复旦生化课件答疑库

糖类化合物有哪些生物学功能 答葡萄糖溶液为什么有变旋现象 答什么是糖蛋白？有何生物学功能 答D1→48~12β 泼，这是因为双键减弱了与之连接的碳原子与氢原子之间的C-HL?。后者经分子重排、双键共轭化，形成较稳定LOO?。LOO?LHL?。这样就形成了链式反应，导致多不饱和脂肪酸发生脂质过氧化D、胆汁酸（包括胆酸、鹅胆酸和脱氧胆酸）pI-pHpH-pI甘氨酸是乙酸甲基上的氢被氨基取成的，为什么乙酸羧基的pKa10.（1）Ala，Ser，Phe，Leu，Arg，Asp，LysHispH3.911.（1）2020次，有可能形成多少种不同的肽链？（2）202020在大多数氨基酸中，-COOHpKa2.0，-NHpKa都接近9.0。但是，在肽链中，-COOHpKa3.8，而-NH3＋pKa值为7.8。你能解释这种差别吗？答案pH7.0；（2）pH7.0；(3)pH7.0；(4)多聚精氨酸pH13.0；（5）pH1.5；(6)pH7.0；(7)多聚羟脯氨pH7.0.-答案 17.（1）除共价键外，维持蛋白质结构的主要非共价键有哪几种？（2）蛋白质组学 组学研究更 性，请从蛋白质分子和DNA分子的复杂18.简要叙述蛋白质形成寡聚体的生物学意义 （功能位，协同效应，稳定性 返回试题[答]（1） 的外壳有2130多个亚基）。（3）形成功能部位。不少寡聚蛋白的单 19.血红蛋白（HbF）在相当于成年人血红蛋白（HbA）链143残基位置Ser,His143之间的空隙。（1）为什么2，3-二磷酸甘油酸（2，3-BPG）同脱氧HbAHbF？（2）HbF2，3-BPGHb蛋白质变性后，其性质有哪些变化 答为什么大多数球状蛋白质在溶液中具有下列性质。（1）pH淀。（3）pH SDS凝胶过滤时，蛋白质分子越小，洗脱速度越慢，而在SDS中，蛋白质分子一种蛋白质的混合物在pH6的DEAE-纤维素柱中被分离，用pH6稀盐缓冲液可以洗脱C，用pH6的高盐缓冲液，B和A依次被洗脱，用凝胶过滤测定得A的Mr240000，B的Mr120000，C的Mr60000SDS带。请分析实验结果 答简述酶与一般化学催化剂的共性及其特性 答Vmaxv-[S]图，双倒数图，v-v/[S]作图，[S]/v-[S]VmaxKm在酶蛋白分子中组氨酸的侧链咪唑基pK值为6.0~7.0，在生理条件下，一His某酶的化学修饰实验表明，GluLyspHpHGluLys当胰蛋白酶102位的Asp突变为Ala时将对该酶（1）与底物的结合和（2）对 TPCKHis（1）为胰蛋白酶设计一TPCK37.36.TPCK酶的活性部位结合，却不被酶作用，TPCK位中的某个残基反应，形成稳定的共价键。TPCKCH2-Cl。其次His、AspSerPheTyrAsp189，ArgLys根据上述分析可知：（1）TPCKTPCKCH2—ClNH—CH—CO—保留，其余部ArgLysR；（2）检验该抑制剂的专DNA[A]=0.30，[G]=0.24，（1）请推测RNA 有1014个细胞，每 细胞的DNA含量为6.4×109个碱基对。试 DNA的总长度是多少？是 -地球之间距离（2.2×109公里）的多少倍？已知双链DNA每1000个核苷酸重1×10-18g，求的DNA的总质量。43.（a）3×107DNA；（b）DNA（c）DNADNARNA？DNA？DNARNARNA2′羟基，但为什么不形成２′,５′－磷酸二酯键？Tm？TmTmDNA个平面上配对。Watson和Crick提出，腺嘌呤只与胸嘧啶配对，鸟嘌呤只与胞DNA加入少量的乙醇呢 答为什么相同相对分子质量的线状DNA比共价闭合的环状DNA能结合的溴DNA？DNAUBBAB12CC应中羟化酶的辅助因子之一；②参与胆固醇的转化，维生素C7-α-羟化酶的辅酶，促进胆固醇转变成胆汁酸；③参与芳香族氨基酸的代谢，维生素CGSH收；④保护维生素A、EBGcAMPCa++腺苷酸环化酶所催化的反应如下：ATP→cAMP+PPi，其平衡常数Keq=0.065，如果ATP水解成AMP+PPi，△Go′=-33.44kJ/mol，试计算cAMP水解成AMP的△Go′是多少？ 25℃，pH7.00.1mol/L6-磷酸溶液加△Go′为+7.5kJ/mol，求反应后葡萄糖-6-磷酸和葡萄糖-1多少 答1CO2H2O，可产生多少摩尔ATP？ATP？1CO2H2OATP稀醇 酸 答ATP分离的完整线粒体悬浮液中有过量的ADP、O2和谷氨酸，谷氨酸粒体基质中可产生NADH和FADH2，如果在该体系中加入下列物质，会对氧的消耗和ATP的合成产生什么影响？(1)二 酚，(2)二酚，同时加入HCN，(3)加入寡霉素，然后加入 14C三，该同位素碳可作为CO2释放？已知磷酸稀醇式酸转变成酸时，△G0'为31.38kJ/mol，计算在标准状况下，当[ATP]/[ADP]=10时，磷酸稀醇式酸和酸的浓度比。计算由2摩 酸转化成1摩尔葡萄糖需要提供多少摩尔的高能磷酸化物 答CO2H2O1CO2H2OATP？EMPATPATPknoop氧化学说的异同 答计算一分子硬脂酸彻底氧化成CO2和H2O，产生的ATP分子数，并计算每克 （复旦大学2000年考研题 答LDLHDLCoACoA生成丙二酸CoA。丙二酸CoA可促进脂肪酸合成，抑制肉碱-酰基CoA返回试题[答]乙酰-CoA羧化酶在脂肪酸合成中将乙酰-CoA转化为丙二酸-CoA，后者是脂肪酸合成的重要起始物之一，乙酰-CoA酸合成的主要产物，软脂酰-CoACoA度增高，ATPCoA，同时成为乙酰-CoACoA肾上腺素皮质激素激发的磷酸化修饰的抑制。