第八章外源化学物致癌作用

概要第一节化学致癌过程第二节化学致癌机制第三节化学致癌相关的分子事件第四节化学致癌物的分类第五节化学致癌筛查的基本方法第一页，共90页。目的要求掌握化学物致癌作用的概念、过程及机制。熟悉观察外源化学物致癌作用的常用方法及评价。

了解化学致癌的相关分子事件。第二页，共90页。

Cancer第三页，共90页。中国常见疾病死亡率排行榜

排位

疾病死亡原因

占死亡总λ数(%)

1

脑血管病

22.63%

2

恶性肿瘤

22.17%

3

心脏病

16.77%

4

呼吸系统疾病

14.09%

5

损伤、中毒

6.18%

6

消化系统疾病

3.10%

7

内分泌,营养代谢系统

2.66%

8

泌尿、生殖系病

1.49%

9

精神病

1.16%

10

神经病

0.97%第四页，共90页。TypesofHumanCarcinogensPhysicalCarcinogens

BiologicalCarcinogensChemicalCarcinogens(UV暴露,电离辐射）)(Viruses-EBV,HBV,HIV,HPV;Bacteria-H.pylori;Parasites-liverflukes,Schistosoma)(Organic,Inorganic,Fiber,Hormones)第五页，共90页。DollandPeto1981年归因于环境因素的癌死亡百分比

烟草 30%

污染 2%

酒精 3% 工业产品<1%

饮食 35%

药品和医学处置1%

食品添加剂 <1% 地球物理因素 3%

生殖和性行为7% 感染10%

职业 4%第六页，共90页。1775年——英国Pott阴囊癌（煤焦油）1895年——德国Rehn职业性膀胱癌（染料厂）1915年——日本山极和市川试验性皮肤癌（煤焦油）1922年——英国Kennway动物皮肤癌（多环芳烃）1945年——英国Case职业性膀胱癌（β-萘胺和联苯胺）研究致癌物的历史第七页，共90页。肿瘤发生指有致癌剂诱导细胞的基因突变或表观遗传变异，导致异常增生的单个克隆癌细胞的生成，从而引发致癌过程。在人体任何部位、任何组织都可以发生肿瘤。化学致癌作用(chemicalcarcinogenesis)是指化学物质引起或诱导正常细胞发生恶性转化并发展成肿瘤的过程。化学致癌物(chemicalcarcinogen)是指具有化学致癌作用的化学物质。第八页，共90页。

一、细胞癌变的多阶段学说——多因素、多基因参与的多阶段过程致癌过程有多个与肿瘤有关的基因参与；不同器官来源、不同组织类型、临床阶段以至同一种肿瘤在不同地区所见的遗传变化是不同的；多种环境致癌物、致癌因子或条件可协同作用；个体的不同遗传背景对肿瘤的发生发展有重要影响。第一节化学致癌过程第九页，共90页。化学致癌过程引发(initiation)促长(promotion)进展（progression)第十页，共90页。1．引发阶段：相对迅速的过程化学致癌物对靶细胞DNA产生损伤作用，经细胞分裂增殖固定下来，造成单个或少量细胞发生永久性不可逆转的遗传性改变，成为启动细胞。具有引发作用的化学物质，称为引发剂(initiator),单独作用一般不会引起肿瘤第十一页，共90页。2．促长阶段：特点：1）长期、慢性2）引发产生作用是不可逆改变，促长在早期阶段的改变是可逆的;3）引发必须发生在促长之前；4）只有促癌物的慢性作用而没有引发物的作用也不会引起肿瘤；具有促长作用的化学物质，称为促长剂(promoter

)。第十二页，共90页。Theeffectofatumorpromoter第十三页，共90页。exposuretoatumorinitiator(mutagenic)andatumorpromoter(nonmutagenic)第十四页，共90页。3．进展阶段：指在肿瘤形成过程中，在促进之中或之后，细胞表现出不可逆的遗传学改变，其标志为遗传不稳定性增加和恶化表现，在形态或功能代谢和行为方面逐渐表现出肿瘤的特征改变。在进展阶段起作用的物质称为进展剂(progressor)，常常也是启动剂或完全致癌剂。第十五页，共90页。前致癌物终致癌物细胞含错配碱基细胞死亡不分化的癌分化的肿瘤致癌物-DNA加合物引发的细胞正常细胞活化转移DNA结合修复DNA复制错配修复失败DNA修复促长进展外源化学物致癌过程第十六页，共90页。第十七页，共90页。化学致癌过程的主要步骤（一）肿瘤转化：①宿主酶系统的生物转化：

