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实验二两栖类基本操作第1页，共15页，2023年，2月20日，星期六实验二两栖类动物基本操作蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本制备蟾蜍坐骨神经-腓神经标本制备第2页，共15页，2023年，2月20日，星期六实验目的：学习蟾蜍神经、肌肉标本制备方法。掌握两栖类动物基本操作技术。实验原理：两栖类动物的某些生理功能与哺乳类相似。但其离体组织体外存活环境要求较低，容易进行实验操作。第3页，共15页，2023年，2月20日，星期六实验对象：蟾蜍实验器材和药品：手术器械1套任氏液第4页，共15页，2023年，2月20日，星期六实验步骤破坏脑和脊髓

取蟾蜍一只，用自来水冲洗干净。找枕骨大孔：用探针由头端沿正中线向下滑动即可触及。用探针刺入：先向上损毁脑，然后向下损毁脊髓。如蛙四肢松软，呼吸消失，表明脑和脊髓已完全破坏。

第5页，共15页，2023年，2月20日，星期六Video第6页，共15页，2023年，2月20日，星期六剪除躯干上部及内脏用粗剪刀在骶髂关节水平以上1~2cm处剪断脊柱，（注意不要损伤腹侧面两侧的坐骨神经干），持粗剪刀沿脊柱两侧剪除一切内脏及头胸部。

第7页，共15页，2023年，2月20日，星期六剥皮、分离两腿一手捏住脊柱断端（注意不要触及神经），另一只手捏住皮肤，用力向下剥掉全部后肢皮肤。用粗剪刀将脊柱沿正中线剪开分为两半，标本放在盛有任氏液的培养皿中。完毕洗净手及用过的器械。第8页，共15页，2023年，2月20日，星期六Video第9页，共15页，2023年，2月20日，星期六坐骨神经-腓神经标本制备将标本腹面朝上，用玻璃分针游离坐骨神经，于近脊柱处穿线结扎并剪断。再将标本背面朝上，手持结扎线将神经轻轻提起，剪断坐骨神经的所有分支，游离神经至腘窝处。剪断内侧的胫神经。在踝关节水平结扎腓神经并剪断。标本浸于任氏液中10~20分钟。

第10页，共15页，2023年，2月20日，星期六坐骨神经-腓肠肌标本制备将游离干净的坐骨神经搭于腓肠肌上，在膝关节周围剪掉全部大腿肌肉并用粗剪刀将股骨刮干净，在股骨上中部剪去上段股骨，即保留下2/3股骨。将腓肠肌穿线结扎，剪断跟腱。仅保留腓肠肌起始点与骨的联系，其余剪除。

第11页，共15页，2023年，2月20日，星期六Video第12页，共15页，2023年，2月20日，星期六注意事项：制备坐骨神经干标本时应作钝性分离，动作须轻柔细致，避免过度牵拉或金属器械、手捏碰神经干；制备标本时应随时对神经干滴加任氏液，以保持神经湿润，并将暂不用的神经置于任氏液培养皿中保存。

第13页，共15页，2023年，2月20日，星期六实验结果：测定神经兴奋性测定神经-肌肉标本的兴奋性第14页，共15页，2023年，2月20日，星期六思考

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