它的活化型为乙酰-CoACoA是促进脂肪酸合成，软脂酰-CoA成，软脂酰-CoA简述载脂蛋白（apo1ipoprotein）的分类、组成特点及其主要功能。HMG-CoAHMG-CoAHMG-CoA 尔的丙氨酸、乳酸 酸完全氧化，哪种物质产能更高 大学2002研题 答尿素循环和三之间有哪些联系 答α1H2OATP？单克隆抗体是通过杂交瘤技术的。杂交瘤细胞是经抗原免疫的B细胞和陷（HGPRT-）的肿瘤细胞和正常B细胞融合后在HAT（次黄嘌呤、氨甲蝶呤、 怎样确定双向是DNA的主要方式，以及某些生物的DNA采取单向复 91.DNA需要RNA引物的有哪些 答已知大肠杆菌长度为1100μm，它的是在一世代大约40分钟内通过一15N14NDNA，并用平衡沉DNA14N-DNA14N－15NDNADNARNADNA要说明原核生物的转录过程 答RNARNA何异同 答细胞内至少要有几种tRNA才能识别64个子？1）mRNA肽链的合成是从甲酰甲硫氨酰-tRNA酰-tRNA（3）SD链合成的起始依赖于帽子结构。（4）mRNAtRNAtRNAmRNA（5）在原核生物蛋白质合成的起始阶段，不需ATP，ATP。（6）参与真核生物蛋白质合成起始阶或者从cDNA库中获取。（2）需要在真核生物的上游加入SD序列。（3）论述遗 的特点 答1）遗传为三联体：模板从mRNA5′端的起始子开始，到3′端的终止称为开放读码框架。在框架内每3个碱基组成1 子，决定1个氨酸。（2）遗 的种类：遗 共64个，其中61 子分别代表各氨基酸。35AUG，除了代表甲硫蛋氨酸外，还是肽链合成的起始信号。（3）遗传的连续性：对mRNA分子上3去，直到出现终止为止。mRNA上碱基的插入和缺失，可导致框移突变遗传的简并性：有61个子代表20种氨基酸，每个子只代表2～4个子，这种由几个子编码同一氨基酸的现象称为简并性。从表上可看出子的第3位碱基通常是简并 此不严格的配对关系称为摆动性。如丙氨酰-tRNA反子的第1位碱基I可以与子第3位的A、C或U配对。遗传 的摆动性使一种tRNA可以识别 外。如UAG不代表终止子，而代表色氨酸；CUA不代表亮氨酸，而代表苏氨酸。（7）遗传的防错系统：由于遗传的简并性，有4个出，只要遗传的第二位是U，则第一位和第三位不论怎么变化，其编码的氨基酸总是疏水性的，如第二位是C，则其编码的氨基酸是非极性的或极性不带电荷的，若第二位为A或G，则编码的氨基酸R基是亲水性的，第一位是A或C，第二位是AG，RAG的氨基酸RmRNAmRNA么 答如果E.ColiDNA的75%可用来编码蛋白质，假定蛋白质的平均相对分子质量为60000，以三个碱基编码一个氨基酸计算，（1）若该 DNA大约能编码2000种蛋白质，求该DNA的长度？（2）该 DNA的相对分子质量大约是多少？（氨基酸残基的平均相对分子质量是120，核苷酸对的平均相对分子质量是640）。IF-2、EF-Tu、EF-GRF-3是什么 答110.（1）合成由600个氨基酸残基组成的大肠杆菌某蛋白时需水解多少个磷酸成氨基酸、mRNA、tRNA或核糖体所需的能量）。 mRNA（RNA） 一个如何产生多种不同类型的mRNA分子？ 什么是组文库（genomiclibrary）？构建组文库涉及哪些基本过在lac子中 的突变，（2）lacI的突变启动子的突变将会对结 表达产生什么影响。概述原核生物表达调控的特点。简答真核生物表达的调控方式。[DNA点 答什么是DNA重组（克隆）？简述DNA重组的步骤及其用途。DNADNA子的作用。与免疫保护、发育、形态发生、衰老、移植等均与糖蛋白有关 返回试2.[D-吡喃葡萄糖在乙醇溶液或吡啶溶液中可以形成结晶，得到两种比旋光度不同的D-葡萄糖，前者的比旋光度为+113o，后者的比旋光度为+19o。如果由+113o降至+52o，后者由+19o升到+52o，随后稳定不变。葡萄糖溶液结构变为环状结构时，C1光异构体。一个叫α-D-吡喃葡萄糖，另外一个叫β-D-吡喃葡萄糖，这两种物衡，其比旋光度为+52o 返回试3.[答]糖蛋白是广泛存在与动物、植物和微生物中的一类含糖基（或糖衍生不一，小的仅为1个单糖，复杂的有10~20个单糖分子或其衍生物组成的。有铁蛋白等均属于糖蛋白。（5）决定血液的类型：决定血型的凝集原A,B,O以糖转运和保护等方面普遍起作用。（7）一些凝集素属于糖蛋白 返纤维素是线性葡聚糖，残基间通过β（1→4）糖苷键连接的纤为二糖单位。纤1800，使链采取完全伸展的构象。相1~464~3612~2416、1814C9C10△9，其余双键位于△9[答]多不饱和脂肪酸分子中与两个双键相连接的亚甲基（-CH2-）上的氢比较C-HL?。后者经分子重排、双键共轭化，形成较稳LOO?。LOO?LHL?。这样就形成了链式反应，导致多不饱和脂肪酸发生脂质过氧化。[答]激素类：雄激素、雌激素、孕酮、糖皮质激素和盐皮质激素。非激素类：维生素D、胆汁酸（包括胆酸、鹅胆酸和脱氧胆酸）。 q=pI-pHq电荷；若qqq=pH-pIq值时，氨基酸带正电荷；qpI-pHpH6.0[答]（1）Ala,Ser,PheLeupI6PH3.9所以向阴极移动，但彼此不能分开；HisArgpI7.610.8，在pH3.9其他向阴极移动的氨基酸分开；AsppI3.0,PH3.9[答]（1）20！