化学物

具有亲电或阳离子自由基的终致癌物。②终致癌物与细胞成分的相互作用，即具亲电性或自由基的反应性物质与含亲核基团的大分子包括DNA共价结合。共价结合产物称加合物(adduct)。③损伤固定化:

细胞在有DNA损伤下复制,则遗传结果可诱导发生永久性改变第十八页，共90页。Metabolicactivationofacarcinogen

黄曲霉毒素第十九页，共90页。（二）肿瘤发展:

肿瘤转化的细胞，如果在组织稳态因素(homeostaticfactors)控制下可保持休眠状态。某些不正常因素的细胞可发展至形成肿瘤。在促长物的作用下增生发展成为肿瘤。有的则有赖于宿主条件如激素依赖性肿瘤即这样。第二十页，共90页。Majorsignalingpathwaysrelevanttocancer第二十一页，共90页。二、致癌作用的影响因素

联合作用(一)致癌性的增强1增强致癌物的吸收；2增强遗传毒性致癌物的代谢活化或使其解毒减弱；3抑制DNA修复；4选择性增强DNA受损细胞的增殖。(二)致癌性的抑制1在靶器官中发生竞争性的取代；2活化作用酶系统活力发生改变；3解毒效果和受体比例发生改变第二十二页，共90页。1、蛋白质2、脂肪

3、碳水化合物

人类结肠癌的发生与低渣易消化食物有关。4、矿物质与维生素VitA缺乏宫颈癌和膀胱癌VitC和VitE降低肝、呼吸道和上消化道肿瘤营养因素第二十三页，共90页。宿主因素1、物种、品系和器官特异性2-萘胺可诱导人、犬、猴和仓鼠膀胱癌，但对小鼠仅诱发肝癌和肺癌，在大鼠和兔几乎对各器官均不诱发肿瘤。2、年龄

AFB1可对新生小鼠诱发肝脏肿瘤，对断奶小鼠则不能诱发。3、性别和内分泌平衡如2-乙酰氨基氟主要在雄性大鼠诱发肝癌；邻氨基偶氮甲苯对雌性小鼠比雄性更易诱发肝癌。如孕妇用大量的二乙基已烯雌酚可使其女儿青春期前的阴道癌危险性增高。第二十四页，共90页。4、遗传易感性与化学致癌

酒精的代谢乙醇脱氢酶(ADH)

，乙醛脱氢酶（ALDH）ADH（ADH1-ADH7），其中ADH2在酒精代谢过程中有很重要的作用。ADH2基因有3个等位基因：

ADH2*1

为野生型，表达产物缺乏乙醇脱氢酶活性，ADH2*2表达产物的生物活性是ADH2*1的40倍，ADH2*3表达产物的生物活性亦证明高于ADH2*1表达产物。第二十五页，共90页。第二节化学致癌机制

体细胞突变学说（遗传损伤机制学说）癌基因学说亲电子剂学说癌变多阶段学说非突变致癌机制第二十六页，共90页。当生物在某些化学因素、物理因素、生物因素的作用下，生物细胞中的遗传物质发生了突然的改变，引起细胞的形态与功能失调，从而导致机体的衰老。一、体细胞突变学说第二十七页，共90页。体细胞突变学说提出的证据

1）致癌物代谢活化后生成的DNA加合物诱导基因突变；2）大多数致癌物在致突变实验中呈阳性；3）DNA修复缺陷可以导致肿瘤发生；4）在许多肿瘤组织中发生染色体畸变或基因组不稳定性；5）肿瘤细胞来源于单克隆；6）癌基因的突变以及抑癌基因的突变或缺失在肿瘤细胞中普遍存在，而且突变的基因型可以通过细胞分裂传递给子代细胞。第二十八页，共90页。DNA加合物(Adduct)

