JJF 1712-2018 薄层色谱扫描仪校准规范

中华人民共和国国家计量技术规范8薄层色谱扫描仪校准规范s5发布 5实施国家市场监督管理总局 发布8薄层色谱扫描仪校准规范rs

8归 口 单 位:全国物理化学计量技术委员起 草 单 位:中国计量科学研究院广州计量检测技术研究院本规范委托全国物理化学计量技术委员会负责解释本规范主要起草人:陶 红中国计量科学研究院)黄 亮广州计量检测技术研究院)黄 挺中国计量科学研究院)参加起草人:张 伟中国计量科学研究院)张力玲广州计量检测技术研究院)何超平广州计量检测技术研究院)目 录引言………………………

Ⅱ)1范围……………………2引用文件………………3术语……………………

1)1)1)1比移值) ……………………

1)4概述……………………5计量特性………………6校准条件………………1实验室环境条件……………………2校准用标准物质及设备……………7校准项目和校准方法…………………1薄层板的准备………………………2线性误差……………3测量重复性…………8校准结果表达…………9复校时间间隔…………

1)2)2)2)2)2)2)3)3)4)4)附录A 校准记录参考格式……………

5)附录B 校准证书内页)参考格式…………………

6)附录C 校准用标准溶液的配制………

8)附录D 线性误差测量不确定度评定示例……………

9)Ⅰ引 言本规范是以1通用计量术语及定义0国家计量校准规范编写规则F2测量不确定度评定与表示》为基础和依据,参考7液相色谱法术语 柱色谱法和平面色谱法》有关内容制定的。本规范为首次发布。Ⅱ薄层色谱扫描仪校准规范范围本规范适用于薄层色谱扫描仪以下简称仪器的校准。引用文件本规范引用了以下文件:7液相色谱法术语 柱色谱法和平面色谱法凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本规范凡是不注日期的引用文件,其最新版本包括所有的修改单适用于本规范。术语7中界定的及以下术语和定义适用于本规范。比移值fe]平面色谱法中,溶质迁移距离除以流动相迁移距离,可由下式表示。R 式中:溶质迁移距离,;m流动相迁移距离,概述

f薄层色谱法是将样品溶液点于薄层板上,在展开容器内用展开剂展开,使样品所含成分分离。仪器的基本原理为:样品在薄层板上展开后,形成斑点或经显色后形成斑点,用一定波长的光照射到斑点上,对斑点进行光谱扫描,根据扫描得到的比移值、吸收曲线的最大吸收波长进行定性,斑点的峰面积或峰高进行定量。仪器一般由氘灯钨灯组合光源、单色器、薄层板及检测器等组成,可进行单光束、双光束或双波长测定,有反射模式和透射模式,扫描方式有线性扫描和锯齿扫描。仪器的结构简图见图。1计量特性

图1仪器结构简图仪器主要计量技术指标见表。表1仪器主要计量技术指标序号技术指标要求1线性误差不超过3·12测量重复性同点比移值重复性2同点峰面积重复性3同板峰面积重复性5注:以上技术指标不用于合格性判定,仅供参考。校准条件实验室环境条件1环境温度℃。2湿度:H 。3周围无强烈振动,无强电、磁场干扰。4供电电源电压))。校准用标准物质及设备点样器经校准的L平头微量注射器。食用合成色素苋菜红溶液标准物质0·1,相对扩展不确定度1 。校准项目和校准方法薄层板的准备2准备一片空白高效硅胶板,硅胶粒度为,厚度为),规格为。使用前检查板的均匀度,观察其透射光和反射光,透射光反映硅胶涂布的均一性,反射光反映质地的均一性,表面应均匀、平整、光滑、无麻点、无气泡、无破损及污染。在洁净干燥的环境下,先用铅笔在板上距末端处轻轻画一横线,用微量注射器吸取表2中的各浓度的食用合成色素苋菜红标准溶液L在横线上依次点样,点样所形成的样品斑点直径不大于4,两个斑点中心之间间距至少为0,点样时注意不要损伤薄层板表面,并晾干。表2食用合成色素苋菜红标准溶液 ·1标准溶液编号1234标准溶液浓度1234注:食用合成色素苋菜红标准溶液的制备参见附录C。线性误差将点好食用合成色素苋菜红标准溶液的薄层板固定于主机的装载台上,