≈；（2）2020≈COO-稳定，使羧基成为pKapKa[答]（1）多聚亮氨酸的R（2）异亮氨酸（3）pH7.0时，所有精氨酸的RpH13.0时，精氨酸的R基团不带电荷，并且-碳位上没有分支，所以形成-螺旋。（5）在pH1.5时，谷氨酸的R基团不带电荷，并且-碳位上没有分支，所以形成-螺旋。（6）因为苏氨酸-碳位上有分支，所以不能形成-螺旋。（7）（Mr）的增加，表面积与体积的比率也就是亲水rMrr2r3[答]肌红蛋白以单体的形式存在，血红蛋白以四聚体的形式存在，血红蛋白分 （1）水化膜：蛋白质颗粒表面大多粒的相互，防止溶液中蛋白质的沉淀析出。（2）同种电荷：在pH≠pIpH＞pI，pH<pI，蛋白沉淀时，必须在0～4℃低温下进行，用量一般10倍于蛋白质溶液的[答]（1）除共价键外，维持蛋白质结构的主要非共价键有：力相互作用）、疏水作用、盐键、氢键。（2）DNA是由4种元件构成的大分子，蛋白质是由20多种元件构成的大分子，显然，蛋白质的分子结构更具复杂性，DNA复杂，且结构和功能受到复杂的调控，DNA白的研究更具复杂性和性。 的外壳有2130多个亚 [答]（1）由于2，3-BPG是同脱氧HbA中心空隙带正电荷的侧链结合，而脱氧HbF缺少带正电荷的侧链（143His残基），因此2，3-BPG是同脱氧HbA的结合比同脱氧HbF的结合更紧。（2）2，3-BPG稳定血红蛋白的脱氧形HbF2，3-BPGHbA，HbF受血液中2，3-BPG影响小，因此HbF在任何氧分压下对氧的亲和力都比HbA大，（3）亲和力的这种差别允许氧从母亲血向有效转移。[答]（1）pHMrMrMrMr脱液才能从层析柱中洗脱出来。SDS-PAGE[答]DEAEpH6，A荷，B，CAMrC4，BMrC2SDSSDSMr，凝胶过滤法可以测定寡聚体的Mr，可以推断C是单体，B是以C为亚基的二聚体，A是以C为亚基的4聚体，由于C在pH6时带负电荷，随着亚基数的增加，带负DEAE-纤维素层析的结果也是一致的。 [答]（1）v-[S]图是直角双曲线，可以通过其渐近线求Vmax，v=1/2Vmax时对应的[S]为Km；优点是比较直观，缺点是实际上测定时不容易达到Vmax，所以测。（2）1/v-1/[S]图是一条直线，它与纵轴的截距为1/Vmax，与横轴的截距为-1/Km，优点是使用方便，Vmax和Km都较容易求，缺点是实验得到的点差，Km就测。（3）v-v/[S]图也是一条直线，它与纵轴的截距为Vmax，与横轴的截距为Vmax/Km，斜率为-Km，优点是求Km比较方便，缺点是作图前计算较繁。（4）[S]/v-[S]图也是一条直线，它与纵轴的截距为Km/Vmax，与横轴的截距为-Km，优缺点与v-v/[S]图相似。（5）直接线性作图法是一组交于一点的直线，交点的横坐标为Km，纵坐标为Vmax，是求Vmax和Km的最好的一 [答]据v-[S]KmKmKmpK6.0~7.0，在生理条件下，一ISEES复合体，不能再结合IEI体，不能再结合S。多数竞争性抑制在化学结构上与底物S相似，能与底物SI/VmaxVmax，Km值变大。非竞争性抑制是指抑制剂IS与酶EIEEI，ESESIS和酶EESIESI，ESIE和形成产物P。其特点是：ISI并不能减少I1/KmKmVmaxESEIX-射线晶体分析、NMR[答]影响酶催化效率的有关因素包括：（1）底物和酶的邻近效应与定向效3pH、产物等均影响酶的活性，此外称为激活剂过代谢反馈、可逆的共价修饰、细胞区室化（pH、底物浓度等不温、pH、抑制剂等的影响，酶制剂应尽可能制成固体，并在低温下保存。[答]谷氨酸的?-羧基的pKa值约为4.0，在近中性条件下，该基团去质子化，在酶促反应中起着碱催化剂的作用。赖氨酸的?-氨基的pKa值约为10.0，在近[答]（1）测定不同底物浓度下的酶促反应速度；（2）分别在几种不同抑制剂浓度存在下测定底物浓度对酶促反应速度的影响；（3）在测定相应反应速度1/v1/[S]作图（双倒数图）；（4）从坐标图上量取-1/KmKmVmax；（5）KmKm，VmaxKm，VmaxKmVmaxVmax/Km[答]（1）对底物的结合无显著影响；（2）[答]首先分析TPCK作为胰凝乳蛋白酶的亲和标记试剂具有什么特征结构。一TPCK价键。TPCKCH2-Cl。其次分析胰蛋白酶与胰凝乳蛋白酶有什么His、AspSerPheTyrAsp189，ArgLys（1）为胰TPCKTPCKCH2—Cl和类似肽键结构—NH—CH—COArgLys的R（2）检验该抑制剂的专一性实际上就是分析其与酶的竞[答]按照一个编码一个蛋白质的理论，同工酶的产生可能是分化的产[答]RNA:(1)控制蛋白质合成；(2)RNARNA[答]每细胞的DNA的总长度为：6.4×109×0.34nm=2.176×109DNA：2.176m×10142.176×1011km这个长度与-地球之间距离（2.2×109公里）相比为：2.176×1011/2.2×109991×10-18g/1000=10-21g，所以，总DNA6.4×1023×10-21=6.4×102=640g。pHDNA0.34nm,因此该分子长度为：（3×107/618）×0.34=1.65×104nm=16.5×10－4cm；(b)16.5×10－4cm，2×10－9cm：3.14×(1×10－9)2×16.5×10－4－20cm3；；(c)48544＝4854[答]（1）RNADNA（2）用碱水解，RNADNA（3）进行颜色反应，二苯胺试剂可以使DNA（地衣酚）试剂能使RNA（4）用酸水解后，进行单核苷酸的分析（层析法或电泳法），URNA，T[答]DNADNA性。