外源化学物与DNA碱基共价结合形成DNA加合物DNA加合物是DNA损伤的主要形式后果：碱基突变、缺失、插入、交联、DNA链断裂等部分突变的频率或肿瘤的发生与加合物形成成正比DNA加合物作为接触生物学标志物或效应生物学标志物第二十九页，共90页。二、癌基因学说1969年RobertHuebner和GeorgeTodaro提出癌基因学说主张：细胞癌变是由于病毒基因组中的癌基因引起的,癌基因是病毒基因组的一部分。基于发现病毒致癌是由于携带有能致癌的遗传信息，即癌基因。病毒癌基因直接或经过逆转录后．整合于宿主细胞的基因组，从而发挥其致癌作用。第三十页，共90页。1、癌基因（oncogene）和原癌基因（proto-oncogene）癌基因是一类引起细胞癌变的基因。具有正常的生物学功能。如生长因子，识别因子、蛋白激酶、DNA结合蛋白等。肿瘤基因存在于所有细胞在正常状态下叫原癌基因(proto-oncogene)。2、抑癌基因（tumoursupressorgeneORanti-oncogene）肿瘤抑制基因能对抗肿瘤作用的基因，属隐性基因。己证明，肿瘤抑制基因的产品能被肿瘤蛋白激活。肿瘤抑制基因的不能表达或其产品的非活化均导致肿瘤转化。第三十一页，共90页。第三十二页，共90页。正常细胞中的c-onc必须经过激活，才能导致细胞的恶性转化癌基因活化方式有:基因突变,外源基因插入,染色体易位与基因重排,基因丢失,DNA甲基化程度降低等.

膀胱癌细胞系的ras癌基因：即第12位密码子GGC突变为GTC，使甘氨酸变为缬氨酸，于是产生能刺激细胞发生转化的异常蛋白。第三十三页，共90页。第三十四页，共90页。Kundson(1974)提出二次突变假说（twohithypothesis）视网膜母细胞瘤基因（Rb）Rb基因定位于染色体13q14家族性视网膜母细胞瘤的患儿年龄小，多见于幼儿和儿童,双侧发病的较多。

散发性可能性只有家族性的万分之一，而且发病较晚，多为单侧。第三十五页，共90页。三、亲电子剂学说Miller等(1971)提出：大多数有机致癌物需进一步活化成终致癌物(ultimatecarcinogen).终致癌物是亲电子剂,含有亲电子中心,可与细胞大分子的亲核中心共价结合,进而导致癌症.第三十六页，共90页。四、癌变的阶段学说上世纪40年代,提出：化学致癌的两阶段学说,即引发(启动,initiation)和促长(promotion)两个阶段实验证据：（1）用亚致癌剂量多环芳烃涂抹小鼠皮肤一次,20周后不发生乳头瘤或很少发生（2）但如再用巴豆油涂抹同一部位(每周2次,20周)则有约1/3～共1/2的小鼠发生乳头瘤（3）单独使用巴豆油或在涂抹致癌物之前使用巴豆油都不引起乳头瘤.癌变的阶段学说在肝,膀胱,肺,胃肠道等癌症发生和体外细胞转化试验中得到证实.第三十七页，共90页。表观遗传调控失常导致肿瘤发生细胞异常增生免疫抑制内分泌激素失衡过氧化酶体增殖剂激活受体五、非突变致癌机制第三十八页，共90页。NEWVIEWOFCANCER:“EPIGENETIC”CHANGESCOMEBEFOREMUTATIONS----《NATURE》2006“EpigeneticChangesareterriblyimportantinCancer.”

AndrewFeinberg（一）表观遗传调控失常导致肿瘤发生第三十九页，共90页。2023年3月27日40概述表观遗传(epigeneticinheritance)所谓表观遗传就是不基于DNA差异的核酸遗传。通过有丝分裂或减数分裂来传递非DNA序列信息的现象。表观遗传学(epigenetics),研究不涉及DNA序列改变的基因表达和调控的可遗传变化的，或者说是研究从基因演绎为表型的过程和机制的一门新兴的遗传学分支。2023年3月27日40第四十页，共90页。2023年3月27日41概述表观遗传学的特点：可遗传的，即这类改变通过有丝分裂或减数分裂，能在细胞或个体世代间遗传；可逆性的基因表达调节，也有较少的学者描述为基因活性或功能的改变；没有DNA序列的改变或不能用DNA序列变化来解释。2023年3月27日41第四十一页，共90页。2023年3月27日42基因转录后的调控基因组中非编码RNA微小RNA（miRNA）反义RNA内含子、核糖开关等基因选择性转录表达的调控DNA甲基化基因印记组蛋白共价修饰染色质重塑2023年3月27日42表观遗传学的研究内容：第四十二页，共90页。DNA甲基化1

是研究得最清楚、也是最重要的表观遗传修饰形式，主要是基因组DNA上的胞嘧啶第5位碳原子和甲基间的共价结合，胞嘧啶由此被修饰为5甲基胞嘧啶(5-methylcytosine，5mC)。DNA甲基转移酶：主要有四种,分为两个家族:Dnmtl和Dnmt3(还有一个Dnmt2,主要为tRNA的甲基转移,该酶有微弱的DNA甲基转移酶活性).

