天然冬虫夏草的相似度最高的虫草发酵制剂

金水宝---天然冬虫夏草相同度最高虫草发酵制剂——关于“冬虫夏草菌种认识和无性型争论”解析天然冬虫夏草的相似度最高的虫草发酵制剂1/28目录2冬虫夏草菌种学术争论3小结4冬虫夏草及其制剂1冬虫夏草菌种认识现实状况天然冬虫夏草的相似度最高的虫草发酵制剂2/281、冬虫夏草及其制剂天然冬虫夏草的相似度最高的虫草发酵制剂3/28冬虫夏草介绍“冬虫夏草”是麦角菌科冬虫夏草菌寄生于蝙蝠蛾科昆虫幼虫上子座及幼虫尸体复合物。冬虫夏草与人参、鹿茸同被誉为中国传统三大补益中药。冬虫夏草产于海拔3000～5000米高寒地域，是一个生长在高原地域特殊生物，它是由虫草菌在夏天成熟后散发出来孢子被蝙蝠蛾幼虫食用或从其身体表面渗透到虫体内，之后菌丝体逐步侵润虫体，不停生长，很快充满整个虫体内部。到第二年夏天，气温回升，积雪融化，虫体内菌核从僵虫头部长出子座，形成“冬虫夏草”。天然冬虫夏草的相似度最高的虫草发酵制剂4/28上世纪五十年代起，国内外众多学者已经开展对冬虫夏草菌种进行分离、筛选和纯化研究，但均未取得突破性进展。1972年，由中国医学科学院药品研究所杨云鹏教授领衔，与原江西国药厂合作，先后200多名教授参加，历经18年，分离出200多个菌株；经筛选、纯化选出含有生长快、周期短、不易受污染优质菌株——蝙蝠蛾拟青霉Cs-4菌株，且经陈庆涛、陆师义等国内著名微生物教授判定为正品虫草。金水宝是由中国医学科学院药品研究所和江西国药厂合作研发出蝙蝠蛾拟青霉Cs-4菌株，在国内外首次成功采取深层发酵、工业化生产冬虫夏草菌丝体制剂。金水宝菌种起源天然冬虫夏草的相似度最高的虫草发酵制剂5/28金水宝名字由来在五行中，肺属“金”、肾属“水”，金水宝肺肾双宝，所以命名为“金水宝”。——原卫生部药品评审委员会委员、中国医学科学院药品研究所顾问高益民。蝙蝠蛾拟青霉Cs-4补肺益肾秘精益气金水宝片肺属“金”肾属“水”天然冬虫夏草的相似度最高的虫草发酵制剂6/28金水宝与天然冬虫夏草形态学比较经中国科学院微生物研究所证实：

蝙蝠蛾拟青霉Cs-4菌株与天然冬虫夏草原始描述相同。天然冬虫夏草的相似度最高的虫草发酵制剂7/28金水宝与天然冬虫夏草成份基本相同1.陶忠华.源于虫草,胜似虫草.《中医药管理杂志》,1995年第5卷增刊.2.葛新,等.比色法测定人工虫草菌丝体多糖含量.《山西医科大学学报》,年第32卷第5期.3.白云娥,等.冬虫夏草多糖含量测定.《山西医科大学学报》,年第31卷第2期.成份天然冬虫夏草Cs-4氨基酸17种以上，15.5%17种以上，16.8%虫草酸7%左右（青海产）10%左右虫草多糖40%左右50.1%麦角甾醇少许少许腺苷0.04%＞0.14%脲嘧啶核苷0.058%0.41%维生素少许维生素B1、B2、E含量分别为2.97mg/kg、38mg/kg、4.61mg/kg微量元素K、Ca、Mg、Fe、Na、Mn、Al、Cu、Zn、P、Si、Se等K、Ca、Mg、Fe、Na、Mn、Al、Cu、Zn、P、S、Si、Se等，其中Zn38ppm，Se0.21ppm天然冬虫夏草的相似度最高的虫草发酵制剂8/28金水宝药理作用及临床应用功效主治：补益肺肾，秘精益气。药理毒理：本品含有抗炎、止咳、祛痰、镇静、促性腺作用；能降低血清胆固醇、甘油三酯和脂质过氧化物，增加心肌与脑供血，含有轻度降血压、抑制血小板聚集、延长缺氧时动物生存时间等作用，对心脑组织有保护作用。其主要药理作用与青海天然虫草相同。金水宝已广泛应用于肾内科、呼吸科、肝病科等科室，在治疗肾病、肺病、肝病等疾病方面取得了确切疗效。天然冬虫夏草的相似度最高的虫草发酵制剂9/28虫草菌粉制剂一览表

