药物分析第3章药物鉴别

内容光谱鉴别法2色谱鉴别法3其它鉴别法4化学鉴别法1第一页，共34页。概述目的：鉴别药物真伪。化学反应仪器分析测定物理常数综合分析第二页，共34页。药物鉴别特点已知物确证试验1鉴别试验为个别分析，非系统分析2通常采用不同方法鉴别，综合分析3原料药鉴别项下试验项目为3～4有的仅1～2个，制剂鉴别项目一般比原料药少4第三页，共34页。药物鉴别方法方法化学鉴别法光谱鉴别法色谱鉴别法其它鉴别法第四页，共34页。第一节化学鉴别法Ch.P、USP一般鉴别试验不同的称号JP、BP定性反应第五页，共34页。一、一般鉴别试验（generalidentificationtest）（一）概念、特点及试验项目以药物的化学结构及其物理化学性质为依据，通过化学反应来鉴别药物真伪的。无机药物：根据其组成的阴离子和阳离子的特殊反应，并以药典附录III项下的一般鉴别试验为依据。有机药物：采用典型的官能团反应。第六页，共34页。一般鉴别试验的项目（2015版药典有35项）。一般鉴别试验仅供确认单一的化学药物。一般鉴别试验仅供确认单一的化学药物，如为数种化学药物的混合物或有干扰物质存在时，除另有规定外，均不适用。通过一般鉴别试验只能证实是某一类药物，而不能证实是哪一种药物。第七页，共34页。（二）化学鉴别方法

合适试剂气体产生荧光出现沉淀生成颜色改变真伪药物有效成分的有无判断衍生物熔点第八页，共34页。1、干法将供试品加适当试剂在规定的温度条件下（一般是高温）进行试验，观测此时所发生的特异现象。（1）焰色试验：常用干法。利用某些元素所具有的特异焰色，可鉴别它们为哪一类盐类药物。方法：取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，使火焰显出特殊的颜色。（2）加热分解：在适当的温度条件下，加热使供试品分解，生成有特殊气味的气体。第九页，共34页。2、湿法系指将供试品和试剂在适当的溶剂中，于一定条件下进行反应，发生易于观测的化学变化，如颜色、沉淀、气体、荧光等。（1）显色反应鉴别法系指供试品溶液中加入适当的试剂溶液，在一定条件下进行反应，生成易于观测的有色产物。在鉴别试验中最为常用的反应类型有：第十页，共34页。1）三氯化铁呈色反应——酚羟基或水解后产生酚羟基；2）异羟肟酸铁反应——多为芳酸及其酯类、酰胺类；3）茚三酮呈色反应——脂肪氨基；4）重氮化-偶合显色反应——芳伯氨基或能产生芳伯氨基；5）氧化还原显色反应及其它颜色反应。第十一页，共34页。（2）沉淀生成反应鉴别法常用的这类反应有：1）与重金属离子的沉淀反应——在一定条件下，药物和重金属离子反应，生成不同形式的沉淀；2）与硫氰化铬铵（雷氏盐）的沉淀反应——多为生物碱及其盐，具有芳香环的有机碱及其盐；3）其它沉淀反应。第十二页，共34页。（3）荧光反应鉴别法常用的荧光发射形式有以下类型：1）药物本身可在可见光下发射荧光；2）药物溶液加硫酸使呈酸性后，在可见光下发射荧光；3）药物和溴反应后，于可见光下发射出荧光；4）药物和间苯二酚反应后，发射出荧光及药物经其它反应后，发射荧光。第十三页，共34页。（4）气体生成反应鉴别法1）大多数的胺（铵）类药物、酰脲类药物以及某些酰胺类药物，可经强碱处理后，加热，产生氨（胺）气；2）化学结构中含硫的药物，可经强酸处理后，加热，发生硫化氢气体；3）含碘有机药物经直火加热，可生成紫色碘蒸气；含醋酸酯和乙酰胺类药物，经硫酸水解后，加乙醇可产生乙酸乙酯的香味。第十四页，共34页。芳香第一胺类的鉴别橙黄到猩红色沉淀供试品稀盐酸1ml0.1mol/L亚硝酸钠碱性β-萘酚试液（三）化学鉴别法实例第十五页，共34页。加三氯化铁试液1滴即显紫色供试品加稀盐酸即析出白色水杨酸沉淀分离沉淀在醋酸铵试液中溶解水杨酸盐的鉴别第十六页，共34页。苯甲酸盐取供试品的中性溶液，加三氯化铁试液，即生成赭色沉淀；加稀盐酸，变为白色沉淀。取供试品，置干燥试管中，加硫酸后，加热，不炭化，但析出苯甲酸，在试管内壁凝结成白色升华物。第十七页，共34页。钠盐的鉴别铂丝盐酸无色火焰中燃烧供试品中性溶液醋酸氧铀锌试液火焰即显鲜黄色发生黄色沉淀第十八页，共34页。硫酸盐的鉴别白色沉淀分离沉淀不溶解供试品溶液白色沉淀分离沉淀溶解加入氯化钡试液加入醋酸铅试液第十九页，共34页。二、专属鉴别试验（specificidentificationtest）根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性的不同，选用某些特有的灵敏定性反应，来鉴别药物真伪的。是证实某一种药物的依据。第二十页，共34页。第二节光谱鉴别法一、紫外光谱鉴别法