第四十三页，共90页。DNA甲基化的方式胞嘧啶甲基化腺嘌呤甲基化DAM(DNA腺嘌呤甲基转移酶)识别回文序列GATC,在此位置两条链的腺嘌呤N-6位置上同时甲基化，同时SAM转变为SAH(S-腺苷高半胱氨酸)在DMT(DNA甲基转移酶）的作用下，CpG（CNG,CCGG）位点胞嘧啶C5被甲基化

图1胞嘧啶甲基化过程图2腺嘌呤甲基化过程第四十四页，共90页。无论在整体动物试验还是人体肿瘤细胞中都发现表观遗传变异的一些共同的特征:（1）整个基因组的低甲基化:基因组不稳定,(细胞癌,尿道上皮细胞癌,宫颈癌等)

（2）某些抑癌基因和DNA修复基因的高甲基化:抑制基因表达(胃癌,结肠癌,乳腺癌,肺癌等众多恶性肿瘤

)(3)印记丢失:抑制和刺激生长的信号失衡（多种肿瘤）

（4）DNA甲基化和组蛋白修饰改变部分转移相关基因表达

（5）miRNA的表达水平改变表观遗传调控与环境化学污染物毒作用机制方面的研究刚刚起步。第四十五页，共90页。诱发与致癌过程相关的细胞增殖的机制主要有两种：再生细胞增殖和有丝分裂引起细胞增殖细胞增殖参与启动、促癌、发展以及转移各个过程（二）细胞异常增生第四十六页，共90页。肿瘤的发生与机体的免疫状态密切相关。肿瘤细胞可导致“免疫逃避”。一些化学致癌物具有免疫抑制作用。（三）免疫抑制第四十七页，共90页。长期使用激素可导致肿瘤发生。环境内分泌干扰物（EnvironmentalEndocrineDisrupters,EEDs)，一些外源化学物可通过影响体内激素的产生、合成、释放、转运、代谢或清除，与相应的受体结合并随之在细胞内产生效应，干扰血液中激素正常水平的维持、模拟或干扰天然激素的生理、生化作用。多氯联苯、TCDD、DDT等是明确的致癌物（四）内分泌激素失衡第四十八页，共90页。过氧化酶体是一种单层膜的亚细胞器过氧化酶体增殖剂：刺激肝脏过氧化酶体增生的物质。过氧化酶体增殖物激活受体(PPAR)PPAR-γ在许多肿瘤如乳腺癌、结肠癌、胃癌等高表达。邻苯二甲酸酯类、氯贝丁酯、异丙酯等（五）过氧化酶体增殖剂激活受体第四十九页，共90页。基因突变端粒调控与细胞永生化

细胞周期调控紊乱细胞凋亡与肿瘤的发生

细胞恶性转化是由于细胞增殖与细胞死亡调控功能失调所致。第三节化学致癌相关的分子事件第五十页，共90页。第四节化学致癌物的分类一根据对人类和动物致癌作用分类

IRAC分类（InternationalAgencyforResearchonCancer,IARC）将化学物对人类致癌性资料（流行病调查和病例报告）和对实验动物致癌性资料分为4级：致癌性证据充分；致癌性证据有限；致癌性证据不足；证据提示缺乏致癌性。第五十一页，共90页。

人类致癌 动物致癌 证据 证据组1(人类致癌物)107种充分组2(A可疑致癌物)58种有限 充分

(B可能致癌物)249种有限 不充分 不足 充分组3(目前无法分类)512种不足 不足组4(可能是非致癌物)1种没有 没有

第五十二页，共90页。全球化学品统一分类和标签制度（GloballyHarmonizedSystemofClassificationand

LabelingofChemical，GHS）是由联合国经济及社会理事会危险货物运输和全球化学品统一分类和标签制度专家委员会发布的，作为指导各国控制化学品危害和保护人类与环境的规范性文件。第1类：已知或假定的人类致癌物；第1A类：已知对人类有致癌可能；第1B类：假定对人类有致癌可能；第2类：可疑人类有致癌物。第五十三页，共90页。二按化学致癌作用模式分类遗传毒性致癌物非遗传毒性致癌物第五十四页，共90页。1）直接致癌物(directcarcinogen)：本身具有直接致癌作用，在体内不需要经过代谢活化即可致癌。各种烷化剂。2）间接致癌物(indirectcarcinogen)：本身并不直接致癌，必须在体内经代谢活化，其代谢产物才具有致癌活性。间接致癌物在代谢活化前，称为前致癌物(procarcinogen)；在活化过程的中间产物称为近似致癌物(proximatecarcinogen)；近似致癌物进一步代谢活化生成产物称为终致癌物(ultimatecarcinogen)。3）无机致癌物1遗传毒性致癌物genotoxic

