤。②碱性酒石酸铜乙液：称取173g酒石酸钾钠和50g氢氧化钠，加适量的水溶解并稀释到500ml，用精制石棉过滤，贮存在橡皮塞玻璃瓶中。③精制石棉：取石棉，先用3mol/L盐酸浸泡2~3小时，Y用水洗净，再用10%氢氧化钠浸泡2～3小时，倾去溶液，再用碱性酒石酸铜乙液浸泡数小时，用水洗净，再以3mol/L贮存在玻璃瓶中，即可用于填充古氏坩埚。④0.02mol/L高锰酸钾标准溶液：称取3.3g高锰酸钾溶于1050mL水中，缓缓煮沸20~30分钟，冷却后于暗处密闭保存数日，用垂融漏斗过滤，保存于棕色瓶中。0.02mol/L高锰酸钾标准溶液m10002( 150~2023C燥1~1.5小时的准草酸钠约0.2g，溶于50mL( V V硫酸，用配制的高锰酸钾溶液滴定，0秒不褪为止。同时作空白试验。

3加热至700，连续滴定至溶液呈粉红色30计算：式中：m 草酸质量，g;V 标定时消耗高锰酸钾溶液的体积，mL；V0 空白消耗高锰酸钾溶液的体积，mL;c 高锰酸钾标准溶液的浓度，mol/L;134 草酸钠的摩尔质量，g/mol⑤ 1mol/L氢氧化钠溶液⑥ 硫酸铁溶液：称50g硫酸铁，参加200mL水溶解后，渐渐参加100mL硫酸，冷却后加1000mL。⑦ 3mol/L盐酸溶液仪器① 25ml古氏坩埚或G4垂融坩埚②真空泵或水力真空管。测定方法①样品处理250mL10mL碱性酒石酸铜甲液和4mL1mol/L氢氧化钠溶液，加水至刻度，混匀，静置30分钟。用枯燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液供测定用。②测定吸取50mL处理后的样品溶液于400mL烧杯中，加碱性酒石酸铜甲、乙液各25mL，盖上外表皿，置电炉上加热，使其在4分钟内沸腾，再准确沸腾2分钟，趁热用铺好石棉的古氏坩埚或G4垂融坩埚抽滤，并用60回原400mL25mL硫酸铁溶液及25mL高锰酸钾标准溶液滴定至微红色为终点。记录高锰酸钾标准溶液消耗量。同时吸取50mLV)1300空白试验消耗高锰酸钾溶液的量。0 2 1000结果计算：复原糖式中：c 高锰酸钾标准溶液的浓度，mol/L;V测定用样液消耗高锰酸钾标准溶液体积，ml;V0 试剂空白消耗高锰酸钾标准液体积，ml;143.08----氧化亚铜的摩尔量/mol; 100Vx与滴定时所消耗的高锰酸钾m210于复原糖的质量，mg;VV1-----样品处理液总体积，ml; 1V2 测定用样品溶液体积，ml;m 样品质量，g。3总糖的测定糖与果糖的混合物俗称转化糖。测定总糖通常以复原糖的测定法为根底再按复原糖测定法测定，测出以转化糖计的总糖量。假设需要单纯测定食品中蔗糖量，可分别测定样品水解前的复原糖量以及水解后的复原糖量，0.95，即为蔗糖量。C12H22O11+H2O→C6H12O6+C6H12O6蔗糖 葡萄糖 果糖342g 180g 180g342/〔180+180〕=0.95即1g转化糖量相当于0.95g蔗糖量。在食品加工生产过程中，也常用相对密度法、折光法等简易的物理方法测定总糖量。原理总糖的测定的原理是样品经除去蛋白质后，加稀盐酸在加热条件下使蔗糖水解转化为复原糖，再以直接滴定法或高锰酸钾法测定。仪器① 恒温水浴。② 其他同复原糖测定。试剂① 6mol/L盐酸溶液。②甲基红指示剂：0.1%〔体积分数〕乙醇溶液。称取0.1g甲基红溶于100ml60%〔体积分数〕乙醇中。③ 200g/L〔体积分数〕氢氧化钠溶液。④ 其他试剂同复原糖测定。测定方法样品处理 蔗糖水解〔样品及蔗糖标准液〕 复原糖法测定①样品处理：按复原糖测定法中的方法进展。②样品中总糖量测定：吸取50ml样品处理液于100mL容量瓶中，加6mol/L盐酸5mL，在68～70℃水浴中加热15min，冷却后加2滴甲基红指示剂，用200g/L〔体积分数〕氢氧化钠中和至中性，加水至刻度，混匀，按复原糖测定方法中直接滴定法或高锰酸钾法进展测定。

m250 2

100%式中ω 以转化糖计，总糖的质量分数，%；m 21000m2 直接滴定法中10m1mg1的转化糖量，mg;m 样品质量，g;V1 样品处理液总体积，mL;V2 测定总糖量取用水解液体积，mL;说明①分析结果的准确性及重现性取决于水解的条件，要求样品在水解过程中，只有蔗糖被水不计。果糖在酸性介质中将渐渐被分解，当有蛋白质、氨基酸存在时，这种分解作用更易进展。故束后应马上取出，快速冷却中和，以防止果糖及其他单糖类的损失。②在用直接滴定法测定蔗糖时，为削减误差，碱性酒石酸铜溶液的标定需承受蔗糖标准液，按测定条件水解后进展标定。碱性酒石酸铜溶液的标定①称取105℃烘干至恒量的纯蔗糖1.0000g500mL容量瓶中，1mL2mg。②