药品对比金水宝胶囊百令胶囊至灵胶囊宁心宝胶囊菌种蝙蝠蛾拟青霉Cs-4菌株(与药典所载冬虫夏草一致)蝙蝠蛾被毛孢蝙蝠蛾被孢霉虫草头孢菌菌种源地青海青海

/青海培养基东北大豆，有豆香味鱼粉，有鱼腥味

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/品质重金属含量低，经过了FDA认证重金属含量不易控制

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有效成份种类含腺苷、尿苷、甘露醇、麦角甾醇、虫草多糖、虫草素、19种氨基酸和各种微量元素含腺苷、尿苷、甘露醇、麦角甾醇、19种氨基酸和各种微量元素甘露醇、麦角甾醇、氨基酸、虫草多糖和虫草素等甘露醇、麦角甾醇、氨基酸、虫草多糖和虫草素等药品级别最先评为国家级中药一类新药国家级中药一类新药省级省级研究单位中国医学科学院药品研究所青海省牧科院//天然冬虫夏草的相似度最高的虫草发酵制剂10/282、冬虫夏草菌种认识现实状况天然冬虫夏草的相似度最高的虫草发酵制剂11/28中国被毛孢是冬虫夏草菌唯一无性型；中国被毛孢是正宗冬虫夏草菌种。中国被毛孢是唯一冬虫夏草菌种；近几年，在部分学者心目中有这么一个观点：天然冬虫夏草的相似度最高的虫草发酵制剂12/28学术研究历史背景：在早期研究中，因为只检出中国被毛孢序列，从而推断中国被毛孢是冬虫夏草菌无性世代[1]；魏教授等人关于冬虫夏草及其相关类群分子系统学分析中认为：中国被毛孢为冬虫夏草菌无性型正确名称，而蝙蝠蛾拟青霉为不一样于冬虫夏草菌另一个真菌[2]。商家借机扩大宣传：中华被毛孢是唯一无性型真菌；百令才是正宗人工冬虫夏草。1.刘锡琎,郭英兰,俞永信,曾纬.冬虫夏草无性阶段分离和判定.《真菌学报》,1989年13卷6期.2.魏鑫丽,魏江春,等.冬虫夏草及其相关类群分子系统学分析.《菌物学报》,年8卷1期.天然冬虫夏草的相似度最高的虫草发酵制剂13/283、冬虫夏草菌种学术争论

——冬虫夏草多菌共生统一微生态系统天然冬虫夏草的相似度最高的虫草发酵制剂14/28冬虫夏草是一个“统一微生态系统”1、多个研究从冬虫夏草中重复屡次分离出包括十几个属近90种可培养真菌，以及更多不可培养真菌形成冬虫夏草菌物群区系[1,2]。2、冬虫夏草中多菌和各种突变基因型菌共存，它们表示在冬虫夏草成熟过程中出现动态改变[1-3]。3、冬虫夏草菌出现种内或种间变异是一个独特现象，可能需要其它共生菌帮助才能完成，进而使冬虫夏草完成它整个生命过程[4]。正因为有各种菌共生，才组成其完整生活史、化学谱和功效谱，才符合中药冬虫夏草本质。1.张永杰,孙炳达,等.分离自冬虫夏草可培养真菌多样性研究.《菌物学报》,年29卷4期.2.朱佳石,等.冬虫夏草成熟过程中中国被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉DNA共存和竞争增殖力及化学成份指纹谱改变.《菌物研究》,年5卷4期.3.高凌,李晓红,等.MassARRAY单核苷酸多态性(SNP)MALDI-TOF质谱基因分型法检测未成熟冬虫夏草子座中多个冬虫夏草菌突变基因型.《北京大学学报》,