carcinogen第五十五页，共90页。

1）促癌剂按照致癌物的实用性定义，致癌物是诱发肿瘤的物质，因此，虽然促癌剂单独不致癌，却可在亚致癌剂量的致癌物启动之后与机体接触即能致癌，所以认为促癌作用是致癌作用的必要条件。2非遗传毒性致癌物

non-genotoxiccarcinogen第五十六页，共90页。2）内分泌调控剂40年前就已发现雌性激素可引起动物肿瘤。以后发现干扰内分泌器官功能的物质可使这些器官的肿瘤形成增多。雌激素的致癌机理尚不清楚．但很可能与促癌作用有关；并且还涉及全身作用。第五十七页，共90页。3）免疫抑制剂

免疫抑制过程从多方面影响肿瘤形成。硫唑嘌吟、6－巯基嘌呤等免疫抑制剂或免疫血清均能使动物和人发生白血病或淋巴瘤，但很少发生实体肿瘤。第五十八页，共90页。4）细胞毒剂

导致细胞死亡的物质可引起代偿性增生，以致发生肿瘤。

氮川三乙酸使锌进入肾脏，由于锌的毒性，造成细胞死亡，结果引起增生和肾肿瘤。第五十九页，共90页。5）过氧化物酶体增生剂

已发现的过氧化物酶体增生剂有降血脂药物安妥明、增塑剂二－(2－乙基己基)邻苯甲酸酯和有机溶剂1，1，2－三氯乙烯。第六十页，共90页。第六十一页，共90页。

根据致癌作用模式分类

1.genotoxiccarcinogens直接致癌物间接致癌物无机致癌物2.non-genotoxiccarcinogens促长剂●激素调控剂细胞毒剂●过氧化物酶体增殖剂免疫抑制剂●固态物质3.未分类：美舍吡伦第六十二页，共90页。主要的化学致癌物及易感人群和诱发的肿瘤作用方式化学致癌物易感人群诱发的主要肿瘤直接作用烷化剂接受化学治疗的恶性肿瘤病人白血病间接作用多环芳烃吸烟者、食用熏制鱼肉者肺癌、胃癌

芳香胺染料工人、橡胶工人膀胱癌亚硝胺亚硝酸盐污染食物的食用者食管癌、胃癌黄曲霉毒素B1污染食物的食用者细胞性肿癌石棉纤维矿工、接触者肺癌、胸膜间皮瘤氯乙烯塑料厂工人肝血管肉瘤苯橡胶工人、染料工人白血病砷矿工、农药工人和喷撒者皮肤癌、肺癌、肝癌镍炼镍工人鼻癌、肺癌铬接触含铬气体者鼻癌、肺癌、喉癌镉接触者前列腺癌、肾癌（采自BasicPathology，1992，有改动）

第六十三页，共90页。第五节化学致癌物筛查的基本方法

定性：即该化学物能否致癌；定量：进行剂量反应关系分析，以推算其可接受的危险度的剂量，或人体实际可能接触剂量下的危险度。定性是定量的基础。第六十四页，共90页。致癌试验1、短期试验：

包括致突变试验+细胞恶性转化试验2、哺乳动物诱癌试验

短期诱癌试验+长期诱癌试验3、人群流行病学调查第六十五页，共90页。一、构效关系分析构效关系分析多是从一种同系物着手，找出该系物质化学结构中与致癌性关系最密切的构效，以及其它构效改变时所产生的影响。可靠性:样本含量，不仅要分析的同系物的总数要充分，而且其中各种类型结构变化的数目也要足够。第六十六页，共90页。①基因突变试验：鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames试验);②染色体畸变试验：体外细胞系细胞遗传学分析，小鼠骨髓微核试验，大鼠骨髓染色体畸变试验;③原发性DNA损伤：DNA加合物，链断裂，DNA修复诱导(细菌SOS反应，大鼠肝UDS诱导)，SCE试验；④体外细胞转化：二、遗传毒性试验第六十七页，共90页。三、细胞恶性转化试验

