靶向肝纤维化

靶向肝纤维化第1页，共25页，2023年，2月20日，星期四基质降解基质降解基质降解基质合成发病机制促肝纤维化形成细胞因子有：转化生长因子β1(TGF-β1)结缔组织生长因子(CTGF)血小板源性生长因子(PDGF)肿瘤坏死因子α(TNF-α)白细胞介素1(IL-1)等;抑制肝纤维化形成的细胞因子有：干扰素(IFN)肝细胞生长因子(HGF)白细胞介素10(IL-10)等。第2页，共25页，2023年，2月20日，星期四（1）许多体外和体内模型机制的确认和抗纤维化因子试验方面的限制。（2）缺乏量化肝纤维化程度和肝纤维化的动态进展以及患者肝纤维化逆转的敏感方法。

理论应用到临床实践上受到了阻碍：本文主要讨论当前在抗肝纤维化药物的研制方面的问题和易犯的错误，以及克服临床验证障碍的策略。第3页，共25页，2023年，2月20日，星期四HSC的活化和增殖上游引起HSC激活的细胞的激活致纤维化生长因子，细胞因子和其他调节因子在HSC细胞内致纤维化途径和上游细胞的激活刺激纤维降解过程逆转当前的纤维化PromisingTargetsforAntifibroticTherapies有前景的靶向抗肝纤维化治疗

抗纤维化治疗的靶点有细胞，信号转导通路和在肝纤维化形成或逆转过程中的关键性分子。例如：

第4页，共25页，2023年，2月20日，星期四第5页，共25页，2023年，2月20日，星期四第6页，共25页，2023年，2月20日，星期四InVitroModels(体外模型)AnimalModels(动物模型)AntifibroticDrugDevelopment(抗纤维化药物开发)

SerumFibrosisMarkers(血清纤维化标志物)ImagingofLiverFibrosis(肝纤维化的影像学检查)PreclinicalModelstoTestPotentialAntifibrotics检测潜在抗肝纤维化的临床前模型第7页，共25页，2023年，2月20日，星期四InVitroModels(体外模型)培养激活的肝星状细胞和肝星状细胞系肝纤维化过程中涉及的其他类型细胞的培养组织精细切片培养

人工器官组织培养工程优点：低成本、高重复性缺点：不能反映体内控制纤维形成或纤维溶解的复杂的相互作用第8页，共25页，2023年，2月20日，星期四培养激活的肝星状细胞和肝星状细胞系

肝星状细胞的多种起源典型肝星状细胞系：CCL4诱导的肝纤维化分离出的小鼠自发永久性HSC的克隆SV40病毒T抗原诱导的人HSC系LX-1和LX-2永久细胞端粒酶逆转录酶基因的逆转录酶病毒载体转染生成的TWNT其他类型细胞的培养:活化胆管上皮细胞系、肝细胞、库普弗细胞、各种淋巴细胞亚群第9页，共25页，2023年，2月20日，星期四离体新鲜精细肝切片能维持肝细胞至少24小时的代谢功能与传统细胞培养相比优势：切片可以直接从包含自然发生激活的肝星状细胞的纤维化肝脏制备相当于三维重建的真实纤维化的肝细胞（实质细胞和间质细胞）微环境从少数动物制备的切片中可以有效地筛选多种药物可以同时对药物的肝毒性进行测试组织精细切片培养毒理学研究第10页，共25页，2023年，2月20日，星期四人工器官组织培养工程通过生物工程方法在精确控制的环境中，以恢复正常或病理肝脏结构为目标的微型和纳米技术已经取得了很快的发展。物理工程生物物理工程生物2D3D3D:更加生理，具有重建体外多细胞性肝环境的潜力。第11页，共25页，2023年，2月20日，星期四AnimalModels(动物模型)动物模型实验结果的解释胆汁性肝纤维化的动物模型肝毒素诱导的肝纤维化动物模型非酒精性脂肪性肝炎的动物模型转基因和基因敲除在体模型第12页，共25页，2023年，2月20日，星期四小鼠模型优点：有经济效益需要更少的数量（可能是药物开发早期阶段的一个限制因素）允许使用基因改造（转基因或基因敲除）的动物彻底验证目标需要特别注意小鼠的遗传背景，这会影响它们发生肝纤维变性的敏感度。结果解释的主要内容：肝纤维化研究敏感品系的选择遗传背景的纯洁性使用野生型同窝的对照第13页，共25页，2023年，2月20日，星期四肝毒素诱导的肝纤维化动物模型四氯化碳（CCl4）诱导的反复肝细胞死亡所致肝纤维化可以对急性肝损伤、肝纤维化进展和纤维化逆转的研究缺点：严重的肝细胞坏死、对大量氧化应激的依赖肝毒素硫代乙酰胺(TAA)的长期注射非酒精性脂肪性肝炎的动物模型最有效的模型利用代谢综合征患者的遗传易感性与高脂饮食相结合。当添加蛋氨酸胆碱缺乏饮食时，自发代谢综合征及2型糖尿病动物模型(OLETF大鼠)在8周内发生肝硬化。第14页，共25页，2023年，2月20日，星期四AntifibroticDrugDevelopment(抗纤维化药物开发)靶向途径替代和补充药物药物重新定位靶向药物输送到纤维化的肝细胞第15页，共25页，2023年，2月20日，星期四靶向途径第16页，共25页，2023年，2月20日，星期四替代和补充药物第17页，共25页，2023年，2月20日，星期四靶向药物输送到纤维化的肝细胞增加局部药物浓度减少副作用

第18页，共25页，2023年，2月20日，星期四NoninvasiveMeanstoAssessLiverFibrosisandFibrogenesis(评估肝纤维化及纤维形成的无创性方法)血清纤维化标志物用蛋白质组学和转录组学方法寻找更好的血清标志物的尝试肝纤维化的影像学检查超声弹性成像（FibroScan）肝纤维化和纤维形成的分子成像第19页，共25页，2023年，2月20日，星期四纤维化标志物组合：更好地反映结缔组织的动态改变

FibroTest:α2-巨球蛋白、载脂蛋白、肝珠蛋白、总胆红素、γ-谷氨酰胺转肽酶）ELF评分

:年龄、HA、血清前胶原肽（PⅢNP）、TIMP-1ELF评分研究显示：82%～88%患者可避免肝活组织检查。血清标志物第20页，共25页，2023年，2月20日，星期四蛋白质组学第21页，共25页，2023年，2月20日，星期四转录组就是转录后的所有mRNA的总称。与基因组不同的是，转录组的定义中包含了时间和空间的限定。同一细胞在不同的生长时期及生长环境下，其基因表达情况是不完全相同的。通常，同一种组织表达几乎相同的一套基因以区别于其他组织。转录组谱可以提供什么条件下什么基因表达的信息，并据此推断相应未知基因的功能，揭示特定调节基因的作用机制。通过这种基于基因表达谱的分子标签，不仅可以辨别细胞的表型归属，还可以用于疾病的诊断。转录组学转录组学是从RNA水平研究基因表达的情况。研究转录组的一个重要方法就是利用DNA芯片技术检测有机体基因组中基因的表达。第22页，共25页，2023年，2月20日，星期四超声弹性成像（FibroScan）

以超声（5MHz）和低频弹