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文档简介
检验血液学的学习课件第1页/共21页临床血液学检验
2017.4.15第2页/共21页关于细胞化学染色检验一、铁染色健康人骨髓中的铁主要存在于骨髓小粒和幼红细胞中。
细胞外铁:反映体内储存铁,主要存在于骨髓小骨髓中铁
粒的巨噬细胞中
细胞内铁:存在于中幼红细胞,晚幼红细胞及
红细胞中的铁(包括铁粒幼红细胞,铁粒红细胞)铁粒幼红细胞:胞质中出现蓝色铁颗粒的幼红细胞,分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型及环形铁粒幼红细胞。环形铁粒幼红细胞:指幼红细胞胞质内蓝色颗粒在5颗以上,围绕核周三分之一以上者。铁粒红细胞:成熟红细胞中出现铁颗粒称为~第3页/共21页关于细胞化学染色检验参考范围:1、细胞外铁:(+)——(++)2、细胞内铁:铁粒幼红细胞阳性率在12%—44%,以Ⅰ型为主。无环形铁粒幼红细胞和铁粒红细胞。临床意义:1、缺铁性贫血:细胞外铁阴性,细胞内铁阳性率明显下降或为零。2、铁粒幼细胞贫血:铁粒幼红细胞增多,其中环形铁粒幼红细胞增多,有时可见到铁粒红细胞,细胞外铁也常明显增多。
第4页/共21页关于细胞化学染色检验二、中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)主要存在于中性成熟粒细胞(包括中性杆状核粒细胞和分叶核粒细胞)胞浆内,故中性成熟粒细胞胞浆呈阳性,其他细胞基本呈阴性。NAP增高NAP减弱应用于疾病的鉴别类白血病反应慢性粒细胞白血病(慢性期)细菌性感染病毒性感染再障阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)恶性淋巴瘤急性淋巴细胞白血病急性粒细胞白血病第5页/共21页关于细胞化学染色检验三、过氧化物酶染色(POX)主要为髓过氧化物酶(MPO),MPO是人类中性粒细胞含量最多的一种蛋白质。
分化差的原始粒细胞为阴性,分化好的原始粒细胞至中性成熟粒细胞呈阳性,且随着细胞的成熟,阳性反应的程度逐渐增强,衰老的粒细胞阳性程度减弱,甚至阴性。嗜酸粒细胞阳性最强,嗜碱粒细胞阴性。临床意义:POX染色是辅助判断急性白血病细胞类型的首选的、最重要的细胞化学染色。第6页/共21页关于细胞化学染色检验四、苏丹黑染色(SBB)SBB染色临床意义基本同POX染色,其特异性低于POX,但敏感性高于POX染色。故患者POX染色阴性者可加做SBB染色补充。五、过碘酸-雪夫反应(糖原染色)1、红细胞系统疾病,红血病、红白血病、骨髓增生异常综合症中有核红细胞可阳性(呈均匀红色或块状)2、
急性淋巴细胞白血病时原始淋巴细胞及幼稚淋巴细胞的阳性率增加,呈粗颗粒状或小块状阳性;慢性淋巴细胞白血病时淋巴细胞的阳性率增加,呈粗颗粒或小块状;恶性淋巴瘤时淋巴细胞阳性率高,阳性增强,呈小块状或粗颗粒状。
第7页/共21页关于细胞化学染色检验六、酯酶染色(一)氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色(NAS-DCE)NAS-DCE几乎仅出现在粒细胞、其特异性高,因此又称为粒细胞酯酶。(二)∝-醋酸萘酚酯酶染色(∝-NAE)存在于单核细胞、粒细胞和淋巴细胞中,是一种中性非特异性的酯酶。单核细胞系统的阳性可被氟化钠抑制,所以做此染色时,通常同时作氟化钠抑制试验。(所谓抑制,是指氟化钠试验的抑制率大于50%)第8页/共21页关于细胞化学染色检验七、酯酶双染色在同一张涂片上进行两种酯酶染色的方法,一般采用一种特异性酯酶加另一种非特异性酯酶染色,故常用的有∝-醋酸萘酚酯酶与氯乙酸AS-D萘酚酯酶双染色。