DNA（1）DNA链变成单链的无规则线团，生物学活性丧失；（2）DNA1：10，其水溶液具有很大的黏度。变性后，发生了螺旋-线团转变，黏度显著降低；（3）DNA力密大大增加；（4）沉降系数S；（5）DNA此旋光性很强，其[a]=150DNA2′-OH3′-OH5′-OH[答]DNA50%时的温度为DNA（溶解温度，meltingtemperature,Tm）。TmGC含量有关，GC，TmTm外，溶液pH值，离子强度也影响Tm值。在具体的实验中，Tm值计算Tm=69.3+0.41(G+C%),20bpTm=4（G+C）+2（A+T）40.Poly(A)尾（1）可能与mRNA从核到质有关；（2）与mRNA的半衰期mRNAPoly(A)尾较长，衰老的较短。5′15′核2DNA（DNARNA）定待检测的DNA，RNA分子中是否有与探针同源的碱基序列。用此原理，制作探 [答]（1）超螺旋DNA比松弛型DNA更紧密，使DNA分子的体积更小，得以包装在细胞内；（2）超螺旋会影响双螺旋分子的解旋能力,从而影响到DNA与其他分子之间的相互作用；（3）超螺旋有利于DNA的转录、 [答]DNAWatson-Crick1.1nmA与T、G与CAGGT1.1nm)，产生不稳定的膨胀结构，若TCAC范围内不能形成氢键。只有A与T、GC1.1nm，也才能在碱基对之间有效地形成氢键，Watson-CrickDNA(Tm)。乙醇是非极性的，它的加入会减小稳定双螺旋DNA的疏水作用力，因此 DNADNA锭插入的可能性较少。溴乙锭氯化铯梯度，环状DNA插入溴乙锭较少，沉降较快，可以将两者分开。DNA-溴乙锭复合物用异戊醇提取，DNADNADNADNADNADNA的沉降速度出现近似U[答]BB就会影响到结合酶的活性，使体内的许多代谢发生。①维生素B1是硫胺素焦磷酸（TPP）的组成成分，TPPαB1乏时，使酸氧化脱羧反应受阻。同时TPP又是转酮醇酶的辅酶，当维生素B1缺乏时，磷酸戊糖代谢，使核酸合成及神经髓鞘中磷酸戊糖代谢受到影B2FMNFADFMNFADNADHFMNFADPPNAD+、氢酶、异柠檬酸脱氢酶、αPPB6ACPCoA。二者构成酰基转移酶的辅酶，N5、N10酸缺乏时，DNA的合成必然受到抑制，骨髓红细胞DNA合成减少，细胞速B12B12，B12阻，不利于甲硫氨酸的生成，同时维生素B12还影响四氢叶酸的再生，使组织紫红质再生所致。因视杆细胞中有视紫红质，由11-顺视黄醛与视蛋白分11-顺视黄醛，但生成1111-顺视黄醛合成视紫红质，从而构成视紫红质循环。当维生素AB12B12营养不良性贫血，其机制是合成核苷酸的原料一碳单位缺乏，DNA骨髓幼红细胞DNA合成减少，细胞速度降低，体积增大，而且数目减少。一碳单位来自某些氨基酸的特殊代谢途径。FH4N5、N10FH4式和，故甲基FH4的缺乏直接影响一碳单位的生成和利用。FH4的再S-腺苷甲硫氨酸，B12，B12FH4B12B12[答]维生素C（1）参与体内多C辅助因子之一；②参与胆固醇的转化，维生素C7-α-羟化酶的辅酶，促进胆固醇转变成胆汁酸；③参与芳香族氨基酸的代谢，维生素CGSH维生素A、EB[答]G大的作用。由于G蛋白结构的相似性（指β、γ-亚基）和多样性（指α-次，更能适应广泛的细胞功能变化。GG-蛋白的αADP结合，形成激素-受体复合物而激活受体，通过GATPcAMP，cAMP5＇-AMPcAMPcAMP（蛋白激酶A）来实现的。蛋白激酶AcAMP节细胞的物质代谢和表达。活化的蛋白激酶A一方面催化胞质内一些蛋白b转变成无活性的糖原磷酸化酶激酶α，后者催化糖原磷酸化酶b活性的糖原磷酸化酶α，调节糖原的分解。活化的蛋白激酶A胞核，可催化反式作用因子-cAMPDNAcAMP应答元件结合，激活受cAMP应答元件调控的转录。另外活化的蛋白激酶还[答]Ca++Ca++可通过不受体，通过GC4，5DGIP3。IP3IP3Ca++Ca++浓度升高。DGCa++的配合下激活蛋白激酶C，对机体的代谢、表达、细胞分化和增殖起作用。②Ca++Ca++结合位Ca++升高时，Ca++与钙调蛋白结合，使其构象发生改变而激活Ca++-钙cAMPcAMP[答]由于已知反应ATP→cAMP+PPiKeq，根据△Go′Keq△Go′=-2.303RTlgKeq=-2.303×8.314×10-3×298×lg0.065=15.61那么逆反应cAMP+PPi→ATP△Go′为-15.61又已知ATP→AMP+PPi的△Go′=-33.44所以cAMP→AMP△Go′=-15.61kJ/mol+（-33.44kJ/mol）=-49.05[答]在反应的起始阶段葡萄糖-60.1mol/L，葡萄糖-1-磷酸的0，平衡后葡萄糖-60.1-X（mol/L），葡萄糖-1-磷酸的浓度为X（mol/L）根据△Go′=-2.303RTKeq′,得：㏒Keq′=7.5/-3×298=-查数表得，Keq′=4.8×10-由Keq′=X/（0.1-X）,得：0.1×4.8×10-2-4.8×10-2X=即：X=0.004mol/L，0.1-反应后葡萄糖-6-磷酸和葡萄糖-10.096mol/L0.004mol/L[答]组织中没有鱼藤酮时：1摩尔葡萄糖→2摩尔 酸，净生成2摩尔ATP并有2摩尔NADH?H+产生（细胞质中生成）；2摩尔 酸→2摩尔乙酰辅酶A+2摩尔CO2，生成2摩尔NADH?H+；2摩尔乙酰辅酶A→4摩尔CO2，共生成6摩尔NADH?H+、2摩尔FADH2、2摩尔GTP。