通过细胞表型的改变，反映各种理化因素的致癌性，同时，可模拟化学致癌物在体内致癌的过程，并可对发生转化的细胞做直接观察和做各种分析。细胞转化试验是致癌物检测及癌变机理研究的重要方法。

检测终点：细胞恶变

检出：遗传毒性致癌物和非遗传毒性致癌物。第六十八页，共90页。1原代细胞：金黄地鼠胚胎（SHE）细胞人成纤维细胞2细胞系：小鼠胚胎成纤维细胞系（BALB/c3T3）鼠胚胎间充质干细胞（C3H10T1/2）叙利亚仓鼠肾细胞系（BHK-21）3病毒感细胞：劳舍尔白血病病毒感染的Fisher大鼠胚胎细胞（RLV/RE）猿猴腺病毒感染的SHE细胞（SA7/SHE）

支气管上皮细胞是目前应用于细胞转化实验及癌症机制研究的重要的靶细胞。恶性转化试验所用细胞第六十九页，共90页。细胞恶性转化的判定形态学变化凋亡敏感性降低锚着独立性生长血清抗性试验刀豆蛋白A凝集试验动物体内成瘤性第七十页，共90页。第七十一页，共90页。动物体内成瘤性

判定细胞发生恶性转化的最终最可靠指标是动物体内成瘤性。一般均采用皮下注射的方法，肿瘤体积需达1cm3以上方能判定为阳性。并要结合病理检测。第七十二页，共90页。接种了发生恶性转化的BEP2D细胞的裸鼠病理切片显示肿瘤的组织学来源为上皮细胞第七十三页，共90页。细胞转化实验---动物体内致癌实验结果一致性对比表

细胞系化学物质检出有机致癌物百分率（%）检出无机致癌物百分率（%）假阳性的百分率（%）SHE（叙利亚地鼠胚胎上皮细胞）264种78947BALB/c小鼠胎儿细胞）18466877经合组织(OECD)，2006.7第七十四页，共90页。细胞转化实验的缺陷缺乏机体代谢系统对化学致癌物的代谢活化作用；缺乏上皮细胞与基底成份的相互影响，这种影响在体内上皮癌变过程中具有重要作用；缺乏类似体内的直观的形态学转化特征；体外培养条件的人为性因素，如体外快速传代可造成某些克隆的选择生长，从而影响转化结果。第七十五页，共90页。（一）哺乳动物短期致癌试验(有限体内试验)

小鼠皮肤肿瘤诱发试验20周小鼠肺瘤诱发试验30周大鼠肝转化灶诱发试验8-14周大鼠乳腺癌诱发试验 6个月适用：按照构效关系能预测靶器官的受试物。注意：1任一实验的阳性结果，其意义与长期致癌实验相当。2阴性结果意义较差。四、哺乳动物致癌试验第七十六页，共90页。化学物长期致癌试验优先原则①人体可能长期暴露于该化学物；②该化学物或其代谢物的化学结构与已知致癌物相似；③重复染毒毒性试验提示该化学物可能产生癌前病变。（二）哺乳动物长期致癌试验第七十七页，共90页。优先进行哺乳动物致癌试验如在3种遗传毒理学短期试验均得到阳性结果，可预测为遗传毒性致癌物；如在3种遗传毒理学短期试验均得到阴性结果，可预测为非遗传毒性非致癌物；如经5种遗传毒理学短期试验仍不能预测其致癌性的化学品第七十八页，共90页。1动物选择

物种和品系：要求用两种实验动物，常规选用大鼠和小鼠，在选择品系时应选择较敏感、自发肿瘤率低、生活力强及寿命较长的品系。性别：雌雄两种性别的动物。年龄：使用刚断乳的动物，以保证有足够长的染毒和发生癌症的时间，而且幼年动物解毒酶及免疫系统尚未完善，对致癌作用比较敏感。第七十九页，共90页。2剂量选择

致癌试验一般设三个试验组和一个对照组。即无作用剂量、阈剂量和发生肿瘤剂量。美国癌症研究所（NCI）推荐以最大耐受剂量(MTD)为高剂量。3动物数

每组至少有雌雄各50只动物，在出现第一例肿瘤时，每组还有不少于25只存活动物。第八十页，共90页。第八十一页，共90页。4实验期限与染毒时间(1)原则上要求长期或终生。(2)当最低剂量