对急性粒-单核细胞白血病的诊断具有独特的价值。第9页/共21页关于细胞化学染色检验八、酸性磷酸酶染色(ACP)主要用于多毛细胞白血病的诊断及脂代谢障碍性疾病的鉴别。ACP阳性ACP阴性戈谢病(PAS阳性)尼曼-匹克病(PAS阴性)多毛细胞白血病(不被酒石酸抑制)恶性淋巴瘤(被酒石酸抑制)第10页/共21页关于细胞化学染色检验小结(一):白血病类型的鉴别(染色)
POX(过氧化物酶染色)∝-NAE+抑制试验PAS(过碘酸-雪夫反应)
髓系淋巴系原、幼淋抑制试验(-)抑制试验(+)原粒、早幼粒单核系统来源
确认(特异性酯酶)NAS-DCE
粒系
第11页/共21页关于细胞化学染色检验小结(二):
贫血——铁染色感染——NAP染色白血病——POX、PAS、特异性酯酶和非特异性酯酶染色多毛细胞白血病——ACP染色第12页/共21页关于白血病ALL(急性淋巴细胞白血病)——小大大,一不一L1:以小细胞为主,大小较一致,核染色质较粗,核仁小不清L2:以大细胞为主,大小不一,核染色质较疏松,核仁较大,1至多个L3:以大细胞为主,大小一致,核染色质细点均匀,核仁1个或多个明显。胞质嗜碱,深蓝色,有较多空泡。对比异型淋巴细胞:Ⅰ:浆细胞型(空泡型)Ⅱ:单核细胞型(不规则型)
Ⅲ:幼稚细胞型第13页/共21页关于白血病AML(急性非淋巴细胞白血病)M0:急性髓细胞白血病微分化型,原始细胞≥30%,无T、B淋巴细胞系标记,至少表达一种髓系抗原免疫细胞化学或电镜MPO阳性。M1:急性髓细胞白血病未成熟型,骨髓中原始粒细胞≥90%(NEC)——绿色瘤第14页/共21页关于白血病M2:急性髓细胞白血病部分成熟型,骨髓中原始细胞占30%—89%,早幼粒细胞及以下阶段粒细胞>10%,单核细胞<20%。M2a:以原粒为主M2b:以异常中性中幼粒细胞为主,t(8;21)(q22;q22)第15页/共21页关于白血病M3:急性早幼粒细胞白血病,骨髓中异常早幼粒细胞≥30%(NEC),胞质内有大量Auer小体
最易并发DICt(15;17)(q22;q12)形成的PML/RARa融合基因是本病最特异的基因标志。M3a:粗颗粒型M3b:细颗粒型第16页/共21页关于白血病M4:急性粒单核细胞白血病,骨髓及周围血中有粒系及单核细胞增生,骨髓中的原始细胞≧30%,单核细胞为20%-80%,其余为粒细胞。M4a:以原粒增生为主M4b:以原幼单增生为主M4c:以幼粒、单核细胞增生为主M4E0:伴嗜酸细胞增多的急性粒单核细胞白血病,除M4特征外,骨髓中异常嗜酸粒细胞增多,常≧5%t(16;16)(p13;q22)或inv(16)(q13;q22)第17页/共21页关于白血病M5:急性单核细胞白血病;依据分化成熟程度分为:M5a:原始单核细胞型,骨髓原始单核细胞≧80%M5b:单核细胞型,骨髓原始单核细胞<80%,其余为幼稚及成熟单核细胞等。临床上除有一般急性白血病的症状外,浸润症状较为明显,其突出表现为皮肤黏膜的损害,皮肤出现弥漫性丘疹、硬性结节、肿胀等症状。器官浸润表现为肝脾、淋巴结肿大。第18页/共21页关于白血病M6:急性红白血病,骨髓有核红细胞≧50%,骨髓原始细胞≧30%或周围血原始细胞≧30%。M6a:红白血病(红系/粒系型)是红细胞及白细胞两系同时恶性增生性疾病,此亚型定义为骨髓总红系前提细胞占有核细胞50%,原始粒细胞占非红系≧20%M6
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