选择反射模式,调节主机上的光斑,使之能扫描到整个样品斑点,在主机或工作站的控制面板上设置扫描的起止位置,样品组的数量和扫描间距,扫描波长为,分别扫描3次,计算峰面积A,将A和标准溶液浓度s按最小二乘法拟合校准曲线,建立线性方程,见公式。:

Aas

)式中A峰面积的测量值,峰面积单位;校准曲线的截距,峰面积单位;—校准曲线的斜率,峰面积单·;—标准溶液的浓度,·1。 b将各斑点3次扫描的峰面积计算平均值A,从校准曲线上求得拟合浓度p,见公式。b式中:p拟合浓度,·1

)按照公式)计算标准曲线各测量点拟合浓度的线性误差。 ()式中:

cps 3拟合浓度的线性误差,·1。测量重复性同点比移值重复性和同点峰面积重复性对表2中浓度为4·1的食用合成色素苋菜红标准溶液所形成的斑点连3n1i-A2n-1续扫描7n1i-A2n-1A式中:A

1

0

)重复测量次数ii次测量比移值或峰面积的测量值;An次重复测量比移值或峰面积的平均值。同板峰面积重复性对表2中浓度为4·1的食用合成色素苋菜红标准溶液按1中的方法在薄层板上平行点样7次,每次点样体积。记录7个样品斑点扫描图谱的峰面积,按公式)计算相对标准偏差,即为同板峰面积重复性。校准结果表达校准结果应在校准证书上反映。校准证书至少包括以下信息:标题:校准证书;实验室名称和地址;进行校准的地点如果与实验室的地址不同证书的唯一性标识如编号每页及总页数的标识;客户的名称和地址;被校对象的描述和明确标识;进行校准的日期,如果与校准结果的有效性和应用有关时,应说明被校对象的接收日期;如果与校准结果的有效性和应用有关时,应对被校样品的抽样程序进行说明;校准所依据的技术规范的标识,包括名称及代号;本次校准所用测量标准的溯源性及有效性说明;校准环境的描述;校准结果及测量不确定度的说明;对校准规范的偏离的说明;校准证书或校准报告签发人的签名、职务或等效标识;校准结果仅对被校对象有效的声明;未经实验室书面批准,不得部分复制证书的声明。复校时间间隔仪器的复校时间间隔建议不超过1年,更换重要部件、维修、重新安装或对仪器性能有怀疑时,应随时校准。4附录A校准记录参考格式委托单位及地址: 校准日期:仪器型号: 制造厂:出厂编号: 证书编号:环境温度: 环境湿度:线性误差:标准浓度·1123拟合浓度·1线性误差·11234线性方程: 不确定度U= ·12测量重复性:序号1234567平均RSD同点比移值峰面积同板校准员 核验员 5附录B校准证书内页)参考格式证书编号××××××—×××××××是×××法定计量技术机构。×××的质量管理体系符合5标准,经中国合格评定国家认可委员会认可,证书号.×××。校准结果不确定度的评估和表述均符合1的要求。校准所依据参照的技术文件代号、名称8薄层色谱扫描仪校准规范校准环境条件及地点温度:湿度:℃RH地点:其他:校准使用的计量基标)准装置含标准物质主要配套设备名称测量范围不确定度/准确度等级证书编号证书有效期至)6证书编号××××××—××××标准浓度标准浓度·1)拟合浓度·1)线性误差·1)1234线性方程: 校准结果的不确定度U= ·12校准项目7同点比移值重复性同点峰面积重复性同板峰面积重复性线性误差:表1测量重复性:表2以下空白)说明:根据客户要求和校准规范的规定,通常情况 个月校准一次。声明:我院所)仅对加盖×××”的完整证书负责。本证书的校准结果仅对本次所校准的计量器具有效。未经实验室书面批准,不得部分复制本证书。78附录C标准物质与试剂