对肝脏细胞而言，细胞质中生成的2摩尔NADH?H+，是通过苹果酸-氨酸穿梭进入线粒体的，进入线粒体的依然是2摩尔NADH?H+。NADH?H+生物氧化时的磷氧比值为2.5，FADH2的磷氧比值为1.5，所以葡萄糖彻底氧化产生的ATP为（4＋6）2.5＋2×1.5＋4=32摩尔。如果组织中有鱼藤酮存在，生成的NADH?H+不产生ATP，所以ATP为2×1.5＋4=7摩尔。内膜两侧的质子浓度差不能形成，氧的消耗停止，ATPATPATP差，ATPCO2H2O进行。在肝脏细胞匀浆体系中，细胞溶胶中生成的NADH是通过苹果酸-氨酸+NAD→乙酰辅酶ANADH?H+（线粒体，酸脱氢酶系）乙酰辅酶进入三：（线粒体，三相关酶）A+3NAD++FAD++GDP+Pi→2CO2+3NADH?H+1CO2H2OATP（GTP）=15CO2H2O柠檬酸首先沿三生成草酰乙酸，该过程共进行4次脱氢，生成3摩NADH?H+、1摩尔FADH2、1摩尔GTP（线粒体， 相关酶草酰乙酸暂时脱离三，脱羧生成酸。酸氧化脱羧转变成乙酰辅酶A：酸+NAD→乙酰辅酶A+NADH?H+（线粒体酸脱氢酶系乙酰辅酶进入三氧化：乙酰辅酶A+3NAD++FAD++GDP+Pi→2摩CO2+3NADH?H+FADH21.5，NADH2.5，1CO2H2OATP7×2.5+2×1.5+2（GTP）=22.5③磷酸稀醇 酸彻底氧化成CO2和H2O的途径如下 +ADP+Pi→酸+ATP；酸+NAD→乙酰辅酶A+乙酰辅酶进入三：（线粒体三相关酶乙酰辅酶A+3NAD++FAD++GDP+Pi→2CO2+3NADH?H+1摩尔磷酸稀醇式酸彻底氧化成CO2和H2O生成ATP的摩尔数为4×2.5+1×1.5+2（GTP+ATP）=13.5[答]ATP（腺苷-5′-三磷酸，简称三磷酸腺苷）是高能磷酸化合物的典型代表，一个ATP分子由一分子腺嘌呤、一分子核糖、和三个相连的磷酸基团组成。三个磷酸基团依次与核糖5′-羟基形成磷酸酯，分别称为α、β、γ磷酸基团，α磷酸基团与腺苷之间的磷酸酯键为普通磷酯键，而β、γ磷酸基团之间和β、α磷酸基团之间的磷酸酯键为高能磷酸键，β、γ磷酸基团在水解或者基团转移时都能释放出30.48kJ/mol的自由能，而普通磷酯键在水解或者基团转移时能释放出的自由能在20kJ/mol以下，在生物机体内细胞内还有一些高能化合物，在磷酸基团水解或者基团转移时能释放出40～60kJ/mol可将其高能磷酸基团转移给ADP，生成的ATP分子又可将其高能磷酸基团转移给其它化合物使之获得能量，所以ATP不仅是机体细胞最直接的能源，同时ATP在能量的传递中起 [答](1)二酚是一种氧化磷酸化的解偶剂，它可以将质子从膜间隙带入线粒体基质，从而破坏质子梯度，使ATP线粒体的过程被加强，从而加快了氧的消耗。(2)HCN了电子从细胞色素氧化酶到氧的传递，从而使氧的消耗停止，ATP(3)寡霉素阻断F1F0-ATPATPATP[答]经代谢转化，葡萄糖第二位标记的14C出现 酸的羰基上，即﹡CO-COOH；进一步氧化产生的CH3-﹡CO-CoA进入三 环标记碳原子全部进入草酰乙酸，形成两种异构体:HOO﹡C-CO-CH2-COOH和[答]在糖酵解中，葡萄糖→葡萄糖-6-磷酸、果糖-6-磷酸→果糖-1,6-二磷 调控酶。在糖酵解中，磷酸果糖激酶的正效应物为AMP、果糖-2,6-二磷酸，负1,6-二磷酸转变成果糖-6-磷酸，该酶的正效应物为ATP、柠檬酸，而负效应物为AMP、果糖-2,6-二磷酸。胰高血糖素通过共价修饰使果糖-2,6-二磷酸水平[答]磷酸稀醇式酸+ADP+Pi→酸+ATP，△G0'=-31.38△Go，=-2.303RTKeq=-2.303×8.31×10-3kJ/mol?K×298K即：-31.38kJ/mol=-2.303×8.31×10-3kJ/mol?K×298K㏒Keq=5.5， 数表得Keq=[ATP] 酸]/[磷酸稀醇式酸]×[酸]/[磷酸稀醇式 酸]=10÷Keq=10÷3.16×105=3.16×10-5[磷酸稀醇式 酸]=1/3.16×10-5=3.16×104[答]首先，2摩 酸+2CO2+2ATP→2草酰乙酸+2ADP+2Pi；2草酰乙+2GTP→2磷酸稀醇式 酸+2GDP+2CO2；其次，2摩尔磷酸稀醇式酸沿糖酵解途径逆行至转变成2摩尔甘油醛-3-磷酸，其中在甘油酸-3-磷酸转变成甘油酸-1,3-二磷酸过程中，消耗2摩尔ATP；甘油酸-1,3-二磷酸转变成甘油醛-3-磷酸中，必须供给2摩尔的NADH?H+。最后，2摩尔的磷酸丙糖先后在醛羧酶、果糖-1,6-二磷酸酶、异构酶、葡萄糖-6-磷酸酶作用下，生成1摩尔葡萄糖，该过程量的产生与消耗。从上述三阶段可看出，2摩尔酸转化成1摩尔葡萄糖需要提供6摩尔高能磷酸化合物，其中4摩尔为ATP，2摩尔为GTP[答]甘油+ATP→α-磷酸甘油+ADP；α-磷酸甘油+NAD+→NADH?H+酸二羟；磷酸二羟→甘油醛-3-磷酸；甘油醛-3-磷酸+NAD++Pi→甘1,3-二磷酸+NADH?H+；1,3-二磷酸+ADP→甘油酸-3-磷酸+ATP；甘油酸-3-磷酸→甘油酸-2-磷酸→磷酸稀醇式酸；磷酸稀醇式+ADP→酸+ATP； 酸+NAD+→乙酰辅酶A+NADH?H++CO2；然后进入乙酰辅酶A三 彻底氧化，经过4次脱氢反应生成3摩尔NADH?H+、1FADH22CO2，1GTP1NADH?H1FADH22.5尔、1.5，1CO2H2OATP6×2.5＋1×1.5[答]磷酸果糖激酶（PFK）是一种调节酶，又是一种别构酶。