1、原理、特点及适用范围原理：有机药物具有能吸收紫外可见光的基团，则显示特征的吸收光谱，不同结构的物质可产生不同的紫外－可见吸收光谱特点：具有一定的专属性，仪器普及率高，操作简单，应用范围广。缺点是光谱较简单，曲线性状变化不大，专属性小于IR。第二十一页，共34页。适用范围：含有芳环或共轭双键的药物在紫外光区有特征吸收，含有生色团和助色团的药物在可见光区有吸收。2、常用的方法对比吸收曲线一致性对比最大吸收波长和相应吸光度的一致性对比吸收系数的一致性对比最大、最小吸收波长和相应吸光度比值的一致性经化学处理后，测定其反应产物的吸收光谱特性。第二十二页，共34页。对比最大吸收波长和同时测定最小吸收波长的一致性规定一定浓度的供试品在最大吸收波长处的吸收度规定吸收波长和吸收系数法规定吸收波长和吸收度比值法第二十三页，共34页。二、红外光谱鉴别法特点：能反映出药物分子的结构特点，专属性强，准确率高。不单独使用本方法进行鉴别。方法：标准图谱对照法试样制备方法：压片法、糊法、膜法、溶液法第二十四页，共34页。第三节色谱鉴别法进行鉴别比移值Rf保留时间色谱鉴别法第二十五页，共34页。原理：不同物质在不同色谱条件下，产生各自的特征色谱行为。与对照品在相同条件下进行色谱分离，并比较其保留行为和检测结果是否一致来验证真伪。方法：（1）薄层色谱鉴别法在实际工作中，一般采用对照品（或标准品）比较法，要求供试品斑点的Rf值应与对照品斑点一致。第二十六页，共34页。（2）高效液相色谱鉴别法和气相色谱鉴别法一般规定按供试品含量测定项下的高效液相色谱条件进行试验。要求供试品和对照品色谱峰的保留时间应一致。含量测定方法为内标法时，可要求供试品溶液和对照品溶液色谱图中药物峰保留时间与内标物峰的保留时间比值应相同。第二十七页，共34页。(Rf的最佳范围0.3-0.5,可用范围0.2-0.8)薄层色谱法比移值(Rf)——定性参数原点到斑点中心距离原点到溶剂前沿距离Rf==ll0原点•l0l1l2前沿第二十八页，共34页。1、2——样品3——标准品前沿原点

•••1.5-2.0cm2.0cm1230.5-1.0cm第二十九页，共34页。hW1/20.5h0.607hW0tt0tR第三十页，共34页。鉴别试验条件（一）溶液的浓度溶液的浓度主要指被鉴别物质的浓度，其大小影响结果的判断。如化学法中要观察沉淀、颜色；UV法中λmax,A、（二）溶液的温度温度过高可使产物分解，导致颜色变浅，甚至观察不到结果。第三十一页，共34页。（三）溶液的酸碱度使反应物处于活化状态、反应产物处于稳定可以观察状态。（四）试验时间有机化合物的化学反应较慢，需要一定的反应时间和条件。（五）干扰成分的存在药物制剂的鉴别，其它成分则会干扰检查结果的现象观察。第三十二页，共34页。第四节：其它鉴别法一、旋光法二、生物学鉴别法:是利用微生物或实验动物鉴别法第三十三页，共34页。仪器鉴别方法增加快（2:1）

UV,IR,HP