校准用标准溶液的配制食用合成色素苋菜红溶液标准物质0·1,相对扩展不确定度≤1;乙醇:优级纯。设备使用经检定或校准的可调移液器

、容量瓶,

。表1设备及规格名称规格名称规格可调移液器L容量瓶0L校准用标准溶液的配制 ,配制校准用标准溶液的体积与所需母液的体积与浓度见表2的母液,用乙醇稀释、定容至所需体积,摇匀。表2食用合成色素苋菜红标准溶液配制方法

准确吸取表2中所配制的标准溶液所取母液·1)配制体积/mL·1)所取体积L100020003000400088附录D线性误差测量不确定度评定示例测量方法和测量模型将点好食用合成色素苋菜红标准溶液的薄层板固定于主机的装载台上,

选择反射模式,调节主机上的光斑,使之能扫描到整个样品斑点,在主机或工作站的控制面板上设置扫描的起止位置,样品组的数量和扫描间距,扫描波长为,分别扫描3次,计算峰面积A,将A和标准溶液浓度s按最小二乘法拟合校准曲线,得到线性方程。Aas将各斑点3次扫描的峰面积计算平均值A,用线性方程求得拟合浓度cp:bb

))按照公式)计算校准曲线各测量点的拟合浓度线性误差: ( ), cps () 3因此构成:

校准曲线各测量点的拟合浓度线性误差c的标准不确定uc 由2部分4种标准溶液的浓度与测量值A拟合的校准曲线求得p时测量所产生的不确定度由标准物质母液配制成4种标准溶液时带来的不确定度。拟合浓度线性误差的测量不确定度)为:=) )标准不确定度分量评定以测量4·1溶液拟合浓度的线性误差的不确定度评定为例。1校准曲线拟合值p的标准不确定度)采用0·1的食用合成色素苋菜红溶液标准物质配制4种标准溶液,其浓度分别为1·12·13·14·1。测量4种标准溶液浓度的峰面积测量值A,每个浓度测量3次,结果列于表:表14种标准溶液的峰面积测量值)1231624232232044573由以上数据进行线性拟合得到的线性方程为:9As )由校准曲线求得拟合值的不确定度按公式)计算。c)R 1

p

)p=2( )bp+bp+n+ncjnj-aj2n-2

=

7)由校准曲线求p时产生的不确定度;R从校准曲线求得的A与相应j测得值之差按贝塞尔公式求出的标准偏差;p拟合浓度的测定次数,其值为;标准溶液的测定总次数,其值为;不同标准溶液中浓度的平均值n次·1;j标准溶液浓度的测量值,·1;j标准溶液浓度的峰面积测量值。将表1中的数据代入公式)和公式)计算得出6,R5·1。 ()由母液稀释配制成标准溶液时产生的不确定度分量us移液器和容量瓶、稀释因子的不确定度分量)=将母液0·1经0稀释得到4·1溶液,由L移液器移取L定量到0L容量瓶来完成:=4f

5fVf

))式中:

=Vi44·1标准溶液的浓度,·1;5母液0·1溶液标准物质的浓度,·1;f稀释因子;稀释后体积;稀释前体积。对L移液器和0L容量瓶进行不确定度分析,由校准、定容和使用温度3个不确定度来源进行分析L移液器的体积的不确定度分析如下:校准体积引起的标准不确定度0℃时L移液器标称容量的允许差为1,按均匀分布:38L16L30定容的重复性查校准证书得测量重复性为5

,即0。配制溶液时温度与移液器校准时温度不同温度变化的范围为2℃,近似于矩形分布:38L2L以上3项合成为

3移液器的标准不确度

L:L=