ATPATP底物结合位点和调节位点。当机体能量供应充足（ATP）时，ATP制。反之机体能量供应不足（ATP），ATP[答]（a）ATP→ADPPi△Go′=-30.50KJ/mol么ADP+Pi→ATP△Go′=+30.50kJ/mol，因此，当ATP、ADPPi3mmol/L、0.1mmol/L、10mmol/L，ADP+Pi→ATP△G=30.50+2.303×8.31×10-3×298×lg[3×10-3/（0.1×10-3×10×10-=30.50+5.71×3.4771=50.35（b）如果此时△GATP，体系自由能的变化为负，再根据-nF△E0′-50.35=-2×96.49×△E0′，△E0′=50.35÷（2×96.49）=0.26[答]knoop化合物随尿排出。Knoopβ-碳原2β-氧化学说两个碳原子单元。与现代β-氧化学说的不同之处是：β-氧化的起始阶段需要ATPCoACoACoA，ATP。[答]（1）8β9CoA，8FADH28NADH，9CoAATP：10×9=90；8FADH2ATP：1.5×8=12；8NADHATP：2.5×8=20122ATP，CoA120ATP。（2）120ATP120×（－30.54）KJ=－3664.8KJ，2561[答]（1）酮症：在或糖供给等病理状态下，胰岛素分泌减少或作 少，使草酰乙酸也减少，导致了乙酰CoA的堆积，此时肝外组织的 用减少，结果就出现了过多积累在血中的酮症。（2）脂肪肝：肝细胞内LDLHDLACP酶体系。酵母中，脂肪酸合酶由酰基载体蛋白（ACP）66定位为两个多功能多肽链，它们分别是乙酰CoA-ACP转酰酶、丙二酸CoA-ACPβ-酮酰-ACPβ-酮酰-ACPβ-羟酰-ACP烯酰-ACP7ACP，6和酵母中的相同，另一个为软脂酰-ACPACP“acylcarrierCoAACP4′-磷酸泛酰巯基乙胺，其末端的－SH携带脂酰基的功能部位。ACPCoA4′-磷酸泛酰巯基乙胺分子犹如“摆臂”，把底物在酶复CoA化乙酰CoA生成丙二酸CoA。丙二酸CoA可促进脂肪酸合成，抑制肉[答]脂肪酸的生物合成，植物中是在叶绿体及前中进行，合成4～16碳16161616成过程来看，与β－氧化过程有相似之处，但是合成过程不是β-氧化过程的逆转,脂肪酸合成和脂肪酸β（1）两种途径发生的径都有一个与载体相连，脂肪酸合成为ACP，分解为CoA；（3）在两种4CoACoA（5）两种途径都以脂肪酸链的2CoA2方向，羧基的离去为第一步。（7）羟酯基在脂肪酸合成中是D-构型，但是在降解中为L-构型；（8）NADPH与，脂肪酸分解由氧化途径构成，需要FAD和NAD+的参与；（9）在动物体同催化的。以上是胞液中脂肪酸合成过程和粒体中β-氧化作用的重要异 粒体中，脂肪酸的合成反应是β-氧化反应的逆过程。少不同而在电场中有不同迁移率分为：α-脂蛋白、前β-脂蛋白、β-脂蛋白CMpreβ-LPβ-LPα-LP密度分类CMVLDLLDLHDLTG（80％～95％）TG（60％～70％）（48％～50％）富含蛋白质（TGChTGCh[答]乙酰-CoA羧化酶在脂肪酸合成中将乙酰-CoA转化为丙二酸-CoA，后者是脂肪酸合成的重要起始物之一，乙酰-CoA主要产物，软脂酰-CoACoAATPCoA，同时成为乙酰-CoACoA皮质激素激发的磷酸化修饰的抑制。它的活化型为乙酰-CoA当磷酸化时这个聚合物解离成为单体，遂失去活性。可以说，乙酰-CoA酸合成，软脂酰-CoACoA[答]血浆脂蛋白中的蛋白质部分称载脂蛋白(apo)，在肝和小肠粘膜细胞中合18apo，主要包括：apoA、B、C、D、E5类。其中，apoAAI、AⅡ、AIV；apoBB100B48；apoCCI、CⅡ、CⅢ，CⅢCⅢ0、CⅢ1、和CⅢ2；apoEEl、E3、E4apoapo往含有较多的双性α-螺旋结构，分子的一侧极性较高，可与水溶剂及磷脂或性的脂类结合，构成脂蛋白的疏水区。apo的主要功能如下：①结合和转运脂质，稳定脂蛋白结构。apoα-螺旋结构(amphipathicα-和稳定脂蛋白结构。②调节脂蛋白代谢关键酶的活性，如apoCⅡ是脂蛋白脂肪酶(LPL)不可缺少的激活剂；apoAI(LCAT)的激活apoB100apoELDL；apoAIHDL；apoEapoEapo胆固醇酯转运蛋白(CETP)，CEHDLVLDL-IDLLDL，磷脂转运蛋白(PTP)，PL从CMVLDLHDL。HMG-CoAHMG-CoAHMG-CoAHMGCoA[答]乳酸完全氧化时，首先转变成酸，然后 酸转变成乙酰辅酶A，乙酰辅酶A进入三完全氧化。乳酸+NAD→ 酸+NADH?H+（细胞质中 酸+NAD→乙酰辅酶A+NADH?H+（线粒体中进行），1摩尔乙酰辅酶A进入三 完全氧化生成2摩尔CO2、3摩尔NADH?H+、1摩尔FADH2、1摩尔GTP。1摩尔乳酸完全氧化产生ATP数=2.5×5＋1.5×1＋1=15；丙氨酸氧化时，首先1摩尔丙氨酸与1摩尔α-酮戊二酸在转氨酶作用下生成1摩尔酸、1摩尔谷氨酸。谷氨酸脱氢重新转变成α-酮戊二酸并生成1摩尔NH4+和1摩尔NADH?H+。酸氧化过程同上述，1摩尔酸完全氧化产能2.5×4＋1.5×1＋1=12.5摩尔的ATP。另外从丙氨酸上脱下的氨对机体是害的，必须转化成尿素给予清除。