探究培养液中酵母菌种群数量的变化

探究培养液中酵母菌种群数量的变化第1页，共35页，2023年，2月20日，星期五基础回扣1、酵母菌酵母菌是单细胞真核生物。生长周期短，增殖速度快，还可以用酵母菌作为实验材料研究（探究酵母菌的呼吸方式，判断细胞的死活探究膜的透性）第2页，共35页，2023年，2月20日，星期五2、种群数量的变化

种群数量的变化包括增长、波动、稳定、下降等“S”型曲线有一个K值，即环境容纳量。

种群数量的增长也受到许多环境因素（如温度、培养液的pH、培养液的养分种类和浓度、代谢产物等）的影响。第3页，共35页，2023年，2月20日，星期五探究培养液中酵母菌数量的动态变化

1．实验原理：（1）在含糖的液体培养基（培养液）中酵母菌繁殖很快，迅速形成一个封闭容器内的酵母菌种群，通过细胞计数可以测定封闭容器内的酵母菌种群随时间而发生的数量变化。（2）养分、空间、温度和有毒排泄物等是影响种群数量持续增长的限制因素。2．实验目的：（1）通过探究培养液中酵母菌种群数量的变化，尝试建构种群增长的数学模型。（2）用数学模型解释种群数量的变化。（3）学会使用血球计数板进行计数。第4页，共35页，2023年，2月20日，星期五探究过程1．提出问题：2．作出假设：3．设计实验：4．进行实验：5．分析结果和表达交流：6．得出结论：培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？酵母菌在开始一段时间呈“J”型增长，随着时间的推移，由于资源和空间有限，呈“S”型增长。连续培养7天，每天用显微镜和血球计数板计数出酵母菌种群密度各小组汇报实验结果，结合前几天的结果，画出酵母种群增长的曲线图并进行分析。酵母菌在开始一段时间呈“J”型增长，但随着时间的推移，由于资源和空间有限，将呈“S”型增长，并最终将全部死亡。第5页，共35页，2023年，2月20日，星期五3．设计实验：①将10mL无菌马铃薯培养液或肉汤培养液加入试管中；②将酵母菌接种入试管中的培养液中混合均匀；③将试管在28℃条件下连续培养7d；④每天取样计数酵母菌数量；⑤分析结果，得出结论。是否设置对照组和多组重复实验？为什么要连续培养？如何取样计数？记录表怎样设计？计数时有哪些注意事项？第6页，共35页，2023年，2月20日，星期五（1）血球计数板构造：实物图正面图纵切面图计数室，2个滴液处第7页，共35页，2023年，2月20日，星期五计数室计数室（中间大方格）的长和宽各为1mm，深度为0.1mm，其体积为______mm3，合_________mL。1mm0.11×10-4血球计数板:一种专门计数较大单细胞微生物的仪器第8页，共35页，2023年，2月20日，星期五血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器。一个特制的可在显微镜下观察的玻片大方格中方格小方格计数室平台上有九个大方格的方格网，中间大方格为计数室计数室放大第9页，共35页，2023年，2月20日，星期五计数室计数室分为25中格（双线边）每一中格又分为16小格计数室是由___________个小格组成25×16=400第10页，共35页，2023年，2月20日，星期五如何计数？五点取样法样方法每mL培养液中酵母菌数量==A(平均每个中格酵母细胞数)×25×104×稀释倍数A1A2A5A3A4第11页，共35页，2023年，2月20日，星期五计数室有两种规格：一是分为16个中方格，每中方格中有25个小方格；另一种是分为25个中方格，每中方格有16个小方格。两种都共有400个小方格。计数室计数时用25中格的计数板，要按对角线方位，取左上、左下、右上、右下、中央5个中格(即80小格)的酵母菌数。如果是16中格计数板,则只数四角上的四格酵母菌数（即100小格）。然后求出一个小方格的细胞平均数(N)放大放大第12页，共35页，2023年，2月20日，星期五对于压在小方格界线上的酵母菌应取相邻两边及顶角计数。第13页，共35页，2023年，2月20日，星期五计算公式

(1)16格×25格的血球计数板计算公式:

酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数

(2)25格x16格的血球计数板计算公式:

酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数

第14页，共35页，2023年，2月20日，星期五例:酵母菌的计数通常用血球计数板进行，血球计数板每个大方格容积为0.1mm3，由400个小方格组成。现对某一样液进行检测，如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应先

