血管内间充质细胞移植治疗PVS

一、研究背景植物状态（Thevegetativestate，VS）是由各种原因造成脑严重损害后出现的一种对自己和周围环境无认知的意识状态。

这种状态持续1月以上称为持续植物状态。

（persistentvegetativestate，PVS）第一页，共31页。常见病因各种原因导致的脑外伤、脑血管病、缺血缺氧性脑病等。第二页，共31页。国内报告治疗外伤或脑卒中后持续植物状态,0.5~1.0年促醒率约为35%国外报告脑外伤后持续植物状态0.5~1.0年,意识恢复率约16%。第三页，共31页。常用的综合治疗、促醒方法：全身支持治疗维持内环境稳定预防治疗并发症中西医药物促醒高压氧治疗促醒针灸、电刺激疗法等目前尚无单一的，有循证医学证据证实的，有显著疗效的治疗方法。第四页，共31页。1、我们在临床工作中发现，缺血缺氧性脑病，脑血管远端分支明显减少的PVS患者，愈后极差。第五页，共31页。2、有研究发现细胞治疗可促进血管再生改善微循环及细胞代谢，促进组织修复。

第六页，共31页。3、细胞血管内移植可促进新生血管形成，有助于坏死股骨头结构和功能的修复。第七页，共31页。4、冠脉血管内移植干细胞治疗冠心病。介入细胞治疗心肌内梗塞部位直接注射第八页，共31页。研究具备的条件1、本中心在PVS促醒方面有十年的临床经验、完善的人才梯队及规范诊疗流程。第九页，共31页。2、完善的细胞分离，培养技术第十页，共31页。3、成熟的DSA技术第十一页，共31页。二、研究目的及意义

探讨人脐带MSCs移植在促进脑血管闭塞或远端分支明显减少的PVS患者的脑血管新生及脑代谢变化中的作用。

为PVS的治疗，特别是对因脑血管分支明

显减少的PVS的治疗提供一种新途径。第十二页，共31页。三、研究方法（一）临床资料收集（二）治疗方法（三）疗效评定第十三页，共31页。（一）临床资料收集1、植物状态诊断标准(2001年南京PVS诊断标准)

①认知功能丧失，无意识活动，不能执行指令；②保持自主呼吸和血压；③有睡眠-觉醒周期；④无理解和语言表达能力；⑤能自动睁眼或在刺激下睁眼；⑥可有无目的性的眼球跟踪运动；

丘脑下部及脑干功能基本保存；

植物状态持续1个月即为PVS。第十四页，共31页。2、病例纳入标准

①符合PVS临床诊断标准。②年龄范围为15~50岁。③MRA提示部分脑血管闭塞或远端分支减少。④生命体征稳定，并发症控制良好。⑤患者家属知情同意，自愿受试。

第十五页，共31页。3、排除病例标准

①合并有心、肺、肝、肾和造血系统、内分泌系统等原发性疾病；②有动脉硬化、血管迂曲者；③出血倾向及中重度高血压患者；④对造影剂和麻醉剂过敏者；⑤一般情况差，生命体征不稳.

第十六页，共31页。（二）治疗方法1、常规治疗

（对照组及实验组）药物：单唾液酸四已糖神经节苷脂，开始剂量为每日100mg静脉滴注，持续一疗程后改为维持剂量（每日40mg）；针灸：取百会、人中、内关、合谷、三阴交、涌泉等穴位醒脑开窍；高压氧：持续的高压氧，压力在1.75～2.00ATA，每次90分钟。上述治疗每天1次，15次为1疗程。休息3天，再继续下一疗程。共6疗程。第十七页，共31页。2、脐带MSCs移植治疗（实验组）

（1）脐带MSCs准备:细胞总数>5-10×107,细胞比例>90%,CD34,CD44,CD90,CD105,CD133,KDR等。（二）治疗方法第十八页，共31页。（2）穿刺点常规消毒后，以Seldinger技术穿刺右股动脉成功后，置5F动脉鞘，选5F单弯造影管，分别行双侧颈内动脉造影，路途下导管超选入动脉，注入人脐带MSCs4～6ml，术后平卧72h。（二）治疗方法第十九页，共31页。第二十页，共31页。第二十一页，共31页。（三）疗效评定1、意识障碍评估

PVS疗效评分量表（2011年修订版）一、肢体运动0-无1-刺激有屈伸反应2-刺激可定位躲避☆3-可简单摆弄物体4-有随意运动，能完成较复杂的自主运动二、眼球运动0-无1-眼前飞物，有警觉或追踪2-眼球持续追踪☆3-固定注视物体或伸手欲拿4-列举物体能够辨认第二十二页，共31页。三、听觉功能0-无1-声音刺激能睁眼2-对声音刺激能定位，偶尔能执行简单指令☆3-可重复执行简单指令4-可完成较复杂指令四、进食0-无1-能吞咽2-能咀嚼，可执行简单指令☆3-能进普食4-自动进食五、情感0-无1-有时有兴奋表现（呼吸、心率增快）2-对情感语言出现流泪、兴奋、痛苦等表现☆3-对情感语言有较复杂的反应4-正常性的情感反应第二十三页，共31页。2、PVS疗效评定根据PVS疗效评定标准（意识恢复标准）评定。Ⅰ-植物状态：疗效：无效：提高0-2分；好转：提高≥3分；显效：提高≥5分；Ⅱ-初步脱离植物状态（相当于MCS）Ⅲ-脱离植物状态客观检查：EEG、SEP；MRI，MRA/MRS等。（三）疗效评定第二十四页，共31页。（四）颅脑MRA及MRS分析对照组及细胞组均在治疗前及治疗后3月行MRA及MRS检查。病例检查采用超导型磁共振仪(1.5T，飞利浦公司)进行MRI／MRS一体化扫描。全部患者行常规MRI、MRA和单体素H-MRS扫描。常规MRI序列包括轴、矢状位T1WI、T2WI和FLAIR，层厚5mm，以明确脑部损伤情况。H-MRS扫描分析指标NAA、Cho、Cr。测量每种代谢物对应化学位移处的波峰面积积分，作为化合物浓度的相对定量值，并计算NAA／Cr、Cho／Cr值。第二十五页，共31页。1、UCMSCs移植后PVS疗效评分较移植前有提高

表1UCMSCs移植前后PVS疗效评分对比n治疗前PVS评分治疗后PVS评分对照组203.3±2.35.4±3.6细胞组203.6±1.98.1±3.3*,#四、结果*，治疗3月后，细胞组与对照组比较P<0.05;#，细胞组治疗前后比较P<0.05。第二十六页，共31页。2、治疗后3月与治疗前比较，细胞移植组血管分支较治疗前明显增多，而对照组血管分支减少或无明显变化。A、B干细胞组，治疗前及治疗3月后；C、D对照组，治疗前及治疗3月后。第二十七页，共31页。

UCMSCs移植治疗前后脑血管变化（例）

N血管无变化或减少血管增加细胞组20137*对照组20182*：治疗3月后，细胞组与对照组比较P<0.05;第二十八页，共31页。UCMSCs移植治疗前后MRS对比n治疗前治疗后NAA/CrCho/CrNAA/CrCho/Cr细胞组201.85±0.672.08±0.462.84±0.85*#1.98±0.68*#对照组202.00±0.972.16±0.661.86±0.572.05±0.523、治疗后3月与治疗前比较，细胞组的脑代谢情况好于对照组