合成1摩尔尿素需要2摩尔的氨、1摩尔CO2、并且消耗4摩尔的ATP（实际消耗3摩尔ATP，断裂4个高能磷酸键），这样清除1摩尔的氨，相当于消耗2摩尔ATP，所以1摩尔丙氨酸完全氧化可产生ATP数=12.5＋2.5-2=13摩尔；通过计算可知等摩尔的丙氨 [答]三的α-酮戊二酸可为谷氨酸族氨基酸提供骨架原子，包 [答]尿素循环中生成的延胡索酸需经过三 的ATP和CO2[答]1mol1molNADH,、1摩尔a1氨，a-酮戊二酸进入三转化变成草酰乙酸，伴随产生2molNADH?H+,1molFADH2和1molATP；草酰乙酸脱羧生成酸，酸氧化脱1CoA1NADH?H+，1CoACO2、H2O，10molATP1molCO2、H2OATP10+3×2.5+1×1.5+1=20molATP，NH33molATP，CO2、H2O17molATP。对于BBHGPRTHATHAT[答]通过放射自显影方法，在开始时，先用低放射性的3H-胸腺嘧啶核苷3H较高。对于枯草杆菌、某些噬菌体和高等真核细胞的等许多DNA来说，于大肠杆菌噬菌体P2、和真核细胞线粒体等某些DNA来说，是单向DNA功能。相反，RNA验提供了有关的：例如在体外试验中，噬菌体M13单链环状DNA在加入一RNA，DNADNADNA；同时发现如果加入RNA聚合酶抑制剂，也可以抑制M13DNA的，如果加入RNA引物再加，DNA的合成不被抑制；还发现新合成的DNA片段5′端共价连接着RNA片段，如多瘤在体外系统合成的片段5′端有长约10个5′RNAWatson-Crick3.4nm（3.4×10-3μm）10DNA：1100×10╱3.4×10-3≈3.24×106（核苷酸对）所以 体的链增长速度为：3.24×106╱40×60≈1350（核苷酸/秒）[答]15N标记的大肠杆菌利用培养基中的14N合成DNA，第一代DNA双链都是14N－15N杂合DNA分子。第二代分别是以第一代中的14N15N链作为母链合成新的DNA，所以14N－DNA14N－15N杂合DNA分子之比为1：1。第三代中的14N15N母链的分子之比是3：1，14N－DNA分子与14N－15NDNA3：1。[答]（1）DNA→DNA，其中DNA半不连续需要DNA聚合酶III、DNA聚合酶IDNA；DNADNA聚合酶I、DNA（2）RNA→DNA，RNADNA（3）RNADNA→RNA，DNARNARNA；RNA→RNA，以RNA为模板合成RNA需要RNA酶；RNA→DNA→RNA需要RNA转录酶和RNADNA聚合酶有α、β、γ、δ、ε5′→3′聚合酶活性，DNA聚合酶γ、δ和ε3′→5′外切酶活性，DNA聚合酶α和βDNA聚合酶αDNA聚合酶δDNA，DNAβεDNAγDNA4RNA聚合酶在σRNADNARNA2～9个核苷酸。随后σDNARNARNADNARNA起始转录还需要σNusRNAσ心酶也能与DNA结合，σ因子的存在对酶的构象有较大影响，极大降低了RNADNARNADNADNADNA双链被开。真核生物组远大于原核生物，它们的RNA聚合酶也更为RNARNA聚合酶I45SrRNA5.8SrRNA，18SrRNA28SrRNA。RNAIImRNASnRNA。RNAIIItRNA，5SrRNARNARNARNARNA聚合酶I、II、III进行转录。类别I动子包括启动子和上游控制元件两部分，需要UBF1和SL1因子参与作用。II因子。类别III启动子有两类：上游启动子和内启动子，分别由装配因子[答]在遗传被破译后，由于有61个子编码氨基酸，人们曾预测细胞61tRNA，50，Crick摇摆假说，并合理解释了这种情况。根据摇摆性和61个子，经过仔细计算，要翻译61个子至少需要31种tRNA，外加1个起始tRNA，共需3230tRNA，24[答]无细胞翻译系统指保留蛋白质生物合成能力的细胞抽取物。无细胞系统要包含以下成分：核糖体、各种tRNA、各种氨酰-tRNA合成酶、蛋白质合成需要的起始因子和延伸因子以及终止释放因子、GTP、ATP、20种基本的氨基酸。常 [答]原核生物蛋白质合成与真核生物蛋白质合成的主要差别有：（1）原核生mRNA是从甲酰甲硫氨酰-tRNAtRNA的。（3）SD依赖于帽子结构。（4）原核生物的mRNA与核糖体小亚基的结合先于起始tRNAtRNAmRNA小亚基的结合。（5）ATP，但ATP。（6）参与真核生物蛋白质合成起始阶段的起始因子比[答]要想在原核细胞中高效地表达真核生物的必须注意以下几点：（1）者从cDNA库中获取。（2）需要在真核生物的上游加入SD序列。（3）使[答]（1）遗传为三联体：模板从mRNA5′端的起始子开始，到3′端的终止称为开放读码框架。在框架内每3个碱基组成1个 子，决定1个氨基酸。（2）遗传的种类：遗传共64个，其中61个 表各种氨基酸。3个为肽链合成的终止信号。位于5′端的AUG，除了代表甲硫蛋氨酸外，还是肽链合成的起始信号。（3）遗传的连续性：对mRNA分子上子的阅读方法叫读码。正确读码是每3个相邻碱基一组，不间断地连续读下去，直到出现终止为止。mRNA上碱基的插入和缺失，可导致框移突 代表一种氨基酸，而多数氨基酸都有2～4个 子的第3位碱基通常是简 律，此不严格的配对关系称为摆动性。如丙氨酰-tRNA反子的第1位碱基I可以与子第3位的A、C或U配对。遗传 的摆动性使一种tRNA可以 别例外。如UAG不代表终止子，而代表色氨酸；CUA不代表亮氨酸，而代表苏氨酸。