年43卷2期.4.ZhangYJ,ZhangS,etal.HighdiversityoftheFungalcommunitystructureinnaturally-occurringOphiocordycepssinensis.PLoSOne,;5(12).天然冬虫夏草的相似度最高的虫草发酵制剂15/28冬虫夏草菌是一个“统一微生态系统”——分子系统学微观研究进展早期采取通用引物PCR扩增检测ITS片段测序冬虫夏草中只检出中国被毛孢序列[1]。应用“克隆–测序、真菌特异性引物PCR及探针Southern印记杂交”等分子生物学技术，冬虫夏草中还发觉其它真菌序列[2,3]。中国弯颈霉蝙蝠蛾拟青霉玫红假裸囊菌其它真菌序列研究者认为：应用通用引物可能忽略了天然冬虫夏草ITS扩增子多元异质性！

1.赵锦,王宁,陈月琴,李泰辉,屈良鹄.冬虫夏草无性型分子判别.《中山大学学报》,1999年38卷1期.2.ChenYQ,HuB,etal.GeneticvariationofCordycepssinensis,afruit-body-producingentomopathegenicspeciesfromdifferentgeographicalregionsinChina.FEMSMicrobiolLett;230.3.姚艺桑,朱佳石,等.冬虫夏草菌及其突变基因型在冬虫夏草成熟过程中差异表示动态改变.《菌物研究》,年9卷1期.天然冬虫夏草的相似度最高的虫草发酵制剂16/28多个研究中[1-3]，经过应用“RAPD分子标识多态性分析法”宏观分析冬虫夏草样本间整体差异，结果显示：中国被毛孢与天然冬虫夏草样本分子标识多态性相同度极低，仅有0.55~0.68，提醒天然冬虫夏草本身存在遗传背景巨大整体差异。冬虫夏草是一个“统一微生态系统”综合冬虫夏草分子系统学研究结果能够看出，冬虫夏草菌不是单一真菌，不存在正宗、杂菌之分，它是各种菌共生关系。注：冬虫夏草子囊果部位和中国被毛孢菌丝体提取基因组DNA用于PCR模板。AC：表示成熟冬虫夏草子囊果部位；Hs：表示中国被毛孢菌丝体。——分子系统学宏观研究进展1.魏鑫丽,魏江春,等.冬虫夏草及其相关类群分子系统学分析.《菌物学报》,年8卷1期.2.姚艺桑,高凌,等.丰度加权法分析冬虫夏草RAPD多态性高度差异及动态改变.《北京大学学报》,年46卷4期.3.钱敏,曾纬,张德利.冬虫夏草RAPD多态性分析.《时珍国医国药》,年22卷7期.天然冬虫夏草的相似度最高的虫草发酵制剂17/283、冬虫夏草菌种学术争论