后再计数。若多次重复计数后，算得每个小方格中平均有5个酵母菌，则10mL该培养液中酵母菌总数有

个。2×108稀释应用：第15页，共35页，2023年，2月20日，星期五例检测员将1mL水样稀释10倍后，用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由25×16＝400个小格组成，容纳液体的总体积为0．1mm3。

现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e5个中格80个小格内共有蓝藻n个，则上述水样中约有蓝藻

个／mL。

5n×105

第16页，共35页，2023年，2月20日，星期五第1天第17页，共35页，2023年，2月20日，星期五第4天第6天第18页，共35页，2023年，2月20日，星期五第7天死亡第19页，共35页，2023年，2月20日，星期五酵母菌数量变化记录表第20页，共35页，2023年，2月20日，星期五计数时有哪些注意事项？①从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震荡几次；如果酵母菌浓度过大，应先稀释。②对于压在中格界线上的酵母菌，一般只取相邻两边及夹角计数；③对于已经出芽的酵母菌，芽体达到母细胞大小一半时，即可作为两个菌体计算；已死亡的酵母菌不计数※。④每个样品一般计数三次，取其平均值。第21页，共35页，2023年，2月20日，星期五培养液中酵母菌种群数量的变化第22页，共35页，2023年，2月20日，星期五第23页，共35页，2023年，2月20日，星期五液体培养基

马铃薯培养液

在计数前，还应有哪些步骤？需注意些什么？培养条件，28℃，连续培养7天计数培养液配制灭菌接种培养需进行灭菌，防止杂菌干扰，造成试验数据错误随机取样，多次计数，取平均值第24页，共35页，2023年，2月20日，星期五试管编号培养液/mL无菌水/mL酵母菌母液/mL温度（℃）A10—0.128B10—0.15C—100.128针对“培养液中酵母菌种群数量的动态变化”，有人提出了新的问题，某同学按下表完成了有关实验。第25页，共35页，2023年，2月20日，星期五温度、营养物质对酵母菌生长的影响第26页，共35页，2023年，2月20日，星期五试管编号培养液/mL无菌水/mL酵母菌母液/mL温度（℃）A10—0.128B10—0.15C—100.128第27页，共35页，2023年，2月20日，星期五以计数酵母菌为例

(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.

(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.

(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片.

(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.

血球计数板的使用第28页，共35页，2023年，2月20日，星期五第29页，共35页，2023年，2月20日，星期五(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.

(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和左方线上的酵母细胞(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数.第30页，共35页，2023年，2月20日，星期五3.计算公式

(1)16格×25格的血球计数板计算公式:

酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数

(2)25格x16格的血球计数板计算公式:

酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数

第31页，共35页，2023年，2月20日，星期五怎样进行酵母菌的计数？

对一支试管中的培养液(可定为10ml)中的酵母菌逐个计数是非常困难的，可以采用抽样检测的方法：先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入，多余培养液用滤纸吸去，稍待片刻，待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部，将计数板放在载物台的中央，计数一个小方格内的酵母菌数量，再以此为根据，估算计算中的酵母菌总数，盖玻片下，培养液厚度为0.1mm，可算出10ml培养液中酵母菌总数的公式：2.5×104x(x为小方格内酵母菌数)

第32页，共35页，2023年，2月20日，星期五从试管中吸出培养液进行计数之前，建议你将试管轻轻振荡几次。这是为什么？本探究需要设置对照吗？如果需要请讨论对照组应怎样设计和操作；如果不需要，请说明理由。需要做重复实验吗？目的是使培养液中的酵母菌均匀分布，防止酵母凝聚沉淀,以保证估算的准确性，减少误差。不需要，本实验旨在探究培养液中酵母菌在一定条件下的种群数量变化，只要分组实验，获得平均数值即可。

不用重复，只要分组实验获得平均值即可。第33页，共35页，2023年，2月20日，星期五5、怎样记录结果？记录表怎样设计？如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应采取怎样的措施？第1天第2天第3天第4天第5天第6天第7天第1组第2组第3组------第n组平均值应该进行稀释，然后再进行计数。一般样品稀释度要求每小格内约有5～10个菌体为宜。只计数相邻两边及其顶角的酵母菌数。7对于压在小方格界线上的酵母菌，应当怎样计数？第34页，共3