（7）遗传的防错系统：由于遗传的简并性，有4个的出，只要遗传的第二位是U，则第一位和第三位不论怎么变化，其编码的氨基酸总是疏水性的，如第二位是C，则其编码的氨基酸是非极性的或极性不带电荷的，若第二位为A或G，则编码的氨基酸R基是亲水性的，第一位是A或C，第二位是A或G，则编码的氨基酸R基是碱性的，若前两位是AG则编码的氨基酸R基是酸性的。这些规律使某些核苷酸的替换可以不引起肽链中氨基 的编码产物可能变短，即突变成终 子而终止翻译[答]由于1个子只能编码一种氨基酸，在mRNA的开放阅读框确定后，用 可以推出其相应蛋白质的氨基酸序列。由于mRNA是由DNA转录而来 序列。但是，由于除甲硫氨酸和色氨酸外的18种氨基酸均有一种以上的mRNA的核苷酸序列时，我们会多种选择。比如，由7个氨基酸的序列推测其可能的mRNA编码区序列，若其中有5个22532[答]（1）60000，氨基酸残基的平均相对分120，60000/120=5002000种蛋白至少需要2000×500×3个子，而DNA碱基的75%用来编码这2000个蛋白，则该DNA的长度为 bp。若DNAB-DNA，bp0.34nm nm；（2）该DNA的相对分子质量大约 =2.56×109Da[答]相同之处：（1）都需生成翻译起始复合物；（2）都需多种起始因子参mRNAtRNA（5）mRNA一定的结构成分协助。（6）mRNAtRNA结合。（7）都需要消耗能量。不同之处：（1）80S（40S+60S）；eIF（10）；tRNAmettRNA（不需甲酰化），mRNASD；mRNA5′端帽子结构和帽结合eIF2；mRNAmet-tRNA（2）原核生物核糖体是70S（30S+50S）；IF（3）；tRNAfmettRNA（需甲酰化）；SD16S-tRNA，rps-1氨酰-tRNAmRNAEF-Tu、EF-TsEF-G。EF-Tu先与GTP结合成活性状态，然后携带一个由mRNA上的子指导的氨-tRNAAEF-Tu外的所有氨酰-tRNA。EF-TsEF-TuGTPEF-Tu?GDPGTPEF-Tu?GTP性形式。EF-G（即移位酶）GTPtRNA从A部位移到P位，使A[答]这四种蛋白质都能够结合GTP，并且有GTPaee的活性，因而都属于G蛋白超的成员。它们参与结合GTP的结构域在氨基酸序列上会有很大的相似[答]（1）在蛋白质的合成中，每个氨基酸的活化伴随着两个磷酸酐键的水解。活化反应由氨酰-tRNAtRNA+ATP→氨酰-GTP（GTP→GDP+Pi）GTP74（包括氨基酸的活化和延长反应）GTPGTPATP6002400ATP。（2）因为所有的不可逆过程都到。另外，为了确保氨基序列符合遗传的指令，肽链每延长1个氨基酸残[答]蛋白质合成后的加工修饰内容有：（1）肽链的剪切：如切除N如：磷酸化、糖基化、甲基化等。（3）二硫键的形成。（4）[答]（1）RNAeIF-2（2）干扰素与双链RNA2′-5′A2′-5′A。此产物进一步mRNARNARNAmRNAmRNA[答]（1）真核生物以正调控为主的必要性与优越性如下：a.真核生物组cis-factor（顺式作用位点）trans-5trans-factor-cis-factor510%表达，即90%关闭，若采用负调控，则需要表达90%的阻遏蛋白；若采用正调控，只需要合成10%的反式作用因子，这显然是经济合理 [答]一个产生一种以上mRNA的方式主要有两种。第一种是：一个原初转3ˊ末端的剪接，就会产生多种mRNA。此外，RNA编辑可以通过某些核苷酸的修饰，插入mRNA。[答]基本内容包括：（1）段，减少DNA的长度，使载体具有更大的容纳外源片段的能力。（2）插入易于[答]组文库是用工程的方法，人工构建的含有某一生物组DNA的DNA（1）大片段高分子量DNA的；（2）体外重组连接；（3）包装蛋白的；（4）重组体的体外包装；（5）将重组DNA导入寄主细胞；（6）在基因组文库、YAC文库、BAC文库等。组文库和遗传学上的库是完全不同的概念。库（genepool）是指在进行有性生殖的某一群体中，能进行生殖 [答]在特定的环境信号刺激下，相应 被激活 表达产物增加，则 是可诱导的。可诱 在特定的环境中表达增强的过程称为诱导。DNA损伤时，修复酶 （3）突变会使启动子变得更强或更弱，或是增强或是减弱结 的表达[答]原核表达调控与真核存在很多共同之处，但因原核生物没有细胞核和 的表达也受转录起始、转录终止、翻译调控及RNA、蛋白质点包括以下3方面：（1）σ因子决定RNA聚合酶的识别特异性：原核生物只有一种RNA聚合酶， 酶催化转录的延长，亚基识别特异启动序列，即不同的因子协助启动不同 外，原核生物绝大数按功能相关性成簇地连续排列在上，共同组成一个转录单位即子，如乳糖子等。一个子含一个启动序列及数个编码。在同一个启动序列控制下，转录出多顺反子mRNA。（3）阻遏蛋白与阻遏机制的普遍性：在很多原核子系统，特异的阻遏蛋白是控制启动序列活性的重要因素。当阻遏蛋白与结合或解离时，结构的转录被[答]（1）组结构庞大：哺乳动物组DNA由约bp的核苷酸组成。大约有3万个左右的，90%以上的DNA不为蛋白质编码。真核细胞DNA与组蛋白核转录产物为单顺反子，即一个编码转录生成一个mRNA分子，经翻译协调表达。（3）重复序列：重复序列在真核DNA中普遍存在，重复序列长短不一，短的在10个核苷酸以下，长的达数百，乃至上千个核苷酸。据重复频率不 [答]（1）DNA水平的调控：a.丢失，即DNA片段或部分 蛔虫胚胎发育过程有27%的DNA丢失。b.扩增，即特定 选择性扩增，如非洲爪蟾细胞中的rDNA是体细胞的4000倍。c.DNA序列异染色质关闭某些的表达。e.DNA的修饰，