——冬虫夏草菌种无性型研究天然冬虫夏草的相似度最高的虫草发酵制剂18/281989年，刘锡琎等创建中国被毛孢是冬虫夏草菌无性型学说广受关注。甚至曾描述中国被毛孢是冬虫夏草菌唯一无性型[1]。年，Barseghyan等发觉，冬虫夏草菌还存在其它无性型真菌即中国弯颈霉[2]。年，甚至有教授提出观点：“Attemptsatcultivatingthefungustoproducefruitingbodieshaveconsistentlyfailed[3]（当前，培养真菌产生子实体全部尝试均是失败）。”冬虫夏草菌无性型争论冬虫夏草菌无性型学术争议从未停顿！1.刘锡琎,郭英兰,俞永信,曾纬.冬虫夏草无性阶段分离和判定.《真菌学报》,1989年8卷1期.2.BarseghyanGS,WasserSP,etal.Growthandcultural-morphologicalcharacteristicsofvegetativemyceliaofmedicinalcaterpillarfungusOphiocordycepssinensisG.H.Sungetal.(Ascomycetes)IsolatesfromTibetanPlateau(P.R.China).IntlJMedMushrooms,;13(6).3.HuX,ZhangYJ,etal.Genomesurveyuncoversthesecretsofsexandlifestyleincaterpillarfungus.ChinSciBull,;58.天然冬虫夏草的相似度最高的虫草发酵制剂19/28天然虫草子座中国被毛孢形成人工子座图中国被毛孢人工子座未形成子囊果、不产生子囊孢子，其子座表面密布规则、深刻斜纹与天然子座形态完全不一样。中国被毛孢菌“唯一无性型”质疑——形态学不相同这表明中国被毛孢形成人工子座不一样于冬虫夏草子座，进而否定了中国被毛孢是冬虫夏草菌无性型。年，沈南英教授曾在“冬虫夏草国际会议”展示部分照片时通知：天然冬虫夏草的相似度最高的虫草发酵制剂20/28在认为中国被毛孢是无性型菌研究中，生长温度和速度被列为确定无性型试验依据[1]。不过，天然冬虫夏草生长成熟期5-7月，产区气温逐步升高，昼夜温差巨大，冬虫夏草子座生长速度很快。而中国被毛孢是嗜低温菌，生长极慢，伴随高原气温升高，其生长被深入抑制，取代它是突变基因型菌。中国被毛孢菌“唯一无性型”质疑1.郭兰英,肖培根,魏江春.论冬虫夏草生物学与可连续利用.《中国当代中药》,年12卷11期.——试验依据不合理生长温度和速度证据不支持“中国被毛孢是冬虫夏草无性型”说法。天然冬虫夏草的相似度最高的虫草发酵制剂21/28天然冬虫夏草菌各菌种之间ITS1-5.8S-ITS2片段序列相同度对比菌种序列对比相同度结果分析不一样菌群类GC偏倚型菌与AT偏倚型菌ITS1-5.8S-ITS2：86%-89%含有显著种属差异同种菌群类AT偏倚型菌ITS1-5.8S-ITS2：90%-94%；5.8S片段与GC偏倚型菌和其它大量真菌比较：86%~88%超出了物种科、属水平正常变异不一样菌种类中国被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉5.8S：98%；ITS1和ITS2序列相同度≤72%证实5.8S片段序列遗传进化保守性冬虫夏草ITS片段扩增子含有多元异质性。从而验证了菌物学研究从冬虫夏草中培养、判定出各种真菌以及当前尚无法培养真菌种。深入支持了冬虫夏草是“统一微生态系统”学说，否定了中国被毛孢是虫草菌唯一无性型学说。高凌,朱佳石,等.单核苷酸多态性MALDI-TOF质谱基因分型法检测未成熟冬虫夏草子座中多个冬虫夏草菌突变基因型.《北京大学学报》,年43卷2期.中国被毛孢菌“唯一无性型”质疑——基因序列不支持天然冬虫夏草的相似度最高的虫草发酵制剂22/28冬虫夏草菌无性型研究现实状况迄今现状学界尚未获得确定冬虫夏草无性型的直接证据，即目前无法严格按照科赫氏法则(Koch′spostulates)完成冬虫夏草有性子实体人工诱发。存在困难自然界中多数真菌至今还不可培养，导致真菌分离培养、纯化和形态学检验以及全基因测序的困难；子囊孢子微循环产孢研究受制于真菌分离培养的技术瓶颈，能否实现全部微循环产孢过程尚有疑问，尤其是对子囊孢子萌发和人工培养困难的真菌菌种。天然冬虫夏草的相似度最高的虫草发酵制剂23/283、冬虫夏草菌种学术争论

——冬虫夏草菌菌种及产品科学认识天然冬虫夏草的相似度最高的虫草发酵制剂24/28蝙蝠蛾拟青霉、中国被毛孢和其它各种冬虫夏草菌rDNA片段共存于冬虫夏草全基因组中，其生物量伴随冬虫夏草成熟展现大幅度、非同时动态改变。子座中中国被毛孢一直不是优势菌，僵虫中中国被毛孢丰度伴随冬虫夏草成熟而显著降低[1,2]。研究证实，蝙蝠蛾拟青霉和各种冬虫夏草菌菌种复合体存在于蝙蝠蛾幼虫活体肠道，也存在于冬虫夏草子囊果和子囊孢子。与纯化中国被毛孢比较，这一菌种复合体中菌物协同共生，对蝙蝠蛾幼虫侵染活性增强39倍之多[3,4]。正因冬虫夏草菌有各种菌共生，才组成其完整生活史、化学谱和功效谱，才符合冬虫夏草独特药学性质。科学认识冬虫夏草1.姚艺桑,朱佳石,等.冬虫夏草菌及其突变基因型在冬虫夏草成熟过程中差异表示动态改变.《菌物研究》,年9卷1期.2.张永杰,孙炳达,张姝,等.分离自冬虫夏草可培养真菌多样性研究.《菌物学报》,年29卷4期.3.ZhuJS,ZhaoJG,etal.DynamicallyalteredfungalexpressionsofPaecilomyceshepialiand7Ophiocordycepssinensisgenotyp